PCOS 中的肌醇、D-手性肌醇和葡甘露聚糖

研究设计 该研究是一项前瞻性和观察性研究。 纳入标准为：年龄在 18 至 35 岁之间，超重/肥胖（BMI > 25 kg/m2），没有任何其他急性并发或慢性疾病，根据鹿特丹标准诊断为 PCOS 阳性。 排除标准是在入组前使用激素药物或影响胰岛素敏感性的药物（例如，肌醇或二甲双胍）。

使用肌醇（1.75 克）、D-手性肌醇（0.25 克）和葡甘露聚糖（4.0 克）/模具必须在招募前不超过 30 天。 开始治疗的决定必须在研究开始之前就已经做出并且独立于研究开始。 必须根据技术数据表使用肌醇和葡甘露聚糖。 特别是肌醇（1.75 克）、D-手性肌醇（0.25 克）和葡甘露聚糖（4.0 克）预计将在主餐前分成两剂。

方法学 4.1 入院访视 (V0) 检查合格标准后，研究者将在初次访视 (V0) 期间告知患者研究目的，并获得书面知情同意书。

临床卡的编制包括一般信息、既往史、BMI、月经周期特征、月经量、根据 Ferriman-Gallwey 指数的多毛程度和符合全球评估量表的痤疮程度FDA 于 2002 年提出。

研究者将从可用的临床文件中收集治疗开始前的基线血糖、胰岛素、甘油三酯、胆固醇值。 此外，将根据卵巢体积和窦状卵泡收集有关超声图像的信息。

使用 BD 真空采血管（Becton Dickinson，Oxfordshire，UK）采血红管（无添加剂），将收集 2-3 ml 基础血样本用于代谢组学评估。 离心后，样品将立即冷冻至-80 °C，直到分析时为止。

然后将邀请患者继续使用肌醇 (1.75 g)、D-手性肌醇 (0.25 g) 和葡甘露聚糖 (4 g) 进行治疗，并在 90 天后出现对照 (V1)。

4.2 入组后第 90 天（±15）的随访（V1） 在 V1 期间，将对患者进行常规治疗和临床症状、任何不良事件和月经周期过程的访谈。

此外，将对所有患者进行人体测量、生化和超声参数的重新评估。

在 V1 时，将使用上述相同方法收集 2-3 毫升的第二份血样。

4.3 生化和代谢组学样品分析 对对照受试者以及基线和治疗 3 个月后的病例评估葡萄糖、胰岛素、甘油三酯和胆固醇的血液浓度。 还计算了 HOMA-IR si。 由训练有素的妇科医生通过阴道超声评估卵巢体积和窦状卵泡计数。

根据制造商的说明，使用 MetaboPrep GC 试剂盒（Theoreo srl，Montecorvino Pugliano [SA]，意大利）进行代谢组提取、纯化和衍生化。 Troisi 等人报告了有关代谢物提取和总体分析方案（包括 QA/QC 样品分析）的详细信息。 (2017, 2018)

数据管理和统计分析 在治疗结束时，安排所有患者的数据收集，并以编码或清晰的形式将相同的数据引入数据库（Excel for windows）中，该数据库结构适当，包含所有预期项目。 为了遵守隐私法，敏感的名义数据将适当地替换为分配给每个患者的数字代码，以便从数据的简单查询中推断出任何个人直接参考是不可能的。 此外，唯一可以从数据库中提取的数据与为科学目的而发布的聚合集有关。

数据报告为连续变量的平均值±标准偏差和分类变量的数量（百分比）。

使用 Statistica 软件（StatSoft，Oklahoma，USA）和 Minitab（Minitab Inc，Pennsylvania，USA）进行统计分析。 使用 Shapiro-Wilks 测试验证数据的正态分布。 由于数据呈正态分布，研究人员使用单向方差分析和 Tukey 事后检验进行组间比较。 alpha (ɑ) 值设置为 0.05。 Pearson 的卡方检验用于确定分类变量的组间差异。

对于多变量数据分析，色谱数据以每行一个样品和每列一个变量（代谢物）的形式制成表格。 数据预处理包括将每个代谢物峰面积归一化为内部标准峰面积，然后进行广义对数转换和通过自动缩放进行数据缩放（均值居中并将其除以每个变量的标准差）。 PLS-DA 使用统计软件包 R（统计计算基金会，奥地利维也纳）执行。 类分离是通过 PLS-DA 实现的，PLS-DA 是一种监督方法，它使用多元回归技术通过原始变量 (X) 的线性组合来提取可以预测类成员资格 (Y) 的信息。 使用 R pls 包中包含的 plsr 函数执行 PLS 回归。 使用 caret 包中包含的相应包装函数执行分类和交叉验证。 执行排列测试以评估类别歧视的重要性。 在每个排列中，PLS-DA 模型是在数据 (X) 和排列后的类标签 (Y) 之间建立的，使用基于原始类分配的模型交叉验证确定的最佳组件数。 计算每个代谢物的预测变量重要性 (VIP) 分数。 VIP 分数是 PLS 载荷的加权平方和，考虑了每个维度中解释的 Y 变量的数量。 根据倍数变化 (FC) 比较得分最高的 VIP 代谢物。 FC 是任意两个类别之间平均丰度的比率，是描述数量从初始值到最终值的变化量的度量。

使用软件 Cytoscape 的 MetScape 应用程序构建代谢途径。