Asetyyliamantadiinin virtsaan erittyminen normaalien terveiden vapaaehtoisten toimesta

20 naisen ja 20 miehen normaalin, 18–69-vuotiaan terveen vapaaehtoisen ryhmä rekrytoidaan yhteisöstä yleisen ilmoituksen avulla, joka on alun perin sijoitettu julisteiksi.

Kerromme vapaaehtoisille, että teemme tämän tutkimuksen terveillä vapaaehtoisilla selvittääksemme, kuinka amantadiini poistuu elimistöstä. Selitämme amantadiinin farmakologian ja yksittäisen annoksen mahdolliset sivuvaikutukset ennen kuin saamme suostumuksen. Vapaaehtoisille kerrotaan mahdollisuudesta, että alkoholin samanaikainen nauttiminen voi johtaa asetyyliamantadiinin esiintymiseen virtsassa. Vapaaehtoisten on pidättäydyttävä alkoholin käytöstä vähintään yhden päivän ajan ennen amantadiinin nauttimista ja virtsan keräämistä, mukaan lukien aika. Kaikki aiemmat amantadiinin haittavaikutukset sulkevat henkilön pois vapaaehtoistyöstä tästä tutkimuksesta. Koehenkilöille kerrotaan, että tämän lääkkeen nauttimisen sivuvaikutukset ovat erittäin epätodennäköisiä, koska vain yksi annos annetaan. Kaikki sivuvaikutukset, jos niitä esiintyy, liittyvät amantadiinin vaikutukseen aivoihin. Näitä vaikutuksia voivat olla unettomuus, hermostuneisuus, keskittymisvaikeudet ja henkinen masennus. Nämä ovat kuitenkin sivuvaikutuksia, jotka liittyvät amantadiinin krooniseen nauttimiseen, ja ne ovat erittäin epätodennäköisiä kerta-annoksen nauttimisen yhteydessä. Kun suostumus on saatu, vapaaehtoiset nielevät terapeuttisen annoksen amantadiinia (200 mg) aamulla, vähintään 2 tuntia ennen aamiaista, ja heidän täydellinen virtsansa kerätään 12 tunnin aikana annoksen jälkeen. Aiempi kliininen tutkimus laboratoriossamme, jossa kerättiin virtsaa yhteensä 8 tunnin ajan, osoitti, että tämä keräysaika riitti keräämään kaiken metabolisesti tuotetun asetyyliamantadiinin virtsaan. Virtsanäytteistä analysoidaan myös niiden kreatiniinipitoisuus osoituksena virtsankeräyksen täydellisyydestä. Virtsat merkitään sitten koodilla ja pakastetaan -20 °C:seen analysointiin asti. Virtsasta analysoidaan asetyyliamantidiini vakiintuneella kaasukromatografiamenetelmällämme. Näytteitä analysoiva teknikko ei pääse käsiksi muihin osallistujatietoihin kuin etiketissä olevaan koodiin. Sylkinäytteet otetaan myös 2 tunnin välein amantadiinin nauttimisen jälkeen. On huomattava, että amantadiinin aamuannoksella useiden sylkinäytteiden kerääminen yksinkertaistuu ja mahdollistaa optimaalisen ajan määrittämisen annoksen jälkeen virtsaanalyysiä varten. Lisäksi tämä malli tunnistaa tilaisuuden antaa paras signaali-kohinasuhde asetyyliamantidiinin tuotannossa. Verinäytteet otetaan 1 tunti ennen annostelua ja 2 tuntia annoksen jälkeen.

Keräämme jokaiselta vapaaehtoiselta myös seuraavat tiedot: hänen nimensä, ikänsä, sukupuolensa, ruumiinpainonsa, pituutensa, samanaikainen lääkkeiden käyttö ja viimeaikainen alkoholin nauttiminen. Näitä tietoja käytetään korrelaatioanalyyseissä määrittämään mikä tahansa virtsan asetyyliamantidiinin suhde tiettyyn syöpädiagnoosiin, sukupuoleen ja/tai alkoholinkäyttöhistoriaan. Päätutkija koodaa kaikki nämä tiedot, ja yksilölliset tunnistetiedot lukitaan turvalliseen kaappiin. Muiden kuin päätutkijan ja/tai heidän hoitavan lääkärinsä pääsyä tietoihin ei sallita.

Poissulkemiskriteerit ovat kaikki, joilla on aiemmin ollut amantadiinin haittavaikutuksia, sekä raskaana olevat tai imettävät naiset, jotka suljetaan pois vapaaehtoistyöstä tähän tutkimukseen.

Löydön ristiinvalidointi tapahtuu näiden virtsanäytteiden korkean erotuskyvyn nestekromatografialla (HPLC) polyamiinien ja metaboliittien, mukaan lukien N1-asetyylispermidiinin, esiintymisen varalta.