Prospektive Studie zur genetischen Interaktion zwischen VEGFR-2 und IL-8 bei mit Paclitaxel und Bevacizumab behandeltem MBC im Vergleich zu Chemotherapie (BEVAPROS)

Patienten mit metastasiertem Brustkrebs (MBC) aus zehn italienischen Abteilungen für medizinische Onkologie mit histologisch bestätigtem HER2-negativem MBC, die mit einer Erstlinientherapie einschließlich Bevacizumab 10 mg/m2 i.v. an den Tagen 1 und 15 in Kombination mit Erstlinientherapie mit Paclitaxel 90 mg/m2 i.v. an den Tagen 1, 8 und 15, alle 4 Wochen, werden für die vorliegende pharmakogenetische Studie aufgenommen. MBC-Patienten, die mit einer Erstlinien-Chemotherapie ohne Bevacizumab behandelt werden, werden ebenfalls als Kontrollgruppe aufgenommen. Stellen mit metastasierter Erkrankung werden bei Patienten mit messbarer Erkrankung gemäß den Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) Kriterium 1.1 erneut evaluiert. Bei Patienten ohne messbare Läsionen wird das Fortschreiten der Krankheit definiert, wenn neue Läsionen aufgetreten sind oder wenn sich bestehende Läsionen entwickelt haben. Im Fall von nicht messbaren Läsionen wird eine Verschlechterung des klinischen Zustands, die nicht auf die Toxizität der Behandlung zurückzuführen ist, als Krankheitsprogression definiert. Das progressionsfreie Überleben (PFS) wird als der Zeitraum vom Beginn der Behandlung bis zur ersten Beobachtung des Fortschreitens der Krankheit, wie oben beschrieben, oder des Todes jeglicher Ursache definiert. Bei allen Patienten werden Response, PFS und Gesamtüberleben untersucht. Jeder Patient, der an der Studie teilnimmt, wird die Einverständniserklärung unterschreiben. Das Protokoll wurde von der Ethikkommission Vast Area Northwest of Tuscany (CEAVNO), Pisa, Italien (30.04.2014) genehmigt. Genotypisierungsanalysen Blutproben (3 ml) werden in Ethylendiamintetraessigsäureröhrchen gesammelt und bei -80 °C gelagert. Gene und Polymorphismen, die am Angiogeneseweg beteiligt sind und bereits als Prädiktoren für das Ansprechen auf Bevacizumab vorgeschlagen wurden, werden für die vorliegenden Analysen ausgewählt. Die Keimbahn-DNA-Extraktion wird mit dem QIamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Valencia, Kalifornien, USA) durchgeführt. Die allelische Diskriminierung von Genen wird unter Verwendung eines ABI PRISM 7900 SDS Instruments (Applied Biosystems, Carlsbad, Kalifornien, USA) und mit validierten TaqMan Single Nucleotide Polymorphism (SNP) Genotypisierungsassays (Applied Byosistems) durchgeführt. Polymerase-Kettenreaktionen werden gemäß dem Protokoll des Herstellers durchgeführt. Eine Genotypisierung wird erst durchgeführt, wenn eine ausreichende Anzahl von Ereignissen (> 80 % der Studienpopulation) in Bezug auf das PFS gemeldet wird. Statistische Analyse: Das erste Ziel dieser prospektiven Analyse wird die Bewertung der möglichen Rolle der genetischen Interaktion des VEGFR-2 rs11133360/IL-8 rs4073 Polymorphismus sein, um das Ansprechen von Bevacizumab in Bezug auf das PFS vorherzusagen. Die sekundären Endpunkte sind die Korrelationen mit dem Gesamtüberleben (OS) und der Ansprechrate. Alle Polymorphismen werden auf Abweichungen vom Hardy-Weinberg-Gleichgewicht (HWE) analysiert, indem die beobachteten Allelverteilungen mit denen verglichen werden, die vom HWE durch einen x2-Test erwartet werden. Jegliche Korrelation zwischen Genpolymorphismen und Ansprechrate wird mit dem zweiseitigen Fisher's Exact Test analysiert. Die Assoziation zwischen jedem einzelnen Polymorphismus und den relevantesten klinisch-pathologischen Merkmalen mit PFS wird unter Verwendung eines Cox-Proportional-Hazards-Modells getestet. Die Multifactor Dimensionality Reduction (MDR)-Methodik wird angewendet (unter Verwendung von Version 2.0 Beta 6 der MDR-Software, verfügbar unter http://sourceforge.net/projects/mdr/), um die Rolle einer Interaktion zwischen Genpolymorphismen bei der Identifizierung von Biomarkern von Paclitaxel zu untersuchen plus Ansprechen auf Bevacizumab. Die Genotypkombination mit dem höchsten PFS-Vorteil korreliert mit einer OS-Verbesserung wird für weitere Analysen ausgewählt. Der Unterschied im PFS zwischen günstigen genetischen Profilen und den ungünstigen genetischen Profilen wird mit dem Log-Rank-Test und der Kaplan-Meier-Methode zur Bewertung der Überlebenskurven bewertet. Ein Cox-Proportional-Hazards-Modell mit den möglichen genetischen Profilen und den klinischen und pathologischen Patientenmerkmalen, die individuell mit dem PFS korreliert sind, wird verwendet, um die angepasste Hazards Ratio (HR) und das 95 %-Konfidenzintervall (95 %-KI) zu berechnen. Ein P-Wert von < 0,05 wird als statistisch signifikant akzeptiert. Die proportionalen Gefahrenanalysen nach Kaplan-Meier und Cox werden mit der SPSS-Version 17.0 (SPSS, Chicago, IL) durchgeführt.