Detekce plazmablastů u pacientů s onemocněním souvisejícím s IgG4

Onemocnění související s IgG4 (IgG4-RD) je imunitně zprostředkované fibrozánětlivé onemocnění, které vede k poškození tkáně, orgánové dysfunkci a, pokud se neléčí, k selhání orgánů. Onemocnění může postihnout téměř jakoukoli anatomickou lokalizaci, ale nejčastěji postiženými místy jsou slinivka břišní, slinné žlázy, orbitální adnexa, lymfatické uzliny a retroperitoneum. IgG4-RD, typicky diagnostikovaný u jedinců středního věku, je charakterizován mužskou převahou s výjimkou orgánů hlavy a krku (např. slinných žláz a očnic), kde je rozdělení pohlaví přibližně stejné. Epidemiologie IgG4-RD zůstává špatně pochopena, protože byla teprve nedávno rozpoznána jako multiorgánové onemocnění. Nicméně IgG4-RD odpovídá za mnoho stavů, které byly dříve považovány za různé, jednoorgánové poruchy.

Současným zlatým standardem pro diagnostiku IgG4-RD je identifikace charakteristických histologických a imunohistochemických rysů pomocí biopsie. Tyto patologické rysy jsou konzistentní v celém rozsahu orgánů postižených IgG4-RD. Histopatologické variace se však mohou vyskytovat podle stadia léze; to znamená, že dlouhotrvající onemocnění může být převážně fibrotické a buněčné. Potvrzení diagnózy IgG4-RD v takových případech může být obtížné. Kromě toho mohou orgánové patologie IgG4-RD a mimikry IgG4-RD, jako je granulomatóza s polyangiitidou (dříve Wegenerova), sarkoidóza, histiocytóza a malignity (např. buněčný infiltrát. Spolehlivost na sérové ​​koncentrace IgG4 pro diagnostiku IgG4-RD je podobně problematická, protože jak specificita, tak pozitivní prediktivní hodnota sérových koncentrací IgG4 jsou nízké.

Plazmablasty, odvozené z B-buněčné linie a charakterizované jako CD19lowCD20-CD38+CD27+, zahrnují mezistupeň mezi aktivovanými B-buňkami a plazmatickými buňkami. Plazmablasty jsou obecně vzácné v periferní krvi zdravých jedinců, ale expanze jsou krátce pozorovány během reakcí na infekci nebo vakcinaci. Naproti tomu v podmínkách autoimunity a perzistentního vlastního antigenu (antigenů) mohou plazmablasty cirkulovat po delší dobu.

Cirkulující plazmablasty byly dříve popsány u zánětlivého onemocnění střev, revmatoidní artritidy, systémového lupus erythematodes a mnohočetného myelomu. Nedávno několik studií identifikovalo plasmablsty u IgG4-RD jako diagnostický nástroj i jako indikátor odpovědi na léčbu

2. Cíl

Účelem naší studie je zhodnotit metodu měření plazmablastů v periferní krvi pacientů s IgG4-RD za účelem diagnostiky a sledování progrese onemocnění a odpovědi na léčbu. Tento dokument nastíní postupy odběru, zpracování a testování pro měření plazmablastů od pacientů s IgG4-RD.

3. Zdroj plazmablastu

Plazmablasty budou izolovány z periferní krve získané od pacientů a normálních dárců, kteří souhlasí s účastí ve studii. Vzorky krve budou odebrány lékařem nebo akreditovanou sestrou, převezeny do výzkumné laboratoře za účelem oddělení PMBC, které budou obarveny na markery CD19lowCD20-CD38+CD27+ a měřeny průtokovou cytometrií (FACS) umístěnou v hematologické laboratoři.