Indice di attività della desaturasi sierica FFA in pazienti con corticosteroidi ad alto dosaggio (FFA&steroids)

Indici di attività della desaturasi degli acidi grassi liberi sierici nei sieri di pazienti con pemfigo e pemfigoide bolloso in trattamento a lungo termine con corticosteroidi ad alte dosi

1.1 CONTESTO E RAZIONALE DELLO STUDIO L'esposizione cronica ai glucocorticoidi esercita effetti profondi sui tessuti adiposi sottocutanei e viscerali e può indurre sia la lipolisi che la lipogenesi [1].

In condizioni acute (come lo stress) i glucocorticoidi aumentano la lipolisi di tutto il corpo e la produzione e il ricambio di acidi grassi liberi. Tuttavia, in condizioni croniche di eccesso di glucocorticoidi (come la sindrome di Cushing), questa induzione acuta della lipolisi sistemica non è sostenuta e anzi diminuisce. Inoltre, i glucocorticoidi possono agire in sinergia con l'insulina per sovraregolare la lipogenesi e aumentare l'accumulo di trigliceridi, principalmente nel fegato e nel tessuto adiposo viscerale [2, 3]

L'aumento della massa grassa sottocutanea è un segno distintivo della sindrome di Cushing e potrebbe potenzialmente essere mediato attraverso l'attivazione della lipogenesi. Abbiamo recentemente pubblicato uno studio che ha trovato una sovraregolazione della sintesi degli acidi grassi liberi e dei geni delle desaturasi e dei geni della sintesi dei trigliceridi nel tessuto adiposo sottocutaneo di soggetti con malattia di Cushing, supportando ulteriormente l'ipotesi che la lipogenesi sia attivata in questi tessuti attraverso l'attivazione trascrizionale dell'acido grasso sintesi e sintesi dei trigliceridi [4]. Parallelamente, abbiamo osservato livelli più elevati di lipolisi negli espianti di tessuto adiposo di pazienti con malattia di Cushing [4].

In generale, la composizione degli acidi grassi liberi sierici è influenzata dall'assunzione di grassi nella dieta, dall'attività degli enzimi desaturanti (nei tessuti adiposi sottocutanei e viscerali e nel fegato), dall'insulino-resistenza e da fattori legati allo stile di vita come l'attività fisica e l'obesità [5, 6, 7]. Tuttavia, gli acidi grassi liberi sierici a digiuno non derivano direttamente dall'assunzione nutrizionale, ma provengono principalmente dalle riserve di tessuto adiposo [8, 9] Gli indici di desaturasi, stimati come rapporti tra prodotto e acido grasso precursore, sono impiegati negli studi epidemiologici. Gli indici di attività della desaturasi sono stati stimati secondo quanto segue: Stearoil-CoA desaturasi-16 (SCD-16) = 16:1(n-7) / 16:0, Stearoil-CoA-desaturasi-18 (SCD-18) = 18: 1(n-9) / 18:0, Delta-5-desaturasi (D6D) = 20:3(n-6) / 18:2 (n-6) e Delta-5-desaturasi (D5D) = 20: 4(n-6) / 20:3 (n-6).

I rapporti di attività SCD-16, SCD-18 e D5D stimati sono risultati correlati tra acidi grassi liberi sierici a digiuno e trigliceridi del tessuto adiposo sottocutaneo [10]. Inoltre, i rapporti di attività SCD-16 e SCD-18 stimati nel tessuto adiposo sottocutaneo erano significativamente correlati con l'espressione del gene SCD in questo tessuto [11].

Non sono stati studiati gli effetti a lungo termine dei glucocorticoidi sulla composizione sierica degli acidi grassi liberi a digiuno e sugli indici di desaturasi. Il nostro obiettivo in questo studio è esaminare se ci sono cambiamenti significativi negli indici di desaturasi degli acidi grassi liberi sierici stimati e negli acidi grassi liberi totali e nel glicerolo dopo terapia con glucocorticoidi a lungo termine.

1.2 OBIETTIVI DELLO STUDIO 1.2.1 Obiettivo primario L'obiettivo primario di questo studio è confrontare gli indici di attività della desaturasi nei sieri di pazienti con pemfigo e pemfigoide bolloso, raccolti prima e un mese dopo l'inizio del trattamento con corticosteroidi orali ad alte dosi.

Obiettivi secondari Gli obiettivi secondari consistono nell'esaminare i cambiamenti di peso, rapporto vita/fianchi, insulino-resistenza come evidenziato dal modello HOMA-IR e profili lipidici a digiuno, nell'arco di un mese di trattamento con corticosteroidi orali ad alte dosi.

1.3 DISEGNO DELLO STUDIO Questo è uno studio prospettico di coorte monocentrico.

1.3.1 Popolazione in studio Circa 20 pazienti idonei consecutivi con diagnosi di pemfigo o pemfigoide bolloso, che dovrebbero essere sottoposti a un regime di corticosteroidi orali ad alte dosi (equivalente a 0,5 mg/kg/die o più di prednisone) per almeno un mese, verrà reclutato.

1.3.2 Durata dello studio La durata totale dello studio dovrebbe essere di 10 mesi.

1.4 METODI DELLO STUDIO Per ciascun paziente, verranno raccolti campioni di sangue prima e un mese dopo l'inizio di corticosteroidi orali ad alte dosi. I campioni di siero saranno raccolti al mattino dopo un digiuno notturno di circa 12 ore.

Ogni campione di sangue sarà valutato per quanto segue:

- Livelli sierici di acidi grassi liberi, tra cui: acido palmitoleico (16:1(n-7)), acido palmitico (C16:0), acido oleico (C18:1(n-9)), acido stearico (C18:0) , acido linoleico (C18:2(n-6)), acido arachidonico (C20:4(n-6)) e diomogamma linolenico (C20:3(n-6)).

I livelli di acidi grassi liberi nel siero saranno determinati mediante gascromatografia-spettrometria di massa (GC/MS) Stable Isotope Dilution Analysis kit.

• Profilo lipidico a digiuno: colesterolo totale, lipoproteine ​​a bassa densità (LDL), lipoproteine ​​ad alta densità (HDL), trigliceridi (TG) e glicerolo libero.
• Glicemia plasmatica a digiuno, insulina plasmatica ed emoglobina glicata (HbA1c)
• Emocromo completo
• Creatinina e Urea
• Albumina e proteine ​​totali
• Enzimi epatici: AST, ALT, GGT, ALP
• Ormoni tiroidei: TSH, FT4, FT3

Gli indici di attività delle desaturasi saranno stimati in base a quanto segue:

• Stearoil-CoA desaturasi-16 (SCD-16) = 16:1(n-7) / 16:0
• Stearoil-CoA-desaturasi-18 (SCD-18) = 18:1(n-9) / 18:0
• Delta-5-desaturasi (D6D) = 20:3(n-6) / 18:2 (n-6)
• Delta-5-desaturasi (D5D) = 20:4(n-6) / 20:3 (n-6).

La resistenza all'insulina sarà stimata mediante HOMA-IR (insulina a digiuno (mU/l) × glucosio a digiuno (mmol/l)/22,5).

Le seguenti misurazioni fisiche saranno prese al momento dell'arruolamento e un mese dopo:

• Peso, altezza (BMI)
• Misura vita e fianchi (rapporto vita/fianchi)