Polyinosiini-polysytidyylihappo-poly-L-lysiinikarboksimetyyliselluloosa (Poly-ICLC) terveissä vapaaehtoisissa

Tämä protokolla ottaa systeemibiologian lähestymistavan ymmärtääkseen ihmisillä uuden tärkeän rokotebiologian alueen: mekanismin, jolla adjuvantit, jotka vaikuttavat määriteltyihin muodontunnistusreseptoreihin [PRR], parantavat T- ja B-soluimmuniteettia. Keskitymme synteettiseen kaksijuosteiseen RNA:han eli poly-IC:hen ja sen RNaasi-resistenttimpään muotoon, nimeltään poly ICLC, joka on saatavilla ihmistutkimuksiin. PRR:t ovat sytosolinen helikaasi, MDA-5, ja endosomaalisen maksun kaltainen reseptori, TLR3. Steinman-laboratorio on edelläkävijä hiirillä ja apinoilla, että dsRNA on parempi adjuvantti T-soluvälitteiselle immuniteetille verrattuna useisiin PRR-agonisteihin (Longhi et ai., 2009; Stahl-Hennig et al., 2009). Tärkeä mekanismi on se, että poly IC on ylivoimainen systeemisen tyypin I interferonin [IFN] indusoija, joka puolestaan ​​vaikuttaa tyypin I IFN-reseptoreihin [IFNAR] kypsentäen dendriittisolujen immuunijärjestelmää stimuloivaa toimintaa [DC:t]. Adaptiivinen Th1-tyypin T-soluvaste indusoituu, mutta se on riippumaton IL-12:sta ja IFN-g:stä.

Moniparametriset lähestymistavat tarjoavat nyt keinot ymmärtää adjuvanttitoimintaa. Oletamme, että DC:t käyvät läpi muutoksia, jotka ovat adjuvanttispesifisiä ja yhdistävät sitten synnynnäiset mukautuvan immuniteetin tiettyihin muotoihin. Pernan DC:iden transkriptiojärjestelmät hiirillä osoittavat, että dsRNA indusoi massiivisen vasteen noin 1000 pernan DC-geenin muuttuessa > 2-kertaiseksi 4 tunnissa. Näitä muutoksia ohjaa ensisijaisesti tyypin I IFN, jota tuotetaan systeemisesti MDA-5:n kautta ei-luuytimestä peräisin olevissa soluissa ja sitten vaikuttavat DC IFNAR:iin. IFNAR välittää useimpia muutoksia, joita kutsutaan nimellä "DC-kypsyminen" ja immuunijärjestelmää stimuloivan aktiivisuuden hankkiminen, esim. korkea CD86, CD40, IL-15 ja mekanismeja homeostaasin palauttamiseksi. Toisin sanoen IFN eikä PRR sinänsä muodostaa suurimman osan poly-IC-vasteesta DC:issä.

Äskettäin valmistuneessa vaiheen I tutkimuksessa (protokolla MAC-682) poly-ICLC havaittiin olevan turvallinen ja hyvin siedetty, kun sitä annettiin 1,6 mg:n kerta-annoksena ihonalaisesti (s.c.) ja intranasaalisesti (i.n.) terveille vapaaehtoisille. Alustavat luontaisen immuunivasteen tiedot osoittavat, samoin kuin prekliiniset tutkimukset hiirillä, geenin ilmentymisen merkittävää lisääntymistä kokonaisissa PBMC:issä poly-ICLC-injektion jälkeen. Päivänä 1 poly-ICLC-injektion jälkeen yli 2 000 geeniä on säädelty ylöspäin (> 1,3-kertainen ilmentymisen muutos päivänä 1 verrattuna lähtötilanteeseen) ja nämä vasteet ovat spesifisiä tutkimuslääkkeelle. Tärkeää on, että geenimuutokset ovat homogeenisia niiden 8 vapaaehtoisen joukossa, jotka saivat poly-ICLC:tä. Huippusäädellyt geenit ovat interferonin stimuloimia geenejä, kuten olisi ennustettu, koska poly-ICLC:n tiedetään indusoivan tyypin I interferoneja. Lisäksi geenit, jotka liittyvät dendritristen solujen (DC) aktivaatioon, kuten CD40 ja CD86, myös lisääntyvät päivänä 1 poly-ICLC-injektion jälkeen, samoin kuin geenit, jotka osallistuvat signalointireitteihin, kuten IRF 5, IRF 7 ja STAT1. Poly-ICLC indusoi pienten tyyppien I ja II interferonimäärien erittymistä plasmassa, ja nämä tasot saavuttivat huippunsa päivänä 2 injektion jälkeen. Lopuksi PBMC-solujen FACS-analyysi osoitti, että poly ICLC indusoi aktivaatiomarkkerien lisääntymistä veren dendriittisolujen eri alaryhmissä. Myöhempien aikapisteiden arviointi on parhaillaan käynnissä, mutta näytteiden analyysit päivästä 7 osoittavat, että T- ja B-soluvasteiden tuottamiseen osallistuvat geenit ovat lisääntyneet ja varhaiset interferonin stimuloimat geenit suuntautuvat ilmentymisen perustasoille. Nämä tähän mennessä saadut tulokset osoittavat, että poly-ICLC:n ihonalainen injektio johti systeemisiin synnynnäisiin immuunivasteisiin, joita hallitsee tyypin I interferonien induktio. Määrityksiä on suoritettu kokonaisilla PBMC:illä, mutta veren leukosyyttien eri alaryhmien geneettiset ilmentymismallit vasteena poly-ICLC:lle jäävät määrittelemättä. Nyt ehdotamme poly-ICLC:n jälkeisten systeemisten immuunivasteiden analyysin laajentamista sen transkriptionaalisten vaikutusten karakterisointiin spesifisiin FACS-lajiteltuihin verisolutyyppeihin, kuten DC-soluihin, monosyytteihin, NK-soluihin sekä T- ja B-soluihin. Analysoimalla yksittäisiä solujen alajoukkoja odotamme paremmin erittelevän, kuinka poly ICLC moduloi synnynnäisiä immuunivasteita, jotka voivat puolestaan ​​vaikuttaa adaptiivisiin immuunivasteisiin, kun niitä annetaan yhdessä antigeenin kanssa.

Interferonigeenien (sekä tyypin I IFN:t että IFN-gamma) merkittävää säätelyä ei ilmennyt kokonaisten PBMC:iden geenirivianalyysissä, vaikka plasmassa mitattiin pieniä määriä sekä IFN-alfaa että IFN-gammaa. Voi olla, että käytetty alusta ei ollut tarpeeksi herkkä havaitsemaan IFN-geenien säätelyä, ja aiomme suorittaa RT-PCR:n näiden löydösten tarkistamiseksi. Saattaa kuitenkin olla, että kun rajoitamme analyysimme ääreisvereen, jäämme huomaamatta poly-ICLC-annon jälkeen tapahtuvat varhaiset tapahtumat. Jotta voitaisiin ymmärtää, kuinka poly ICLC aktivoi eri solupopulaatioita, on tärkeää karakterisoida sen immunosäätelyvaikutukset sekä paikallisesti että systeemisesti.

Ihon immuuniympäristö on erityisen altis PRR-ligandin modulaatiolle, mistä on osoituksena imikimodi, joka vaikuttaa TLR 7:ään. Itse asiassa imikimodin käyttö immuunivasteiden stimuloimiseen sekä tartunnanaiheuttajia (HPV) että pahanlaatuisia kasvaimia (levyepiteeli- ja tyvisolusyöpä) vastaan ​​on dokumentoitu. . Vaeltavien DC:iden, jotka kulkevat iholta ihoa tyhjentävälle LN:lle, on osoitettu ylittävän ensisijaiset immuunivasteet itselle ja virusantigeeneille. Sellaisenaan on mahdollista, että ihon DC:t voivat siirtyä ihoa tyhjentäviin LN:ihin tai vereen poly-ICLC-annon jälkeen. Pelkästään veripopulaatioiden analyysi kuitenkin todennäköisesti ohittaa immuunijärjestelmän muutosikkunan, jos nämä tapahtumat tapahtuvat paikallisesti ihossa. Geneettisen ilmentymisen ja solujen infiltraattien analyysi poly-ICLC-injektiokohdassa, sekä varhaisessa vaiheessa (6 tunnin kohdalla) että kun ihon infiltraatio on kliinisesti ilmeistä (päivänä 1), lisää todennäköisesti ymmärrystämme sen adjuvanttivaikutuksista. Ihonäytteiden genomisia ilmentymisprofiileja on käytetty menestyksekkäästi sairauksien luokitteluun ja hoitovasteen ennustamiseen ihosairauksissa, kuten psoriaasissa ja levyepiteelikarsinoomassa (Zaba L et al., 2007; Suarez-Farinas et al., 2010). Ihossa olevan genomisen ilmentymisprofiilin analyysi poly-ICLC:n jälkeen voi osoittautua hyödylliseksi ymmärtämään, kuinka PRR-ligandit ja ehkä muut rokoteadjuvantit käynnistävät synnynnäisiä immuunivasteita.

Useimmissa poly-ICLC-tutkimuksissa ihmisillä käytettiin lihaksensisäistä antotapaa. Poly-ICLC:n ihonalaista antoa ei ole tutkittu laajasti, ja protokolla MAC-682 oli ensimmäinen tutkimus, jossa käytettiin tätä antoreittiä terveillä vapaaehtoisilla. Poly ICLC s.c. 8 vapaaehtoisesta 8:sta kehittyi hyvin rajattu punoitusalue, jossa oli jonkinasteista kovettumaa ja arkuutta. Tämä injektiokohdan reaktio saavuttaa yleensä huippunsa 2. päivänä ja häviää täysin päivänä 7. Tätä infiltraattia kuvaavia histologisia tietoja ei ole saatavilla ihmisistä. Tietoja on kuitenkin saatavilla kädellisistä.

GLP-yhteensopiva toksikologinen tutkimus tehtiin cynomolgus makakeilla, jotta tutkittiin anti-DEC-205 (3G9) - HIV gag p24 (DCVax-001) turvallisuutta yhdessä Hiltonol-adjuvantin (poly ICLC) kanssa ihonalaisesti. Tässä tutkimuksessa makakeille annettiin yhteensä neljä annosta 10 mg anti-DEC-205-HIV gag p24 -vasta-ainetta yhdistettynä 2 mg poly-ICLC:tä, 10 mg poly-ICLC:tä yksinään tai lumelääkettä 8 viikon aikana. Mitä tulee reaktogeenisyyteen (muokattu Draize-pisteytys), oli näyttöä siitä, että poly-ICLC (10 mg) aiheutti erittäin lievän ja ohimenevän injektiokohdan reaktion eryteeman muodossa; reaktio kuitenkin väheni tai puuttui toistuvan annostelun yhteydessä, mikä osoittaa, että sillä oli minimaalista toksikologista merkitystä. Viimeisimmässä antokohdassa ennen eutanasiaa, 1 päivä poly-ICLC-injektion jälkeen, oli useita karkeita leesioita, mukaan lukien tumma alue, tumma värimuutos tai hyytelömäinen materiaali. Ainakin yksi näistä löydöistä esiintyi kaikissa molempia sukupuolia edustavissa eläimissä, jotka saivat 10 mg poly-ICLC:tä. Mikroskooppisesti nämä liittyivät verenvuotoon ja/tai solunulkoisen tai solunsisäisen (makrofagien sisällä) vieraan materiaalin esiintymiseen, jonka oletettiin edustavan pääasiassa adjuvanttia/testiartikkelia. Tämän vuoksi leesioiden katsottiin olevan yhdenmukaisia ​​odotetun paikallisen reaktion kanssa vieraisiin aineisiin injektiokohdissa. Toipumisen jälkeen (4 viikkoa injektion jälkeen) poly-ICLC:n antamiseen liittyviä makroskooppisia löydöksiä ei havaittu. Huolimatta kädellisten ja ihmisen ihon välisistä eroista, odotamme löytävämme samanlaisen ohimenevän soluinfiltraation poly ICLC s.c. injektio.

Sen lisäksi, että se on edellä mainitussa antituumori- ja virusimmuniteetissa, paikallista imikimodia on käytetty adjuvanttina yhdessä intradermaalisen NY-ESO-1-proteiinin kanssa melanoomapotilailla. Tämä yhdistelmä aiheutti ihon mononukleaaristen solujen infiltraatioita kaikilla potilailla. Infiltraatit koostuivat pääasiassa T-soluista, monosyyteistä, makrofageista, myeloidisista DC-soluista, NK-soluista ja vähemmässä määrin plasmasytoidisista DC:istä (Adams et al., 2008). Poly ICLC vaikuttaa kuitenkin erilaisiin PRR:ihin, MDA-5:een ja TLR-3:een, ja todennäköisesti indusoi tyypin I IFN:ien erittymistä paikallisesti. Poly-ICLC:n in situ immunomoduloivat vaikutukset eroavat todennäköisesti imikimodin vaikutuksista. Yhdistämällä poly-ICLC:n indusoimien soluinfiltraattien immunohistokemiallisen arvioinnin ja sen transkriptionaalisten vaikutusten geenirivianalyysin koko ihoon injektiokohdasta alkaen, voidaan selvittää paikallisia tapahtumia ja mekanismeja, joissa poly-ICLC:llä on adjuvanttivaikutus.

Työskentelemällä yhteistyökumppanimme Rafick Sekalyn kanssa, joka on käyttänyt systeemibiologiaa seuratakseen synnynnäisiä ja adaptiivisia vasteita keltakuumerokotteeseen ja muihin potilasryhmiin (Gaucher et al., 2008), voimme ymmärtää immuunitoiminnan adjuvanttihäiriön. Tutkimuksen vapaaehtoisilta kerätyt veri- ja ihonäytteet lähetetään tohtori Sekalyn laboratorioon Rokote- ja geeniterapiainstituutissa, jossa suoritetaan transkriptioryhmiä ja korkealuokkaisia ​​bioinformatiikan analyysejä, jotta saadaan globaali käsitys poly-ICLC:n synnynnäisistä immuunivasteista.

Ehdotettu tutkimus on avoin tutkimus, jolla arvioidaan synnynnäisten immuunivasteiden aiheuttamia poly-ICLC:tä terveillä vapaaehtoisilla. Tutkimuksen tavoitteena on karakterisoida poly-ICLC:n subkutaanisen annon aiheuttamia transkription muutoksia eri verisolutyypeille sekä karakterisoida solujen infiltraatteja ja transkription muutoksia poly-ICLC-injektiokohdassa.

Ensisijainen hypoteesi Poly-ICLC:n antaminen terveille vapaaehtoisille indusoi selkeitä transkription muutoksia eri verisolutyypeissä, mukaan lukien DC:iden eri alajoukot.

Toissijainen hypoteesi Poly-ICLC:n antaminen terveille vapaaehtoisille indusoi selkeitä transkription muutoksia ja T-solujen ja myeloidisolujen tunkeutumista ihoon injektiokohdassa.

Ensisijainen tavoite:

Arvioida synnynnäisiä immuunivasteita poly ICLC:lle eri verisolutyypeissä, mukaan lukien kolme dendriittisolujen alaryhmää ihonalaisen annon jälkeen terveille vapaaehtoisille.

Toissijaiset tavoitteet:

• Arvioida synnynnäisiä immuunivasteita poly-ICLC:lle injektiokohdassa.
• Arvioida synnynnäisten immuunivasteiden toistettavuutta kokonaisissa PBMC:issä toisen poly-ICLC-annoksen jälkeen vapaaehtoisilla, jotka osallistuivat protokollaan MAC-682 ja palaavat nyt osallistumaan tähän ehdotettuun tutkimukseen.

Ensisijaiset tulokset:

• Transkriptiojärjestelmät kokonaisissa PBMC:issä ja 8 veren leukosyyttien alajoukossa (naiivit ja muisti T, NK, B, monosyytit ja kolme erilaista dendriittisolujen alajoukkoa (BDCA1+, BDCA3+ ja BDCA2+ plasmasytoidisolut) s.c.:n jälkeen. poly-ICLC:n antaminen.
• Aktivaatiomarkkerien virtaussytometrinen analyysi veren leukosyyttien eri alaryhmissä.
• Sytokiinien mittaus seerumissa ja/tai plasmassa s.c. poly-ICLC:n antaminen.

Toissijaiset tulokset:

• Rutiininomainen histologia ja immunohistokemia soluinfiltraattien arvioimiseksi poly-ICLC:n ihonalaisen injektion jälkeen.
• Ihonäytteiden transkriptioanalyysi tutkimuslääkkeen injektiokohdasta ja ihon ei-leesionaalisesta kohdasta.
• Kokonaisten PBMC-näytteiden transkriptioanalyysi eri ajankohtina ensimmäisen ja toisen poly-ICLC-annoksen jälkeen vapaaehtoisilla, jotka osallistuivat protokollaan MAC-682 ja ovat nyt palaamassa osallistumaan tähän ehdotettuun tutkimukseen.

Menetelmät ja menettelyt:

Esiseulontakysely Potentiaaliset osallistujat läpikäyvät ensin esiseulonnan puhelimitse sairaushistorian ja tutkimukseen kelpaavuuden arvioimiseksi (Liite C - Esiseulontakysely). Mahdollisilla vapaaehtoisilla on tässä vaiheessa mahdollisuus keskustella tutkimuksesta ja esittää kysymyksiä tutkimuksen rekrytoijalta. Osallistumiskelpoiset ja osallistumisesta kiinnostuneet osallistuvat seulontavierailulle Rockefeller Hospital -poliklinikalle.

Seulontakäynti

Seulontakäynnin aikana tutkimushenkilökunta vastaa tutkimukseen liittyviin kysymyksiin. Kirjallinen tietoinen suostumus hankitaan ennen tutkimustoimenpiteiden suorittamista. Tietoisen suostumuksen varmistamiseksi päätutkija tai nimetty henkilö keskustelee seuraavista prosesseista ja selityksistä erikseen jokaisen vapaaehtoisen kanssa:

1. Neuvonta ennen HIV-testiä.
2. Seksuaalisesti aktiivisten vapaaehtoisten tulee käyttää luotettavaa ehkäisyä seulonnasta 6 viikon ajan lääkkeen annon jälkeen.

Jos vapaaehtoinen suostuu osallistumaan, sivuston henkilökunta:

• suorittaa täydellinen sairaushistoria (mukaan lukien samanaikainen lääkitys);
• Suorita yleinen fyysinen tutkimus, mukaan lukien pituus, paino, elintoiminnot (pulssi, hengitystiheys, verenpaine ja lämpötila), ihon, hengityselinten, sydän- ja verisuonijärjestelmän ja vatsan järjestelmien tutkimus sekä kohdunkaulan ja kainaloimusolmukkeiden arviointi;
• Kerää veri- ja virtsanäytteet kaikkia kokeita varten menettelytaulukon (Liite A) mukaisesti;
• Tee raskaustesti kaikille vapaaehtoisille naisille.

Seulontalaboratoriokokeet voidaan toistaa päätutkijan tai nimetyn henkilön harkinnan mukaan yksittäisten poikkeavuuksien tutkimiseksi.

Jos seulontakäynti tapahtuu yli 45 päivää ennen lääkkeen antopäivää, seulontakäynnin tutkimustoimenpiteet on toistettava. Täydellinen sairaushistoria voidaan kuitenkin korvata väliaikaisella sairaushistorialla ja tietoon perustuva suostumuslomake voidaan tarkastella uudelleen allekirjoittamatta.

Lääkehallinnon käynti (päivä 0)

Ennen tutkimuslääkkeen antamista työpaikan henkilökunta:

• Vastaa kaikkiin tutkimukseen liittyviin kysymyksiin;
• Tarkista väliaikainen sairaushistoria (mukaan lukien samanaikaiset lääkkeet);
• Tarkista turvallisuuslaboratoriotiedot;
• Tarkista vapaaehtoisen seulontakäynnillä annettu tietoinen suostumuslomake;
• Suorita suunnattu fyysinen tutkimus, joka sisältää elintärkeitä merkkejä (pulssi, hengitystiheys, verenpaine ja lämpötila), sekä kainaloiden imusolmukkeiden arviointi ja mahdolliset lisätutkimukset, joita historian tai havainnon osoittavat;
• Kerää veri- ja virtsanäytteet kaikkia kokeita varten menettelytaulukon (Liite A) mukaisesti;
• Suorita raskaustesti kaikille vapaaehtoisille naisille (veri lähetetään tilastot) ja hanki tulokset ennen lääkkeen antamista
• Suorita tutkimuslääkkeen paikan perustason arviointi ja arvioi ja kirjaa ylös kaikki systeemiset oireet;
• Anna tutkimuslääke (injektiokohdat voivat olla olkavarret, reidet tai pakarat)
• Vapaaehtoisille, jotka ovat suostuneet ottamaan ihon lyöntibiopsiaa, tehdään kaksi ihon lyöntibiopsiaa: yksi ihokohdassa, joka on vastakkainen pistoskohdan kanssa ja toinen injektiokohdassa, 6 tuntia tutkimuslääkkeen annon jälkeen. Kaksi biopsiaa varten valittua ihokohtaa puhdistetaan povidonijodilla ja nukutetaan injektoimalla 1-2 % ksylokaiinia. L.M.X.4 (lidokaiini 4 %) voidaan myös levittää paikallisesti käytettävää anestesiavoidetta. Ihosta poistetaan kaksi biopsiaa (6 mm). Haavat ommellaan ja laitetaan steriili side. Tämä toimenpide jättää pienen ja pysyvän arven.
• Vapaaehtoisella on mahdollisuus jäädä sairaalaan yöksi tutkimuslääkkeen tai lumelääkkeen antoa edeltävänä yönä ja/tai tutkimuslääkkeen antamispäivänä mukavuussyistä ("rajoitukset") tai määrätä päiväpotilaaksi.

Vapaaehtoisia tarkkaillaan tiiviisti vähintään 30-45 minuuttia lääkkeen antamisen jälkeen. Elintoimintoja (pulssi, hengitystiheys, verenpaine ja lämpötila) seurataan 30-45 minuuttia rokotuksen jälkeen ja kirjataan. Kaikki paikalliset ja systeemiset reaktogeenisuustapahtumat sekä kaikki muut tapahtumat kirjataan 30–45 minuutin kohdalla. Vapaaehtoisille annetaan päiväkirjakortti (Liite B) ja pyydetään kirjaamaan kaikki reaktogeenisuustapahtumat, jotka tapahtuvat ensimmäisenä päivänä lääkkeen annon jälkeen ja päivien 1 ja 3 välillä sekä päivien 3 ja 7 välillä. Työpaikan henkilökunta selittää vapaaehtoiselle, kuinka reaktogeenisuus kirjataan Tapahtumat.

Lääketieteellinen valokuvaus tehdään pistoskohdan ja mahdollisten injektion jälkeisten muutosten dokumentoimiseksi. Vapaaehtoisen henkilöllisyys pidetään luottamuksellisena.

Päivä 1 Lääkehallinnon jälkeinen käynti

• Väliaikaisen sairaushistorian tarkastelu ja samanaikaisten lääkkeiden käyttö;
• Jos oireita on, suorita oireisiin kohdistettu fyysinen tutkimus;
• Arvioi paikallinen ja systeeminen reaktogeenisyys sekä kaikki muut haittatapahtumat;
• Kerää veri- ja virtsanäytteet kaikkia testejä varten menettelytaulukon (Liite A) mukaisesti.
• Vapaaehtoisille, jotka ovat suostuneet ottamaan ihonlyöntibiopsiat, suoritetaan yksi ylimääräinen ihonlyöntibiopsia 1 päivän kuluttua tutkimuslääkkeen antamisesta injektiokohdassa. Biopsialle valittu ihokohta puhdistetaan povidonijodilla ja nukutetaan injektoimalla 1-2 % ksylokaiinia. L.M.X.4 (lidokaiini 4 %) voidaan myös levittää paikallisesti käytettävää anestesiavoidetta. Ihon (6 mm) biopsia poistetaan. Haava ommellaan ja kiinnitetään steriili side. Tämä toimenpide jättää pienen ja pysyvän arven.

Lääkehallinnon jälkeiset vierailut

Vapaaehtoisia pyydetään palaamaan klinikalle 2, 3 ja 7 päivää tutkimuslääkkeen antamisen jälkeen. Näinä päivinä järjestetään seuraavaa:

• Väliaikaisen sairaushistorian tarkastelu ja samanaikaisten lääkkeiden käyttö;
• Jos oireita on, suorita oireisiin kohdistettu fyysinen tutkimus;
• Arvioi paikallinen ja systeeminen reaktogeenisyys sekä kaikki muut haittatapahtumat;
• Kerää veri- ja virtsanäytteet kaikkia kokeita varten menettelytaulukon (Liite A) mukaisesti;

Seurantakäynti

Viikolla 2 vapaaehtoisia pyydetään palaamaan klinikalle lisäarviointia varten turvallisuudesta ja immunogeenisuudesta. Tällä vierailulla suoritetaan seuraavaa:

• Väliaikaisen sairaushistorian tarkastelu ja samanaikaisten lääkkeiden käyttö;
• Jos oireita on, suorita oireisiin kohdistettu fyysinen tutkimus;
• Arvioi mahdolliset haittatapahtumat;
• Kerää veri- ja virtsanäytteet kaikkia kokeita varten menettelytaulukon (Liite A) mukaisesti;
• Ompeleen poisto valinnaisten ihobiopsioiden jälkeen, jos biopsiat tehdään.

Näytteitä ei lähetetä yhteistyökumppaneillemme, tohtori Rafick Sekalylle, ennen kuin Rockefellerin IRB on hyväksynyt ja tarkistanut hänen IRB-hyväksynnän.