Rilevamento di plasmablasti da pazienti affetti da malattie correlate a IgG4

La malattia correlata alle IgG4 (IgG4-RD) è una malattia fibro-infiammatoria immuno-mediata che porta a danni ai tessuti, disfunzione d'organo e, se non trattata, a insufficienza d'organo. La malattia può interessare quasi tutte le sedi anatomiche, ma le sedi più comunemente coinvolte sono il pancreas, le ghiandole salivari, gli annessi orbitali, i linfonodi e il retroperitoneo. Le IgG4-RD, tipicamente diagnosticate tra individui di mezza età, sono caratterizzate da una predominanza maschile tranne che per quanto riguarda gli organi della testa e del collo (ad esempio, le ghiandole salivari e le orbite), dove la distribuzione di genere è approssimativamente uguale. L'epidemiologia di IgG4-RD rimane poco conosciuta a causa del suo riconoscimento solo di recente come malattia multiorgano. Tuttavia, l'IgG4-RD rappresenta molte condizioni un tempo considerate disparate patologie di un singolo organo.

L'attuale gold standard per la diagnosi di IgG4-RD è l'identificazione delle caratteristiche istologiche e immunoistochimiche attraverso la biopsia. Queste caratteristiche patologiche sono coerenti in tutta la gamma di organi affetti da IgG4-RD. Tuttavia, la variazione istopatologica può verificarsi in base allo stadio della lesione; cioè, la malattia di vecchia data può essere prevalentemente fibrotica e cellulare. Confermare la diagnosi di IgG4-RD in questi casi può essere difficile. Inoltre, la patologia d'organo IgG4-RD e gli imitatori IgG4-RD, come la granulomatosi con poliangioite (precedentemente Wegener), la sarcoidosi, l'istiocitosi e i tumori maligni (ad es. Linfoma e adenocarcinoma del pancreas), possono condividere caratteristiche simili tra cui un plasma IgG4 positivo infiltrato cellulare. Affidarsi alle concentrazioni sieriche di IgG4 per diagnosticare IgG4-RD è altrettanto problematico perché sia ​​la specificità che il valore predittivo positivo delle concentrazioni sieriche di IgG4 sono scarsi.

I plasmablasti, derivati ​​dal lignaggio delle cellule B e caratterizzati come CD19lowCD20-CD38+CD27+, comprendono uno stadio intermedio tra le cellule B attivate e le plasmacellule. I plasmablasti sono generalmente rari nel sangue periferico di individui sani, ma le espansioni si osservano brevemente durante le risposte all'infezione o alla vaccinazione. Al contrario, nel contesto dell'autoimmunità e degli autoantigeni persistenti, i plasmablasti possono circolare per periodi prolungati.

I plasmablasti circolanti sono stati precedentemente descritti nella malattia infiammatoria intestinale, nell'artrite reumatoide, nel lupus eritematoso sistemico e nel mieloma multiplo. Recentemente, diversi studi hanno identificato plasmablsts in IgG4-RD sia come strumento diagnostico che come indicatore di risposta al trattamento

2. Obiettivo

Lo scopo del nostro studio è valutare il metodo di misurazione del plasmablasto nel sangue periferico dei pazienti con IgG4-RD, per la diagnosi e il follow-up della progressione della malattia e della risposta al trattamento. Questo documento illustrerà le procedure di raccolta, elaborazione e test per la misurazione dei plasmablasti da pazienti con IgG4-RD.

3. Sorgente di plasmablasti

I plasmablasti saranno isolati dal sangue periferico derivato da pazienti e donatori normali che acconsentono a partecipare allo studio. I campioni di sangue saranno prelevati da un medico o da un infermiere accreditato, trasferiti al laboratorio di ricerca per separare i PMBC, che saranno colorati per i marcatori CD19lowCD20-CD38+CD27+ e misurati mediante citometria a flusso (FACS) situata presso il laboratorio di ematologia