HCG:n vaikutus ihmisen kohdun limakalvon reseptiivisuuteen
HCG:n vaikutus ihmisen kohdun limakalvoon
Maailmanlaajuisesti yhdellä 12:sta pariskunnalla on vaikeuksia tulla raskaaksi ja he hakevat apua avusteisten lisääntymistekniikoiden (ART) avulla, kuten koeputkihedelmöitykseen (IVF-muna hedelmöitetään siittiöistä kehon ulkopuolella), munasarjojen stimulaatiota (lääkkeitä käytetään munasolujen kehityksen stimulointiin) ) ja solulimansisäinen injektio (ICSI-yksittäinen siittiö injektoidaan suoraan munaan).
Suoritettavasta ART-toimenpiteestä huolimatta vasta hedelmöittyneen alkion on silti implantoitava äidin kohdun limakalvoon (kohdun sisäkalvo). Tämä implantaatioprosessi ihmisissä on yllättävän tehoton ja aiheuttaa jopa 50 % ART-virheistä. Kohdunsisäisen hCG-infuusion ennen alkionsiirtoa on äskettäin osoitettu lisäävän raskauden määrää, mutta tämän lisääntymisen solumekanismia ei tunneta.
Onnistunut istutus edellyttää, että juuri hedelmöitetty alkio ja kohdun limakalvo kehittyvät synkronoidulla tavalla. Tämä koordinoitu kehitys saadaan osittain aikaan alkion erittämien proteiinien avulla, jotka kiertävät äidin verenkierrossa ja varoittavat äidin kehon elimiä (ts. munasarja, kohdun limakalvo, rinta jne.), että hedelmöitys on tapahtunut.
Yksi varhaisimmista näistä erittyneistä proteiineista on ihmisen koriongonadotropiini (hCG), joka on molekyyli, joka havaitaan reseptivapaissa raskaustesteissä. Aikaisemmista tutkimuksista tiedämme, että alkion hCG-tuotanto varoittaa munasarjoja jatkamaan progesteronin, raskauden edellyttämän hormonin, tuotantoa. Hyvin vähän tiedetään kuitenkin hCG:n suorasta vaikutuksesta kohdun limakalvoon raskauden alkuvaiheessa ihmisillä.
Eläinmalleja käytettäessä hCG:n on osoitettu aiheuttavan spesifisiä muutoksia kohdun limakalvossa, mikä viittaa siihen, että alkiosta peräisin oleva hCG saattaa "pohjustaa" kohdun limakalvoa odottaessaan istutusta. Tämän tutkimustutkimuksen tavoitteena on tutkia hCG:n suoraa vaikutusta ihmisen kohdun limakalvoon ja nähdä, esiintyykö tämä "aloitusvaikutus" myös ihmisillä. Tämän tutkimuksen tulokset voivat paljastaa, voiko hCG-esihoito parantaa ART-tuloksia, erityisesti raskauden määrää.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Alkion istuttaminen ihmisiin on yllättävän tehotonta ja edustaa pääasiallista rajoittavaa tekijää ART:n onnistumisasteiden parantamisessa (viite 1-2). Onnistunut istutus edellyttää synkronoitua kehitystä juuri hedelmöittyneen alkion ja äidin kohdun limakalvon välillä tietyn ajan kuluessa. Nisäkkäillä tämä koordinoitu kehitys saadaan aikaan osittain alkion eritteiden avulla, jotka varoittavat kehon hedelmöittymisestä.
Yksi varhaisimmista alkion tuottamista proteiineista on ihmisen koriongonadotropiini (hCG). Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että hCG ylläpitää munasarjojen progesteronin tuotantoa, raskauden ylläpitämiseen tarvittavaa hormonia. Kuitenkin hyvin vähän tiedetään hCG:n suorasta vaikutuksesta ihmisen kohdun limakalvoon. Laboratoriomme on aiemmin osoittanut, että hCG:n kohdunsisäinen infuusio kädelliselle voi aiheuttaa kohdun limakalvon muutoksia, jotka jäljittelevät raskauden alkuvaiheita (esim. muuttunut solumorfologia, ennen decidual -vastetta ja lisääntynyt rauhasten aktiivisuus; viite 3-4). Nämä tulokset viittaavat siihen, että alkiosta peräisin oleva hCG voi myös vaikuttaa suoraan kohdun limakalvoon ja "aloittaa" sen implantaatiota ennakoiden. Muiden laboratorioiden tutkimukset, joissa tutkitaan hCG:n vaikutusta kohdun limakalvon geeneihin in vitro, tukevat tätä hypoteesia (viite: 5-9). Lisäksi äskettäinen tutkimus naisilla, joille tehtiin ART, paljasti merkittävästi lisääntyneen implantaatio- ja raskausasteen, kun alkionsiirtoa edelsi kohdunsisäinen 500 IU hCG:n infuusio (viite 10).
Tämän tutkimuksen tarkoituksena on määrittää, esiintyykö kädellismallissamme aiemmin havaittu kohdun limakalvon vaste hCG:lle myös naisilla, ja karakterisoida tämä vaikutus. Naiset, jotka suunnittelevat kontrolloitua munasarjojen stimulaatiota munasolun luovuttamista varten, voivat osallistua tähän tutkimukseen. Koeryhmän koehenkilöt saavat yhden kohdunsisäisen infuusion hCG:tä (500 IU) laimennettuna IVF-väliaineeseen 3 päivää munasolun talteenoton jälkeen. Kontrollihenkilöt saavat vain yhden kohdunsisäisen IVF-väliaineen infuusion. Kaksi päivää infuusion jälkeen sekä koeryhmän että kontrollin osallistujat palaavat klinikalle, jossa näyte kohdun limakalvon kudoksesta otetaan pipelle-biopsialla ja näyte kohdun eritysproteiineista kohdun huuhtelulla. Kohdun huuhtelunäytteet tutkitaan ELISA/proteominen analyysillä hCG:n vaikutuksen määrittämiseksi kohdun proteiinieritykseen. Yksi osa endometriumin biopsiasta kiinnitetään formaliinilla ja upotetaan parafiiniin hCG-altistuksen jälkeisten morfologisten ja rakenteellisten muutosten analysoimiseksi. Toista osaa käytetään solu- ja molekyylianalyysiin hCG:n vaikutuksen määrittämiseksi kiinnostaviin geeneihin ja proteiineihin.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Vaihe 4
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Michigan
-
Grand Rapids, Michigan, Yhdysvallat, 49525
- The Fertility Center , 3230 Eagle Park Drive NE, suite 100
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- 18-34-vuotiaille
- haki onnistuneesti munasolun luovuttajastatusta Investigators Infertility -klinikalla (The Fertility Center, 3230 Eagle Park Drive NE, suite 100. Grand Rapids MI 49525)
- täyttävät ASRM-kriteerit munasolujen luovuttamiselle
Poissulkemiskriteerit:
- alle 18-vuotias tai vanhempi kuin 34-vuotias
- eivät ole onnistuneesti hakeneet munasolun luovuttajastatusta Investigatorsin hedelmättömyysklinikalla (The Fertility Center, 3230 Eagle Park Drive NE, suite 100. Grand Rapids MI 49525)
- eivät täytä oosyyttiluovutuksen ASRM-kriteerejä
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Perustiede
- Jako: Ei satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: Lääke: ihmisen koriongonadotropiini (hCG)
Lääke: ihmisen koriongonadotropiini (hCG).
Yksi kohdunsisäinen infuusio 500 IU hCG:tä liuotettuna IVF-elatusaineeseen ("Global"-tavaramerkki) annetaan koeryhmän osallistujille kolme päivää munasolun talteenoton jälkeen.
Kaksi päivää tämän infuusion jälkeen osallistuja palaa klinikalle, jossa suoritetaan kohdun huuhtelu ja kohdun limakalvon biopsia saadakseen näyte kohdun eritysproteiineista ja kohdun limakalvokudoksesta tutkimusanalyysiä varten.
|
500 IU hCG:tä laimennettuna lopulliseen tilavuuteen 50 ul IVF-väliaineessa ("Global"-tavaramerkki)
Muut nimet:
|
|
Placebo Comparator: IVF-media ("Global"-tavaramerkki)
Plasebovertailu hCG:lle.
Kontrolliryhmän osallistujille annetaan yksi kohdunsisäinen IVF-väliaineen infuusio ilman hCG:tä kolme päivää munasolun talteenoton jälkeen.
Kaksi päivää tämän infuusion jälkeen osallistuja palaa klinikalle, ja näyte kohdun eritysproteiineista ja kohdun limakalvokudoksesta otetaan kohdun huuhtelulla ja kohdun limakalvon biopsialla tutkimusanalyysiä varten.
|
50 ul IVF-elatusainetta ("Global"-tavaramerkki) hCG-infuusion jäljittelemiseksi
Muut nimet:
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Endometriumin vaiheistus hCG:llä verrattuna ajoneuvolla hoidetuihin potilaisiin
Aikaikkuna: 2 päivää hCG- tai IVF-väliaineen infuusion jälkeen
|
Kaikki H&E-värjätyt kohdun limakalvon biopsiat analysoitiin sokkomenetelmällä kohdun limakalvon ajoituksen sekä rauhas- ja stroomakehityksen suhteen.
Kohdun limakalvon ajoituksen kriteereihin sisältyi subnukleaaristen vakuolien läsnäolo tai puuttuminen, mikä on yksi Noyesin ajoituskriteerien toistettavimmista piirteistä.
Tilastollista analyysiä varten otettiin huomioon edistyneimmät elementit kummassakin endometriumin osastossa.
Tiedot ilmoitetaan erityisesti päivinä ovulaation induktion jälkeen.
|
2 päivää hCG- tai IVF-väliaineen infuusion jälkeen
|
|
HCG-kohde-NOTCH1-proteiinin ilmentyminen IHC:llä kohdun limakalvon rauhasissa
Aikaikkuna: 2 päivää hCG- tai IVF-väliaineen infuusion jälkeen
|
Kunkin osan värjäytymisintensiteetti määritettiin kuva-analyysiohjelmistolla ImageJ (NIH), mikä johti digitaaliseen histologiaan (D-HSCORE), joka vaihteli välillä 0 - 255.
Korkeammat pisteet liittyvät voimakkaampaan värjäytymiseen/ekspressioon, kun taas pienemmät pisteet ovat päinvastaisia.
|
2 päivää hCG- tai IVF-väliaineen infuusion jälkeen
|
|
HCG-kohde-NOTCH1-proteiinin ilmentäminen IHC:llä endometriumin stroomassa
Aikaikkuna: 2 päivää hCG- tai IVF-väliaineen infuusion jälkeen
|
Kunkin osan värjäytymisintensiteetti määritettiin kuva-analyysiohjelmistolla ImageJ (NIH), mikä johti digitaaliseen histologiaan (D-HSCORE), joka vaihteli välillä 0 - 255.
Korkeammat pisteet liittyvät voimakkaampaan värjäytymiseen/ekspressioon, kun taas pienemmät pisteet ovat päinvastaisia.
|
2 päivää hCG- tai IVF-väliaineen infuusion jälkeen
|
|
HCG-kohde-C3-proteiinin ilmentäminen IHC:llä endometriumin stroomassa
Aikaikkuna: 2 päivää hCG- tai IVF-väliaineen infuusion jälkeen
|
Kunkin osan värjäytymisintensiteetti määritettiin kuva-analyysiohjelmistolla ImageJ (NIH), mikä johti digitaaliseen histologiaan (D-HSCORE), joka vaihteli välillä 0 - 255.
Korkeammat pisteet liittyvät voimakkaampaan värjäytymiseen/ekspressioon, kun taas pienemmät pisteet ovat päinvastaisia.
|
2 päivää hCG- tai IVF-väliaineen infuusion jälkeen
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Asgerally T. Fazleabas, PhD, Michigan State University. Assistant Chair-Dept of Obstetrics, Gynecology&Reproductive Biology
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- Macklon NS, Geraedts JP, Fauser BC. Conception to ongoing pregnancy: the 'black box' of early pregnancy loss. Hum Reprod Update. 2002 Jul-Aug;8(4):333-43. doi: 10.1093/humupd/8.4.333.
- Mansour R, Tawab N, Kamal O, El-Faissal Y, Serour A, Aboulghar M, Serour G. Intrauterine injection of human chorionic gonadotropin before embryo transfer significantly improves the implantation and pregnancy rates in in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection: a prospective randomized study. Fertil Steril. 2011 Dec;96(6):1370-1374.e1. doi: 10.1016/j.fertnstert.2011.09.044. Epub 2011 Nov 1.
- Koot YE, Teklenburg G, Salker MS, Brosens JJ, Macklon NS. Molecular aspects of implantation failure. Biochim Biophys Acta. 2012 Dec;1822(12):1943-50. doi: 10.1016/j.bbadis.2012.05.017. Epub 2012 Jun 7.
- Fazleabas AT, Donnelly KM, Srinivasan S, Fortman JD, Miller JB. Modulation of the baboon (Papio anubis) uterine endometrium by chorionic gonadotrophin during the period of uterine receptivity. Proc Natl Acad Sci U S A. 1999 Mar 2;96(5):2543-8. doi: 10.1073/pnas.96.5.2543.
- Banaszak S, Brudney A, Donnelly K, Chai D, Chwalisz K, Fazleabas AT. Modulation of the action of chorionic gonadotropin in the baboon (Papio anubis) uterus by a progesterone receptor antagonist (ZK 137. 316). Biol Reprod. 2000 Sep;63(3):820-5. doi: 10.1095/biolreprod63.3.820.
- Banerjee P, Sapru K, Strakova Z, Fazleabas AT. Chorionic gonadotropin regulates prostaglandin E synthase via a phosphatidylinositol 3-kinase-extracellular regulatory kinase pathway in a human endometrial epithelial cell line: implications for endometrial responses for embryo implantation. Endocrinology. 2009 Sep;150(9):4326-37. doi: 10.1210/en.2009-0394. Epub 2009 Jun 25.
- Sherwin JR, Sharkey AM, Cameo P, Mavrogianis PM, Catalano RD, Edassery S, Fazleabas AT. Identification of novel genes regulated by chorionic gonadotropin in baboon endometrium during the window of implantation. Endocrinology. 2007 Feb;148(2):618-26. doi: 10.1210/en.2006-0832. Epub 2006 Nov 16.
- Sherwin JR, Hastings JM, Jackson KS, Mavrogianis PA, Sharkey AM, Fazleabas AT. The endometrial response to chorionic gonadotropin is blunted in a baboon model of endometriosis. Endocrinology. 2010 Oct;151(10):4982-93. doi: 10.1210/en.2010-0275. Epub 2010 Jul 28.
- Brosens JJ, Hodgetts A, Feroze-Zaidi F, Sherwin JR, Fusi L, Salker MS, Higham J, Rose GL, Kajihara T, Young SL, Lessey BA, Henriet P, Langford PR, Fazleabas AT. Proteomic analysis of endometrium from fertile and infertile patients suggests a role for apolipoprotein A-I in embryo implantation failure and endometriosis. Mol Hum Reprod. 2010 Apr;16(4):273-85. doi: 10.1093/molehr/gap108. Epub 2009 Dec 14.
- Evans J, Catalano RD, Brown P, Sherwin R, Critchley HO, Fazleabas AT, Jabbour HN. Prokineticin 1 mediates fetal-maternal dialogue regulating endometrial leukemia inhibitory factor. FASEB J. 2009 Jul;23(7):2165-75. doi: 10.1096/fj.08-124495. Epub 2009 Mar 2.
- Strug MR, Su R, Young JE, Dodds WG, Shavell VI, Diaz-Gimeno P, Ruiz-Alonso M, Simon C, Lessey BA, Leach RE, Fazleabas AT. Intrauterine human chorionic gonadotropin infusion in oocyte donors promotes endometrial synchrony and induction of early decidual markers for stromal survival: a randomized clinical trial. Hum Reprod. 2016 Jul;31(7):1552-61. doi: 10.1093/humrep/dew080. Epub 2016 Apr 26.
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- Endo-hCG-755
- IRB 12-755F (Muu tunniste: MSU)
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .