Detecção de plasmablastos de pacientes com doenças relacionadas a IgG4

A doença relacionada a IgG4 (IgG4-RD) é uma doença fibroinflamatória imunomediada que leva a danos nos tecidos, disfunção de órgãos e, se não tratada, à falência de órgãos. A doença pode afetar quase qualquer localização anatômica, mas os locais mais comumente envolvidos são o pâncreas, glândulas salivares, anexos orbitais, linfonodos e retroperitônio. O IgG4-RD, tipicamente diagnosticado em indivíduos de meia-idade, é caracterizado por uma predominância masculina, exceto no que diz respeito aos órgãos da cabeça e pescoço (por exemplo, glândulas salivares e órbitas), onde a distribuição de gênero é aproximadamente igual. A epidemiologia do IgG4-RD permanece pouco compreendida devido ao seu reconhecimento apenas recentemente como uma doença de múltiplos órgãos. No entanto, o IgG4-RD é responsável por muitas condições antes consideradas distúrbios díspares de um único órgão.

O padrão ouro atual para o diagnóstico de IgG4-RD é a identificação de características histológicas e imunohistoquímicas por meio de biópsia. Essas características patológicas são consistentes em toda a gama de órgãos afetados por IgG4-RD. Porém, pode ocorrer variação histopatológica de acordo com o estágio da lesão; ou seja, a doença de longa duração pode ser predominantemente fibrótica e celular. A confirmação do diagnóstico de IgG4-RD nesses casos pode ser difícil. Além disso, a patologia de órgão IgG4-RD e imitadores de IgG4-RD, como granulomatose com poliangiite (anteriormente doença de Wegener), sarcoidose, histiocitose e malignidades (por exemplo, linfoma e adenocarcinoma do pâncreas), podem compartilhar características semelhantes, incluindo um plasma IgG4 positivo infiltrado celular. A confiança nas concentrações séricas de IgG4 para diagnosticar IgG4-RD é igualmente problemática porque tanto a especificidade quanto o valor preditivo positivo das concentrações séricas de IgG4 são fracos.

Os plasmablastos, derivados da linhagem de células B e caracterizados como CD19lowCD20-CD38+CD27+, compreendem um estágio intermediário entre células B ativadas e células plasmáticas. Plasmablastos são geralmente raros no sangue periférico de indivíduos saudáveis, mas expansões são observadas brevemente durante as respostas à infecção ou vacinação. Em contraste, no cenário de autoimunidade e autoantígeno(s) persistente(s), os plasmablastos podem circular por períodos prolongados.

Plasmablastos circulantes foram descritos anteriormente em doenças inflamatórias intestinais, artrite reumatóide, lúpus eritematoso sistêmico e mieloma múltiplo. Recentemente, vários estudos identificaram plasmablsts em IgG4-RD tanto como uma ferramenta de diagnóstico quanto como um indicador de resposta ao tratamento

2. Objetivo

O objetivo do nosso estudo é avaliar o método de dosagem de plasmablastos no sangue periférico de pacientes com IgG4-RD, para diagnóstico e acompanhamento da evolução da doença e resposta ao tratamento. Este documento descreve os procedimentos de coleta, processamento e teste para medição de plasmablastos de pacientes com IgG4-RD.

3. Fonte de Plasmablast

Plasmablastos serão isolados de sangue periférico derivado de pacientes e doadores normais que consentirem em participar do estudo. Amostras de sangue serão coletadas por um médico ou enfermeira credenciada, transferidas para o laboratório de pesquisa para separar os PMBCs, que serão corados para marcadores CD19lowCD20-CD38+CD27+ e medidos por citometria de fluxo (FACS) localizado no laboratório de hematologia