Studie výzvy kolonizace Bordetella Pertussis (Periscope)

Tato studie je součástí pracovního balíčku 2 konsorcia Periscope. Konsorcium Periscope sdružuje mezinárodně uznávané vědce s mnohaletými zkušenostmi v oblasti výzkumu B. pertussis, klinických studií, bioinformatiky, imunologie a veřejného zdraví s cílem podporovat vědecké a technologické inovace ve vývoji vakcíny proti černému kašli a podporovat vytvoření laboratoře a vědecké sítě, která usnadňuje testování a pomáhá urychlit vývoj nových vakcín proti černému kašli v Evropě. Tato studie, vývoj modelu pro infekci B. pertussis u člověka, je jedním z modelů, které urychlí vývoj a registraci nových vakcín proti černému kašli a poskytne vzorky pro studie prováděné v rámci sítě.

Toto je prospektivní kontrolovaná humánní provokační studie sestávající ze dvou fází; Fáze A: Vývoj modelu lidské expozice B. pertussis; pilotní stanovení standardního inokula Prvním cílem fáze A je určit „standardní inokulum“ (SI), jehož výsledkem je bezpečná kolonizace 70 % dobrovolníků. Tato úroveň kolonizace 70 % byla vybrána tak, aby bylo možné vyhodnotit základní imunitní profily jedinců, kteří jsou nebo nejsou kolonizováni po expozici, a identifikovat biomarkery ochrany před kolonizací. Uznává se, že pro budoucí použití humánního provokačního modelu pro hodnocení účinnosti experimentálních kandidátů vakcíny by bylo optimální, kdyby procento úspěšně kolonizovaných subjektů bylo alespoň 70 %. SI bude identifikován v experimentu s eskalací nebo deeskalací dávky, který začne u 103 jednotek B. pertussis tvořících kolonie podávaných intranazálně. Každá skupina 5 dobrovolníků bude postupně naočkována polovičními logaritmickými zvyšujícími se/snižujícími dávkami, dokud není dosaženo koncového bodu. Experiment bude pokračovat, dokud SI nezíská 10 subjektů, které jsou kolonizovány v den 14. Dobrovolníci budou podrobeni screeningu, aby se vyloučili ti s důkazy nedávné infekce B. pertussis pomocí testu ELISA s imunoglobulinem G (IgG) proti toxinu černého kašle (PT) jako důkazu umožňujícího vyhodnocení sérokonverze. Po expozici chemické látky budou monitorovány hematologické a klinické parametry a vzorky nosních výtěrů budou kultivovány v pravidelných intervalech, aby se zajistila bezpečnost dobrovolníků a aby se identifikovala přítomnost B. pertussis. 14. den po stimulaci nebo při nástupu příznaků, podle toho, co nastane dříve, bude podána eradikační terapie ve formě azithromycinu 500 mg jednou denně po dobu 3 dnů. Další vzorky sliznice a krve budou odebírány v průběhu jednoho roku.

Druhým cílem fáze A je určit „období kolonizace“; nejdříve den po inokulaci, kdy je pozorována kolonizace nosohltanu (jak bylo detekováno kultivací) u 100 % těch dobrovolníků, kteří vykazovali sérokonverzi v den 28. Toto časové období bude použito ke stanovení délky účasti požadované od dobrovolníků v budoucích studiích. Období kolonizace bude považováno za biologicky relevantní, pokud se u lidí, kteří jsou kolonizováni po dobu kolonizace, vyvolají specifické slizniční a systémové protilátky proti B. pertussis. Bude vyhodnocen kvantitativní PCR test k detekci B. pertussis ve vzorcích z nosohltanu, aby se určilo, zda může poskytnout rychlejší informace kromě kultivace.

Třetím cílem fáze A je přístup k vylučování B. pertussis z prostředí po nasální inokulaci zdravých dobrovolníků B. pertussis. Tyto výsledky vylučování se použijí ke stanovení délky přijetí a izolace ve fázi B. Vylučování B. pertussis u exponovaných dobrovolníků bude hodnoceno pomocí osobních aerosolových vzorkovačů a vzorkováním prostředí. Bude hodnocena účinnost eradikační terapie.

Fáze B: Vývoj modifikovaného modelu lidské provokace B. pertussis Ve fázi B budou data pilotní studie z fáze A použita k návrhu praktičtějšího modelu, pokud možno částečně provedeného v ambulantním prostředí, který bude podmíněn bezpečností a přenosem důkaz. Konečný protokol pro fázi B bude předložen jako dodatek protokolu, protože bude založen na standardním inokulu a období kolonizace identifikovaných ve fázi A.

Dobrovolníci ve fázi B nebudou předem vybráni, aby se vyloučili ti, kteří mají známky nedávné infekce B. pertussis. Standardní inokulum stanovené ve fázi A bude použito pro všechny dobrovolníky a po období kolonizace bude podána eradikační terapie na základě údajů z fáze A. Přibližně 30 jedinců dostane intranazální SI a jako kontrolní skupina přibližně 15 jedinců dostane intranazální simulaci . Obě skupiny budou léčeny azithromycinem po dobu tří dnů na konci období kolonizace.

Cíle:

• Abychom potvrdili, že následující parametry modelu ve fázi B jsou podobné parametrům pozorovaným ve fázi A:

  • Dobrovolnická bezpečnost
  • Míra kolonizace
  • Období kolonizace
  • Genetické/expresní změny u B. pertussis během čelenže
  • Ekologické ubývání
  • Účinnost eradikační terapie
• Porovnat profil detekce B. pertussis ve vzorcích z nosohltanu pomocí qPCR s detekcí pozorovanou ve fázi A.
• Posouzení specifické imunity proti B. pertussis před a po naočkování zdravých dobrovolníků B. pertussis porovnáním údajů od úspěšně kolonizovaných účastníků s údaji od nekolonizovaných a kontrolní skupiny.