Процент аллелей BRAFV600E и исход при карциноме щитовидной железы (ABOUT)

ПРЕДПОСЫЛКИ Папиллярная карцинома щитовидной железы (ПРЩЖ) обычно имеет отличный прогноз с 5-летней выживаемостью более 95%. Даже когда PTC метастазирует в регионарные лимфатические узлы, что является частым явлением, прогноз, как правило, отличный. Однако есть некоторые пациенты с агрессивным фоном или со специфическими клинико-патологическими особенностями, которые демонстрируют агрессивное поведение в развитии. Некоторые клинико-патологические признаки, а именно подтип патологии, возраст, отдаленные метастазы и метастазы в лимфатические узлы, экстратиреоидное распространение и полнота резекции, могут использоваться для прогнозирования прогноза и были приняты в системах стадирования, таких как классификации AMES, MACIS и AJCC TNM.

Генетический фон является мощной прогностической детерминантой только применительно к некоторым генным мутациям, таким как промотор TERT и мутации p53. Прогностическое значение BRAFV600E, наиболее часто встречающегося онкогена в PTC, слабое. Это коррелирует с большим распространением, метастазированием в лимфатические узлы и поздней стадией (III/IV). Его корреляция с исходом в PTC была объектом многих не всегда согласующихся исследований. Было необходимо крупное многоцентровое исследование, чтобы однозначно продемонстрировать связь между BRAFV600E и рецидивом рака и смертностью. Риск PTC, содержащего BRAFV600E, остается низким (коэффициент риска рецидива 2,66), и поиск этой мутации не рекомендуется для клинического ведения пациентов с низким риском рака щитовидной железы.

Различные исследовательские группы представили данные о гетерогенности ПТК, состоящих из смеси опухолевых клеток с клетками дикого типа и BRAFV600E (5, 6). Важность процентного содержания BRAFV600E-позитивных клеток в опухоли была продемонстрирована в 168 PTC. Анализ соотношения BRAFV600E/BRAFдикого типа был выполнен с помощью пиросеквенирования, и более высокое соотношение положительно коррелировало с возрастом пациента, объемом опухоли, метастазами в лимфатические узлы и с наихудшим исходом заболевания. У пациентов с опухолями с соотношением BRAFV600E/BRAFдикого типа ≥ 30% риск рецидива опухоли составлял 5,1, тогда как в BRAFV600E-положительных опухолях он составлял всего 1,75, если соотношение аллелей не учитывалось. Качественный анализ положительного BRAFV600E по сравнению с отрицательным PTC может объяснить несогласованные корреляции с клинико-патологическими особенностями и исходом в разных когортах пациентов с разным соотношением аллелей BRAFV600E, и, в конечном счете, качественный анализ мутационного статуса BRAF может снизить силу его клинической значимости и полезности.

В то время как существование внутриопухолевой гетерогенности при ПТК подтверждается многими доказательствами, ее распространение, биологическая значимость и клиническая полезность ставятся под сомнение и требуют дальнейшего изучения.

Цифровая капельная ПЦР (ddPCR) — это недавно разработанный аналитический метод, подходящий для абсолютного количественного определения ДНК-мишени в смеси ДНК. Это наиболее точный метод определения соотношения аллелей BRAFV600E/BRAFдикого типа.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Определить, насколько часто встречаются субклональные BRAFV600E PTC, и определить среднее и медианное соотношение аллелей BRAFV600E/BRAFдикого типа в гетерогенных опухолях;
2. Определить взаимосвязь между процентным содержанием аллелей BRAFV600E и клинико-патологическими признаками;
3. Определить взаимосвязь между процентным содержанием аллелей BRAFV600E и исходом у пациентов с ПРЩЖ (первичная конечная точка)

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ

• Большая серия фиксированных формалином и залитых парафином (FFPE) тканей PTC с клиническим наблюдением > 3 лет будет проанализирована с помощью ddPCR для определения процентного содержания аллелей BRAFV600E.
• Чистота образцов PTC и соотношение опухолевых клеток/загрязняющих клеток будут оцениваться с помощью а) анализа с помощью RT-PCR экспрессии панели РНК, специфичной для лимфоретикулярных клеток и стромальных клеток; б) микроскопия прилегающих срезов тканей.
• Будет проведен статистический анализ для поиска корреляций между процентным содержанием аллелей BRAFV600E и а) особенностями патологии, TNM, стадией; б) рецидив и выживаемость