Index aktivity desaturázy FFA v séru u pacientů užívajících vysoké dávky kortikosteroidů (FFA&steroids)

Indexy aktivity desaturázy volných mastných kyselin v séru v séru pacientů s pemfigem a bulózním pemfigoidem při dlouhodobé léčbě vysokými dávkami kortikosteroidů

1.1 SOUVISLOSTI A ODŮVODNĚNÍ STUDIE Chronická expozice glukokortikoidům má výrazné účinky na podkožní a viscerální tukovou tkáň a může vyvolat jak lipolýzu, tak lipogenezi [1].

V akutních stavech (jako je stres) glukokortikoidy zvyšují lipolýzu celého těla a produkci a obrat volných mastných kyselin. U chronických stavů nadbytku glukokortikoidů (jako je Cushingův syndrom) však tato akutní indukce systémové lipolýzy není trvalá a ve skutečnosti klesá. Kromě toho mohou glukokortikoidy působit synergicky s inzulínem k upregulaci lipogeneze a zvýšit ukládání triglyceridů, zejména v játrech a viscerální tukové tkáni [2, 3]

Zvýšená hmota podkožního tuku je charakteristickým znakem Cushingova syndromu a mohla by být potenciálně zprostředkována aktivací lipogeneze. Nedávno jsme publikovali studii, která zjistila upregulaci syntézy volných mastných kyselin a genů pro desaturázy a geny pro syntézu triglyceridů v podkožní tukové tkáni od subjektů s Cushingovou chorobou, což dále podporuje hypotézu, že lipogeneze je v těchto tkáních aktivována transkripční aktivací mastných kyselin. syntéza a syntéza triglyceridů [4]. Paralelně jsme viděli vyšší hladiny lipolýzy v explantátech tukové tkáně pacientů s Cushingovou chorobou [4].

Obecně je složení volných mastných kyselin v séru ovlivněno příjmem tuků ve stravě, aktivitou desaturačních enzymů (v podkožní a viscerální tukové tkáni a játrech), inzulinovou rezistencí a faktory životního stylu, jako je fyzická aktivita a obezita [5, 6, 7]. Volné mastné kyseliny v séru nalačno však nejsou přímo odvozeny z nutričního příjmu, ale primárně pocházejí ze zásob tukové tkáně [8, 9] V epidemiologických studiích se používají indexy desaturázy, odhadované jako poměry produktu k prekurzorovým mastným kyselinám. Indexy aktivity desaturázy byly odhadnuty podle následujícího: Stearoyl-CoA desaturáza-16 (SCD-16) = 16:1 (n-7) / 16:0, Stearoyl-CoA-desaturáza-18 (SCD-18) = 18: 1(n-9) / 18:0, Delta-5-desaturáza (D6D) = 20:3 (n-6) / 18:2 (n-6) a Delta-5-desaturáza (D5D) = 20: 4(n-6) / 20:3 (n-6).

Bylo zjištěno, že odhadované poměry aktivity SCD-16, SCD-18 a D5D korelují mezi volnými mastnými kyselinami v séru nalačno a triglyceridy subkutánní tukové tkáně [10]. Navíc odhadované poměry aktivity SCD-16 a SCD-18 v podkožní tukové tkáni významně korelovaly s expresí genu SCD v této tkáni [11].

Dlouhodobé účinky glukokortikoidů na složení volných mastných kyselin v séru a indexy desaturázy nebyly studovány. Naším cílem v této studii je zjistit, zda došlo k významným změnám v odhadovaných indexech desaturázy volných mastných kyselin v séru a v celkovém množství volných mastných kyselin a glycerolu po dlouhodobé léčbě glukokortikoidy.

1.2 CÍLE STUDIE 1.2.1 Primární cíl Primárním cílem této studie je porovnat indexy aktivity desaturázy v sérech pacientů s pemfigem a bulózním pemfigoidem, odebraných před a jeden měsíc po zahájení léčby vysokými dávkami perorálních kortikosteroidů.

Sekundární cíle Sekundárními cíli je zkoumat změny hmotnosti, poměru pas/boky, inzulínové rezistence podle modelu HOMA-IR a lipidových profilů nalačno během jednoho měsíce léčby vysokými dávkami perorálních kortikosteroidů.

1.3 NÁVRH STUDIE Toto je jednocentrová prospektivní kohortová studie.

1.3.1 Populace ve studii Asi 20 po sobě jdoucích vhodných pacientů s diagnostikovaným pemfigem nebo bulózním pemfigoidem, u kterých je plánováno nasazení na režim vysokých dávek perorálních kortikosteroidů (ekvivalent 0,5 mg/kg/den nebo více prednisonu) po dobu alespoň jednoho měsíce, bude přijat.

1.3.2 Délka studie Celková doba trvání studie se očekává 10 měsíců.

1.4 METODY STUDIE Každému pacientovi budou odebrány vzorky krve před a jeden měsíc po zahájení podávání vysokých dávek perorálních kortikosteroidů. Vzorky séra budou odebírány ráno po celonočním hladovění trvajícím přibližně 12 hodin.

Každý vzorek krve bude hodnocen z následujících důvodů:

- Hladiny volných mastných kyselin v séru, včetně: kyseliny palmitolejové (16:1 (n-7)), kyseliny palmitové (C16:0), kyseliny olejové (C18:1 (n-9)), kyseliny stearové (C18:0) kyselina linolová (C18:2(n-6)), kyselina arachidonová (C20:4(n-6)) a dihomogamma linolenová (C20:3(n-6)).

Hladiny volných mastných kyselin v séru budou stanoveny pomocí soupravy pro analýzu stabilního izotopového ředění plynové chromatografie-hmotnostní spektrometrie (GC/MS).

• Lipidový profil nalačno: Celkový cholesterol, lipoprotein s nízkou hustotou (LDL), lipoprotein s vysokou hustotou (HDL), triglyceridy (TG) a volný glycerol.
• Plazmatická glukóza nalačno, plazmatický inzulín a glykovaný hemoglobin (HbA1c)
• Kompletní krevní obraz
• Kreatinin a Urea
• Albumin a celkový protein
• Jaterní enzymy: AST, ALT, GGT, ALP
• Hormony štítné žlázy: TSH, FT4, FT3

Indexy aktivity desaturázy budou odhadnuty podle následujícího:

• Stearoyl-CoA desaturáza-16 (SCD-16) = 16:1 (n-7) / 16:0
• Stearoyl-CoA-desaturáza-18 (SCD-18) = 18:1 (n-9) / 18:0
• Delta-5-desaturáza (D6D) = 20:3 (n-6) / 18:2 (n-6)
• Delta-5-desaturáza (D5D) = 20:4 (n-6) / 20:3 (n-6).

Inzulinová rezistence bude odhadnuta pomocí HOMA-IR (inzulín nalačno (mU/l) × glukóza nalačno (mmol/l)/22,5).

Při zápisu a o měsíc později budou provedena následující fyzická měření:

• Váha, výška (BMI)
• Měření pasu a boků (poměr pas/boky)