Approccio innovativo al triage del precancro orale (iTOP)

Accumulo dei pazienti Questo studio si svolgerà presso la Otolaryngology Clinic, Vancouver General Hospital. Trecentosessanta soggetti volontari saranno arruolati per partecipare allo studio. Di seguito sono fornite le fasi dettagliate dell'accredito dei pazienti dello studio.

1. La creazione di pipeline di riferimento per una vera coorte OPL basata sulla popolazione in BC.

   In BC, il BC Oral Biopsy Service (OBS) e il Dipartimento di Patologia del Vancouver General Hospital (VGH) ricevono rispettivamente biopsie e campioni chirurgici dalle comunità odontoiatriche e mediche. Questi servizi di biopsia centralizzati offrono un'opportunità molto rara per stabilire una coorte di OPL basata sulla popolazione. Il team di patologi identificherà i pazienti idonei attraverso il processo di disconnessione della patologia e chiamerà i medici richiedenti per notificare la potenziale pipeline di rinvio come gestione alternativa per questi pazienti. Attualmente, esiste una pipeline di riferimento per displasia grave o malignità orale più avanzata che utilizza questo modello ed è stata stabilita per indirizzare i pazienti chirurgici per lo studio COOLS finanziato dal TFRI (da Drs. Durham e Poh; H09-03090). Questo stesso sistema/pipeline verrà utilizzato per identificare i pazienti idonei con diagnosi di displasia lieve e/o moderata identificata sia dalla comunità medica che da quella dentale.

2. Idoneità I soggetti di età superiore ai 19 anni frequentano la clinica odontoiatrica o di otorinolaringoiatria presso il Vancouver General Hospital (Vancouver Acute) per la valutazione delle lesioni orali diagnosticate con displasia lieve o moderata; sono disposti a prestare il consenso informato.
3. Reclutamento e procedure di consenso informato Una settimana prima della data dell'appuntamento verrà inviata ai pazienti potenzialmente idonei una lettera di invito relativa a questo studio insieme al documento di consenso. Il giorno della visita clinica, l'assistente di ricerca illustrerà lo studio al soggetto idoneo e acquisirà il consenso firmato dai partecipanti. Saranno reclutati 400 soggetti. Questi pazienti saranno monitorati una volta ogni sei mesi (l'attuale standard di cura). Quando clinicamente giustificato a causa di segni di progressione della malattia o al segno di follow-up di 2 anni, verranno eseguite due biopsie con punch da 5 mm su aree di lesione con diversa gravità (come determinato dalle tecnologie di imaging). La biopsia comparativa a due anni su una lesione stabile è l'attuale standard di cura.

Procedure dello studio Lo studio è uno studio longitudinale che segue il programma di follow-up dell'attuale standard di cura per tali lesioni, vale a dire una volta ogni 6 mesi e biopsia comparativa una volta ogni 2-3 anni. I punti temporali importanti sono la visita iniziale (baseline), alla fine del secondo, quinto e ottavo anno di visite di follow-up. Tuttavia, il tempo della biopsia si basa esclusivamente sul giudizio clinico dei medici, cioè sui segni della progressione della malattia.

1. Raccolta dei dati clinici Dopo che il soggetto ha acconsentito, gli verrà chiesto di completare una serie di questionari per la raccolta di dati demografici e informazioni sui fattori di rischio. Al soggetto verrà assegnato un ID dello studio e nessun identificatore univoco sarà collegato ai dati raccolti. Verrà utilizzato un file separato per collegare l'ID dello studio e gli identificatori del paziente. Questo è importante per facilitare la gestione del paziente e acquisire le informazioni sull'esito. Questo file con l'identificativo univoco dei pazienti sarà conservato nel file protetto da password nel computer del BC Cancer Research Center (BCCRC) in un ufficio chiuso a chiave nel BCCCRC e solo i PI possono accedere al file. Il questionario sullo stato di salute e HAI non ha finalità diagnostiche. Se i medici ritengono che nel partecipante sia presente depressione o ansia (giudizio clinico dei medici), i medici dello studio incaricati di questo specifico partecipante comunicheranno con il medico di famiglia del paziente e indirizzeranno il partecipante a una fonte adeguata per un'ulteriore valutazione e gestione.

2. Raccolta dei dati utilizzando il dispositivo di studio

   • I medici esamineranno i pazienti utilizzando WL, VELScope VX per FV (precedentemente approvato, R05-0116), OCT (precedentemente approvato, H09-01955) e un microscopio confocale portatile (H11-00011).
   • Imaging OCT: dopo aver identificato le aree anormali per la biopsia utilizzando l'esame WL e FV, il medico posizionerà una sonda a fibre ottiche dell'OCT sulle aree di interesse della mucosa orale. Il sito per il posizionamento della sonda sarà determinato dai PI (otorinolaringoiatri-chirurghi della testa e del collo (SD/DA) e/o specialista in medicina orale/patologia orale (Ng/Poh)). Le immagini verranno registrate dalla macchina per una successiva analisi.
   • Imaging al microscopio confocale: dopo l'imaging OCT, il medico applicherà una soluzione topica di acriflavina cloridrato allo 0,05% sulle aree di interesse della mucosa orale per 30 secondi prima dell'imaging. Il medico posizionerà un microscopio confocale portatile sulla superficie della mucosa per registrare l'osservazione per un'analisi successiva.
   • Verranno presi tutti gli sforzi necessari per ridurre qualsiasi lieve disagio che potrebbe essere associato al posizionamento della sonda all'interno della cavità orale di un soggetto. La sonda OCT o il microscopio confocale saranno coperti da una barriera di plastica e disinfettati con metodi standard utilizzati per gli strumenti del cavo orale prima e dopo l'uso del soggetto. L'esame del dispositivo non richiederà più di 15 minuti oltre all'orario dell'appuntamento del soggetto per le visite di routine. L'intensità massima dell'illuminazione del tessuto per ciascuna misurazione sarà inferiore al valore limite di soglia (TLV) stabilito dalla Conferenza americana degli igienisti industriali governativi (ACGIH)11 per l'esposizione alla luce a banda larga.
   • Le informazioni ottenute dalle misurazioni della riflettanza polarizzata saranno confrontate con l'istologia e la patologia quantitativa (punteggio del fenotipo nucleare) delle sezioni di tessuto della lesione. I dati spettrali raccolti da aree dall'aspetto normale dalla mucosa dall'aspetto normale adiacente e dalla mucosa controlaterale saranno utilizzati per determinare la variazione da paziente a paziente nella riflettanza polarizzata della mucosa orale.
3. Raccolta di campioni di spazzolatura esfoliativa (precedentemente approvata, R05-0116) Una spazzola per citologia Innovatec (Arcona Inc) viene utilizzata per raccogliere le cellule esfoliate dalla lesione orale. Queste spazzole vengono trasferite nella soluzione PreservCyt® (Cytyc Corp.) e conservate in frigorifero a 4ºC.
4. Raccolta del campione di sangue In totale, 12 ml (3/4 di un cucchiaio) di campione di sangue saranno raccolti in 1 vacutainer SST e 1 EDTA nella clinica da personale di ricerca addestrato. Il campione di sangue verrà processato e i campioni di siero, plasma e puffy coat saranno aliquotati e congelati a -80ºC per analisi future. I campioni di DNA nel puffy coat saranno estratti e utilizzati come normale campione di controllo per l'analisi della perdita di eterozigosi (LOH). A tale scopo verrà utilizzato un consenso separato. Prevediamo che tutte le aliquote di siero, plasma e puffy coat saranno esaurite. Qualsiasi tessuto rimanente non verrà scartato o venduto, ma verrà conservato in un congelatore chiuso a chiave presso la BC Cancer Agency per un periodo massimo di quindici anni in modo che i risultati di questo studio possano essere confermati.
5. Prelievo di tessuto congelato In caso di biopsia, il tessuto sarà diviso in due. La metà del campione verrà fissata nella soluzione di formalina e inviata al laboratorio di patologia per l'analisi come parte normale della procedura di diagnosi medica. Parte di questo tessuto verrà conservata e utilizzata solo dopo la diagnosi. In nessun momento il tessuto verrà rimosso esclusivamente a scopo di ricerca. Il tessuto donato riceverà un codice per l'identificazione dal responsabile del progetto e sarà conservato in congelatori sicuri presso la BC Cancer Agency fino a quando il materiale genetico (DNA e RNA) non sarà stato estratto per l'analisi. A tale scopo verrà utilizzato un consenso separato. Prevediamo che tutto il tessuto donato sarà esaurito. Qualsiasi tessuto rimanente non verrà scartato o venduto, ma verrà conservato in un congelatore chiuso a chiave presso la BC Cancer Agency per un periodo massimo di quindici anni in modo che i risultati di questo studio possano essere confermati.
6. Microdissezione tissutale ed estrazione del DNA. I blocchi di tessuto fissati in formalina e inclusi in paraffina della biopsia iniziale e della biopsia della visita di follow-up saranno ottenuti dal Dipartimento di Anatomia Patologica, il Vancouver General Hospital. al momento del cambiamento clinico oa 24 mesi verrà richiesta una visita di follow-up per l'elaborazione. Dieci sezioni spesse 10 µm per il campione di DNA, 2 sezioni di tessuto non colorate da 4 µm per l'analisi istologica quantitativa. Aree di displasia sulle sezioni spesse saranno identificate e microdissezionate. Il campione di DNA dall'epitelio sarà estratto e utilizzato per l'analisi LOH.