Efectos cardiovasculares de Apelin en voluntarios sanos

Protocolos de estudio Se asignarán grupos de 5 sujetos para recibir uno de los tres protocolos.

Protocolo 1:

Se pedirá a cinco voluntarios sanos que asistan al centro de investigación clínica en un total de 4 ocasiones según el protocolo a continuación.

Las visitas 1 y 2 se realizarán durante dos días consecutivos. Los participantes asistirán a las 07.30 y se les dará un desayuno ligero. Se insertará una cánula de muestreo intravenoso en la vena antecubital de un brazo. Se tomarán muestras de sangre (5 mL) inmediatamente antes de la inyección subcutánea (t=0; 08.00) de 1 mg (Pyr1)apelin-13 y a los 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 y 600 min después de la inyección. Luego, los sujetos serán dados de alta de la instalación y volverán a asistir al día siguiente a las 08:00 para una muestra venosa única. Se tomarán muestras de aproximadamente 85 ml de sangre en total durante este tiempo.

Las visitas 3 y 4 también se realizarán durante dos días consecutivos, al menos una semana después de la visita 2. Los sujetos asistirán a las 07:30 y se les dará un desayuno ligero. Se insertará una cánula de muestreo intravenoso en la vena antecubital de un brazo. Se tomarán muestras de sangre (5 ml) inmediatamente antes de una infusión en bolo intravenoso (t=0; 08.00) de 1 mg (Pyr1)apelin-13 durante 15 min y a los 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 , 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 y 600 min después de la inyección. Luego, los sujetos serán dados de alta de la instalación y volverán a asistir al día siguiente a las 08:00 para una muestra venosa única.

Protocolo 2:

Se pedirá a cinco voluntarios sanos que asistan al centro de investigación clínica en un total de 4 ocasiones según el protocolo a continuación.

Las visitas 1 y 2 se realizarán durante dos días consecutivos. Los participantes asistirán a las 07.30 y se les dará un desayuno ligero. Se insertará una cánula de muestreo intravenoso en la vena antecubital de un brazo. Se tomarán muestras de sangre (5 mL) inmediatamente antes de la inyección subcutánea (t=0; 08.00) de 5 mg (Pyr1)apelin-13 y a los 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 y 600 min después de la inyección. Luego, los sujetos serán dados de alta de la instalación y volverán a asistir al día siguiente a las 08:00 para una muestra venosa única. Se tomarán muestras de aproximadamente 85 ml de sangre en total durante este tiempo.

Las visitas 3 y 4 también se realizarán durante dos días consecutivos, al menos una semana después de la visita 2. Los sujetos asistirán a las 07:30 y se les dará un desayuno ligero. Se insertará una cánula de muestreo intravenoso en la vena antecubital de un brazo. Se tomarán muestras de sangre (5 ml) inmediatamente antes de una infusión en bolo intravenoso (t=0; 08.00) de 5 mg (Pyr1)apelin-13 durante 15 min y a los 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 , 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 y 600 min después de la inyección. Luego, los sujetos serán dados de alta de la instalación y volverán a asistir al día siguiente a las 08:00 para una muestra venosa única.

Protocolo 3:

Se pedirá a cinco voluntarios sanos que asistan al centro de investigación clínica durante 2 días consecutivos. Los sujetos asistirán a las 07.30 y se les dará un desayuno ligero. Se insertará una cánula de muestreo intravenoso en la vena antecubital de un brazo. Se tomarán muestras de sangre (5 ml) inmediatamente antes de comenzar una infusión subcutánea de 24 h de (t=0; 08,00) de 10 mg de (Pyr1)apelin-13 disueltos en 10 ml de agua para inyección. Se realizarán más muestras venosas a los 5, 10, 15, 20, 25, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360, 480 y 600 minutos después de la inyección. Luego, los sujetos serán dados de alta de la instalación y volverán a asistir al día siguiente a las 08:00 para una muestra venosa única.

Mediciones

Cardiografía de bioimpedancia torácica En virtud de los cambios en la impedancia eléctrica transtorácica durante la eyección cardíaca, la cardiografía de bioimpedancia torácica permite la evaluación no invasiva del volumen sistólico cardíaco y el cálculo del gasto cardíaco y el índice cardíaco. Después de la preparación de la piel, cuatro pares de electrodos de 'detección' y 'inyección de corriente' de baja impedancia de contacto se colocarán en el paciente y se conectarán a un electrocardiógrafo de impedancia. Esta técnica se ha aplicado ampliamente y se compara favorablemente con medidas invasivas y no invasivas (ecocardiográficas) del gasto cardíaco. Por lo tanto, estas variables se registrarán a intervalos regulares durante todo el estudio en los 3 protocolos. También se controlará la frecuencia cardíaca y la presión arterial a intervalos regulares durante cada estudio utilizando un esfigmomanómetro oscilométrico semiautomático (Omron HEM-705CP, Omron, Matsusaka, Japón). La presión arterial media (PAM) se calculará como la presión arterial diastólica más un tercio de la presión del pulso.

Ensayos Se recolectarán muestras de sangre (5 ml) antes y al final de cada infusión de fármaco en ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), se centrifugarán y se congelará el plasma en tres alícuotas de 1 ml para almacenarse a -80 °C hasta el ensayo. Los colaboradores de Bristol Myers Squibb, Princeton, EE. UU., medirán las concentraciones plasmáticas de apelina.

Métodos de Análisis Estadístico

Los datos de los resultados se analizarán cuando corresponda, mediante análisis de varianza (ANOVA) con medidas repetidas, análisis de regresión y prueba t de Student pareada y no pareada. La significación estadística se tomará al nivel del 5%.