Мио-инозитол, D-хиро-инозитол и глюкоманнан при СПКЯ

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование носит проспективно-наблюдательный характер. Критерии включения: возраст от 18 до 35 лет, избыточная масса тела/ожирение (ИМТ > 25 кг/м2), отсутствие каких-либо других острых интеркуррентных или хронических заболеваний, положительный диагноз СПКЯ по Роттердамским критериям. Критерием исключения является использование гормональных препаратов или препаратов, влияющих на чувствительность к инсулину (например, инозиты или метформин) до включения в исследование.

Применение мио-инозитола (1,75 г), D-хиро-инозитола (0,25 г) и глюкоманнана (4,0 г) в/в должно предшествовать набору не более чем за 30 дней. Решение о начале лечения должно быть принято до начала исследования и независимо от него. Использование инозитола и глюкоманнана должно происходить в соответствии с техническим паспортом. В частности, ожидается, что мио-инозитол (1,75 г), D-хиро-инозитол (0,25 г) и глюкоманнан (4,0 г) следует разделить на две дозы перед основными приемами пищи.

МЕТОДОЛОГИЯ 4.1 Визит при поступлении (V0) После проверки критериев приемлемости исследователь информирует пациента о целях исследования во время первого визита (V0) и получает письменную форму информированного согласия.

Составление клинической карты включает общие сведения, анамнез, ИМТ, особенности менструального цикла, объем менструальных выделений, степень гирсутизма по индексу Ферримана-Голлвея и степень акне в соответствии с Глобальной оценочной шкалой. предложен в 2002 году FDA.

Исследователь соберет из имеющейся клинической документации исходные показатели гликемии, инсулина, триглицеридов, холестерина до начала лечения. Кроме того, информация об ультразвуковой картине будет собираться с точки зрения объемов яичников и антральных фолликулов.

Образец 2-3 мл базальной крови будет собран для оценки метаболизма с использованием красной пробирки для забора крови BD vacutainer (Becton Dickinson, Оксфордшир, Великобритания) (без добавок). После центрифугирования образец немедленно замерзнет до -80 ° C до момента проведения анализа.

Затем пациенту будет предложено продолжить лечение мио-инозитолом (1,75 г), D-хиро-инозитом (0,25 г) и глюкоманнаном (4 г), умереть и явиться для контроля через 90 дней (V1).

4.2 Последующий визит на 90-й день (±15) после включения (V1) Во время V1 пациентка будет опрошена о регулярной терапии и клинических симптомах, любых нежелательных явлениях и течении менструального цикла.

Кроме того, все пациенты будут повторно оценены в отношении антропометрических, биохимических и ультразвуковых параметров.

В V1 будет взята вторая проба крови объемом 2-3 мл теми же методами, которые описаны выше.

4.3 Биохимический и метаболический анализ образцов Концентрация глюкозы, инсулина, триглицеридов и холестерина в крови оценивается у контрольных субъектов и у пациентов в начале лечения и через 3 месяца лечения. HOMA-IR si также рассчитывается. Объем яичников и количество антральных фолликулов оценивали с помощью вагинального УЗИ, которое проводил обученный гинеколог.

Экстракцию метаболомов, очистку и дериватизацию проводят с помощью набора MetaboPrep GC (Theoreo srl, Montecorvino Pugliano [SA], Италия) в соответствии с инструкциями производителя. Подробная информация об экстракции метаболитов и общей аналитической схеме, включая анализ проб QA/QC, была представлена ​​в Troisi et al. (2017, 2018)

Управление данными и статистический анализ В конце лечения планируется сбор данных обо всех пациентах и ​​введение их в закодированной или ясной форме в базу данных (Excel для окон), соответствующим образом структурированную, чтобы содержать все ожидаемые элементы. В целях соблюдения закона о конфиденциальности конфиденциальные номинальные данные будут надлежащим образом заменены числовыми кодами, присвоенными каждому пациенту, так что из простого просмотра данных будет невозможно вывести какую-либо индивидуальную прямую ссылку. Более того, единственные данные, которые можно извлечь из базы данных, относятся к агрегированным наборам данных, подлежащим публикации в научных целях.

Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение для непрерывных переменных и число (в процентах) для категориальных переменных.

Статистический анализ проводят с использованием программного обеспечения Statistica (StatSoft, Оклахома, США) и Minitab (Minitab Inc, Пенсильвания, США). Нормальное распределение данных проверяется с помощью теста Шапиро-Уилкса. Поскольку данные распределены нормально, исследователи используют однофакторный дисперсионный анализ с апостериорным тестом Тьюки для межгрупповых сравнений. Значение альфа (ɑ) установлено на 0,05. Критерий хи-квадрат Пирсона используется для определения различий между группами по категориальным переменным.

Для многомерного анализа данных хроматографические данные сводятся в таблицу с одним образцом на строку и одной переменной (метаболитом) на столбец. Предварительная обработка данных состоит из нормализации площади пика каждого метаболита к площади внутреннего стандарта с последующим обобщенным логарифмическим преобразованием и масштабированием данных путем автоматического масштабирования (среднецентрированное и деление на стандартное отклонение каждой переменной). PLS-DA выполняется с использованием пакета статистического программного обеспечения R (Foundation for Statistical Computing, Вена, Австрия). Разделение классов достигается с помощью PLS-DA, который представляет собой контролируемый метод, в котором используются методы многомерной регрессии для извлечения с помощью линейных комбинаций исходных переменных (X) информации, которая может предсказать принадлежность к классу (Y). Регрессия PLS выполняется с помощью функции plsr, включенной в пакет R pls. Классификация и перекрестная проверка выполняются с помощью соответствующей функции-оболочки, включенной в пакет Caret. Тест перестановки проводится для оценки значимости классовой дискриминации. В каждой перестановке модель PLS-DA строится между данными (X) и переставленными метками классов (Y) с использованием оптимального количества компонентов, определенного перекрестной проверкой для модели на основе исходного назначения класса. Баллы переменной важности в проекции (VIP) рассчитываются для каждого метаболита. Оценка VIP представляет собой взвешенную сумму квадратов нагрузок PLS с учетом количества объясненных Y-вариаций в каждом измерении. Метаболиты VIP с наивысшим баллом сравнивают с точки зрения кратности изменений (FC). FC представляет собой отношение средней численности между любыми двумя классами и представляет собой меру, описывающую, насколько изменяется количество при переходе от начального к конечному значению.

Метаболические пути построены с использованием приложения MetScape программного обеспечения Cytoscape.