Studio prospettico dell'interazione genetica VEGFR-2/IL-8 nel MBC trattato con paclitaxel e bevacizumab rispetto alla chemioterapia (BEVAPROS)

Pazienti con carcinoma mammario metastatico (MBC) di dieci divisioni italiane di oncologia medica, con MBC HER2-negativo confermato istologicamente, trattate con una terapia di prima linea comprendente bevacizumab 10 mg/m2 i.v. nei giorni 1 e 15 in combinazione con paclitaxel di prima linea 90 mg/m2 i.v. nei giorni 1,8 e 15, ogni 4 settimane, saranno arruolati per il presente studio di farmacogenetica. Anche i pazienti affetti da MBC trattati con una chemioterapia di prima linea senza bevacizumab saranno arruolati come gruppo di controllo. I siti di malattia metastatica saranno rivalutati radiologicamente secondo i criteri 1.1 di Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST), in pazienti con malattia misurabile. Nei pazienti senza lesioni misurabili, la progressione della malattia sarà definita quando sono comparse nuove lesioni o quando si sono evolute lesioni esistenti. Nel caso di lesioni non misurabili, il deterioramento delle condizioni cliniche non dovuto alla tossicità del trattamento, sarà definito come malattia in progressione. La sopravvivenza libera da progressione (PFS), sarà definita come il periodo di tempo dall'inizio del trattamento alla prima osservazione della progressione della malattia come sopra descritto, o morte per qualsiasi causa. Tutti i pazienti saranno per risposta, PFS e sopravvivenza globale. Ogni paziente che entra nello studio firmerà il consenso informato. Il protocollo è stato approvato dal Comitato Etico Area Vasta Nord Ovest della Toscana (CEAVNO), Pisa, Italia (30/04/2014). Analisi di genotipizzazione campioni di sangue (3 ml.) saranno raccolti in provette di acido etilendiamminotetraacetico e conservati a -80°C. Geni e polimorfismi coinvolti nella via dell'angiogenesi e già suggeriti come predittori della risposta al bevacizumab, saranno scelti per le presenti analisi. L'estrazione del DNA germinale verrà eseguita utilizzando il kit QIamp DNA Blood Mini (Qiagen, Valencia, California, USA). La discriminazione allelica dei geni sarà eseguita utilizzando uno strumento SDS ABI PRISM 7900 (Applied Biosystems, Carlsbad, California, USA) e con saggi di genotipizzazione del polimorfismo a singolo nucleotide (SNP) TaqMan (Applied Byosistems). Le reazioni a catena della polimerasi saranno condotte secondo il protocollo del produttore. La genotipizzazione non verrà eseguita fino a quando non sarà riportato un numero adeguato di eventi (> 80% sulla popolazione in studio) in termini di PFS. Analisi statistica: Il primo obiettivo di questa analisi prospettica sarà valutare il possibile ruolo dell'interazione genetica del polimorfismo VEGFR-2 rs11133360/IL-8 rs4073 nel predire la risposta al bevacizumab in termini di PFS. Gli endpoint secondari saranno le correlazioni con la sopravvivenza globale (OS) e il tasso di risposta. Tutti i polimorfismi saranno analizzati per la deviazione dall'equilibrio di Hardy-Weinberg (HWE) mediante confronto tra le distribuzioni alleliche osservate con quelle attese dall'HWE by on x2 test. Eventuali correlazioni tra polimorfismi genici e tasso di risposta saranno analizzate mediante il test esatto di Fisher a due code. L'associazione tra ogni singolo polimorfismo e le caratteristiche clinico-patologiche più rilevanti con la PFS sarà testata utilizzando un modello di rischi proporzionali di Cox. Verrà applicata la metodologia Multifactor Dimensionality Reduction (MDR) (utilizzando la versione 2.0 beta 6 del software MDR disponibile su http://sourceforge.net/projects/mdr/) per studiare il ruolo di un'interazione tra polimorfismi genici nell'identificazione di biomarcatori di paclitaxel più la risposta al bevacizumab. La combinazione genotipica con il più alto beneficio di PFS correlato a un miglioramento della OS sarà scelta per ulteriori analisi. La differenza di PFS tra i profili genetici favorevoli ei profili genetici sfavorevoli sarà valutata con il log-rank test e il metodo di Kaplan-Meier per valutare le curve di sopravvivenza. Un modello di rischi proporzionali di Cox, con i possibili profili genetici e le caratteristiche cliniche e patologiche del paziente individualmente correlate con la PFS, verrà utilizzato per calcolare l'hazard ratio aggiustato (HR) e l'intervallo di confidenza al 95% (95% CI). Un valore P <0,05 sarà accettato come statisticamente significativo. Le analisi dei rischi proporzionali di Kaplan-Meier e Cox saranno eseguite utilizzando la versione 17.0 di SPSS (SPSS, Chicago, IL).