Funktionen natürlicher Killerzellen, Flucht des Tumors in das Immunsystem und Regulierung natürlicher Zytotoxizitätsrezeptoren bei hämatologischen Malignomen

Die NK-Zellen sind an der angeborenen Immunität gegen Infektionserreger oder transformierte Zellen beteiligt, die aufgrund der fehlenden, schwachen oder abnormalen Expression von Klasse-I-Molekülen des menschlichen Leukozytenantigens (HLA) als „kein Selbst“ erkannt werden. Gemäß der „Missing-Selbst-Hypothese“ wird ein negatives Signal an NK-Zellen übermittelt, wenn ihre inhibitorischen Rezeptoren von den spezifischen HLA-Klasse-I-Molekülen angegriffen werden. Die NK-Aktivierung erfordert ein positives Signal, das durch die Aktivierung aktivierender Rezeptoren, insbesondere der „natürlichen Zytotoxizitätsrezeptoren“ oder NCRs, geliefert wird, die direkt an der natürlichen Zytotoxizität von Natural Killer beteiligt sind. Zu den aktivierenden Rezeptoren gehören NKp46, NKp44 und NKp30, auch NCR 1, 2 bzw. 3 genannt. NKp46 und NKp30 werden konstitutiv auf der Oberfläche von NK exprimiert, die Expression von NKp44 wird erst nach Aktivierung der NK-Zellen beobachtet. NK-Zellen der meisten (80 %) gesunden Spender exprimieren eine hohe Menge an NCR auf ihrer Oberfläche, was dem NCRbright-Phänotyp entspricht, während nur 20 % den NCRdull-Phänotyp aufweisen. Im scharfen Gegensatz dazu haben die meisten Patienten (80 %) mit Leukämie den NCRdull-Phänotyp, während nur 20 % der Patienten den NCRbright-Phänotyp haben. Die Kultur von NK von gesunden Spendern (NCRbright) mit Leukämiezellen führt zu einer verringerten Expression von NKp30, während es keinen Unterschied in der Expression gibt, wenn dieselben NK mit Zellen von gesunden Spendern kultiviert werden. Darüber hinaus zeigte eine Studie an AML-Patienten, dass der NCRdull-Phänotyp während der Leukämieentwicklung erworben wurde, da bei Patienten, die eine vollständige Remission (CR) erreichten, eine vollständige (für NKp46) oder teilweise (für NKp30) Reversibilität beobachtet wurde. Die Reversibilität des NCRdull-Phänotyps nach CR deutete darauf hin, dass Leukämiezellen an der NCR-Herunterregulierung beteiligt sein könnten. Im Einklang mit diesen Beobachtungen wollen wir den Mechanismus der NCR-Herunterregulierung durch Kultivierung von NK NCRbright aus gesunden Spendern mit Leukämiezellen oder gesunden hämatopoetischen Zellen untersuchen, um das Auftreten des NCRdull-Phänotyps zu beobachten und durch qPCR zu überprüfen, ob dieser Herunterregulierung Die Regulierung erfolgt transkriptionell. Wenn sich diese Hypothese bestätigt, werden wir die Regulierung von NCR untersuchen, indem wir uns auf die Bedeutung von NCR-Transkriptionsfaktoren durch bioinformatische Analyse mutmaßlicher Transkriptionsfaktoren-Fixierungssequenzen in den Promotoren dieser Gene konzentrieren und anschließend die Kapazität von NCR-Transkriptionsfaktoren überprüfen identifizierte Sequenzen zur Bindung von Transkriptionsfaktoren. Letztendlich werden wir die tatsächlichen Auswirkungen dieser Transkriptionsfaktoren überprüfen, indem wir die Wirkung ihrer Stummschaltung durch RNA-Interferenzexperimente untersuchen.