Стволовые клетки у больных NF1 с опухолями центральной нервной системы

Гипотеза: Субъекты с NF1 и опухолями центральной нервной системы с агрессивными поражениями (включая, помимо прочего, глиомы зрительного пути) и/или с опухолями, вызывающими неврологические (в том числе зрительные) заболевания, будут проявлять уникальные различия в их стволовых клетках и стволовых клетках. полученных дифференцированных клеток по сравнению с пациентами с NF1 и опухолями центральной нервной системы, у которых заболевание менее агрессивное, и/или у пациентов с опухолями, вызывающими минимальную заболеваемость или не вызывающую ее вообще.

Предпосылки и значение. Глиомы зрительного пути (ОПГ) представляют собой астроцитарные опухоли низкой степени злокачественности, в первую очередь поражающие зрительный нерв, хиазму и тракты, которые встречаются в основном у детей. Почти у 20% детей с нейрофиброматозом типа 1 (НФ1) разовьются ОПГ, хотя менее чем у половины из-за опухоли разовьется потеря зрения.1 Эти опухоли имеют отличные показатели выживаемости, что делает потерю зрения основным заболеванием у этих пациентов. Кроме того, OPG присущи зрительному пути, поэтому их биопсию проводят редко, если вообще когда-либо. Эта нехватка ткани OPG ограничивает нашу способность прояснить биологические различия между OPG, которые вызывают потерю зрения, и теми, которые этого не делают. Астроцитарные глиомы низкой степени злокачественности в других областях головного мозга, включая гипоталамус, ствол мозга и мозжечок, также могут быть обнаружены у детей, ассоциированных с NF1. Эти опухоли головного мозга, связанные с NF1, могут прогрессировать, а также расти с разной скоростью и могут вызывать неврологическую дисфункцию в диапазоне от серьезного нарушения до незначительной симптоматики или ее отсутствия.

Это исследование направлено на разработку линий стволовых клеток у детей с опухолями центральной нервной системы, связанными с NF1 (зрительный нерв и опухоли из других участков головного мозга). Стволовые клетки этих субъектов позволят получить критическое представление о механизмах, ответственных за прогрессирование опухоли, и симптомах, связанных с центральной нервной системой, что ускорит идентификацию терапевтических целей.

Предварительные исследования. Три недавние исследовательские разработки позволяют разработать модель заболевания для конкретного пациента в чашке (так называемая «модель болезни человека в чашке») и изучить клетки, имеющие отношение к заболеванию, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК), в чашке. изогенный фон. Во-первых, клетки, подобные эмбриональным стволовым клеткам (ЭСК), также известные как индуцированные плюрипотентные стволовые клетки или ИПСК, могут быть получены из клеток кожи или крови у взрослых пациентов. Во-вторых, недавние исследовательские усилия начали разрабатывать протоколы культивирования, которые дифференцируют ИПСК в различные типы клеток в центральной и периферической нервной системе (ЦНС и ПНС), которые поражаются у пациентов с NF1. В-третьих, технология CRISPR/CAS9 позволяет генетически редактировать гены специфических заболеваний либо путем восстановления существующих мутантных генов, либо путем создания новых мутаций. Для того, чтобы занимать лидирующие позиции в исследованиях NF1, Институту семейного нейрофиброматоза Гилбертов (GFNI) в Детском национальном медицинском центре будет важно изучить эти недавние захватывающие исследовательские разработки, систематически разрабатывать модели заболеваний человека с NF1 для конкретных пациентов и предоставить инструмент для скрининга и оценки лекарств у отдельных пациентов с НФ.

Дизайн и методы:

3.1 Дизайн исследования Поперечное исследование пациентов с NF1 с опухолями в центральной нервной системе, подтвержденное МРТ.

3.2 Учебные визиты У испытуемых будет только один визит для сбора образца крови.

3.3 Процедуры исследования 3.31 Взятие крови У субъектов берут 20 мл цельной крови либо во время 1) их седативного действия для проведения МРТ по клиническим показаниям (IV уже ставится для клинических целей), либо в амбулаторной лаборатории.

3.32 Обработка стволовых клеток Собранная кровь будет немедленно передана в центр стволовых клеток в Национальном институте здравоохранения для обработки образцов с целью разработки линий стволовых клеток.

3.33 Демографические данные Мы соберем данные о возрасте, поле, расе, этнической принадлежности субъекта, местонахождении опухолей в центральной нервной системе на МРТ, истории потери зрения и других неврологических нарушениях.

3.34 Статистический анализ В качестве первого шага для создания библиотеки стволовых клеток из конкретной популяции детей с НФ1 с опухолями нервной системы на данном этапе нам не потребуется статистический анализ.