Naudanlihan ainutlaatuisen ruokamatriisin vaikutus ihmisten terveyteen

Terveiden, tupakoimattomien miesten kelpoisuus seulotaan, ja tutkimukseen valitaan vähintään 30 miestä ensisijaisesti plasman matalatiheyksisten lipoproteiinikolesterolin (LDL-C) pitoisuuksien, mutta myös plasman TAG-pitoisuuksien perusteella. Miehet eivät saa käyttää rajoittavia ruokavalioita tai kolesterolia alentavia lääkkeitä, eikä niiden kokonaiskolesteroli saa olla yli 300 mg/dl tai alle 120 mg/dl. Osallistujia pyydetään olemaan muuttamatta tavanomaista fyysistä aktiivisuuttaan. Plasman TAG-arvo ei saa ylittää 220 mg/dl. Kaksijaksoista, satunnaistettua cross-over-mallia käytetään laboratoriomme aikaisempien tutkimusten perusteella. Jokainen osallistuja suorittaa kaksi 5 viikon jauhelihainterventiota satunnaisessa järjestyksessä ja testijaksojen välillä on 4 viikon pesujakso. Miehet syövät 5 jauhelihapihviä viikossa 5 viikon ajan kutakin jauhelihatyyppiä kohden (25 pihviä kutakin tyyppiä kohti). Kaksi hoitoa ovat vähärasvaista (5 % rasvaa) ja runsasrasvaista (25 % rasvaa) jauhelihaa. Osallistujat jaetaan toiseen kahdesta ryhmästä (n ≥ 15 ryhmää kohti), jotka tasapainotetaan LDL-kolesterolipitoisuuksien suhteen alkuseulonnassa. Ryhmät suljetaan iän ja painon perusteella.

Käynti 1 tutkimukseen valituille koehenkilöille (välittömästi ennen ensimmäistä ruokavaliointerventiota) (noin 1 tunti):

Rekisteröity ravitsemusterapeutti antaa ruokavalio-ohjeet, näytemenut ja ruoanlaitto-ohjeet. Osallistujat saavat ohjeet ruokavaliotietojen täyttämiseen NutriBase-ohjelmistolla.

Osallistujat saavat ensimmäiset pihvit. Koehenkilöt suorittavat 3 päivän ruokavaliotiedot NutriBaseen (joka tehdään kotona) ennen kuin he alkavat syödä pihvejä. Koehenkilöille annetaan myös ohjeita pihvien kulutuksen aikataulusta.

Koehenkilöt täyttävät 3 päivän ruokavaliotietueen NutriBase-palvelussa viikon 5 aikana pihvien kulutuksen aikana.

Rekisteröity ravitsemusterapeutti tai päätutkija ottaa yhteyttä tutkittaviin (puhelimitse tai sähköpostitse) kerran viikossa kysyäkseen, onko koehenkilöillä kysyttävää tutkimuksesta tai NutriBase-järjestelmästä ja varmistaakseen, että he keittävät ja käyttävät pihvejä ohjeiden mukaisesti.

Ensimmäisen 5 viikon toimenpiteen jälkeen on 4 viikon pesujakso, jolloin koehenkilöillä ei ole opintokäyntejä ja he syövät tavanomaista ruokavaliotaan. Koehenkilöitä pyydetään jatkamaan 3 päivän ruokavalioennätyksen täyttämistä NutriBase-ohjelmassa pesujakson viimeisen viikon aikana.

Rekisteröity ravitsemusterapeutti tai PI ottaa yhteyttä tutkittaviin (puhelimitse tai sähköpostitse) kerran viikossa kysyäkseen, onko koehenkilöillä kysyttävää tutkimuksesta tai NutriBase-järjestelmästä ja varmistaakseen, että koehenkilöt valmistavat ja käyttävät pihvejä ohjeiden mukaisesti.

Naudan jauhelihan lähde. Raaka-aineen lähde 5- ja 25-prosenttisten pihveiden valmistukseen tulee rehualalla ruokittujen nautojen kylkestä ja lautasesta, joka prosessoidaan Rosenthal Meat Science and Technology Centerin kautta Texas A&M -yliopistossa. Primaalit valitaan viljaruokituista nautaeläimistä, jotka on valmisteltu tyypillisissä rehutilan olosuhteissa ja joita ruokitaan Texas A&M University O.D. Butlerin eläintieteen opetus- ja tutkimuskeskus. Ennen jauhelihan interventioiden kunkin vaiheen aloittamista jokainen osallistuja saa etiketöimättömän laatikon, joka sisältää 25 pakastettua tyhjiöpakattua pihviä.

Osallistujia koulutetaan laajasti jauhelihapihvien valmistukseen ja kulutukseen. Rekisteröity ravitsemusterapeutti on yksittäinen konsultti, joka antaa tutkittaville ammattimaista tietoa ruoanlaittomenetelmistä ja ruokavalion kirjaamisesta. Tutkijat ennustavat, että olosuhteissa, joissa energian saanti pysyy vakiona, osallistujien kuluttaman rasvan prosenttiosuus kasvaa, kun taas hiilihydraattien energiaprosentti vähenee.

Ruokavalioohjeet ja ruokavaliotiedot. Kaikki osallistujat saavat Rekisteröityltä ravitsemusterapeutilta ohjeet jauhelihan valmistukseen ja kulutukseen, mukaan lukien reseptit; Rekisteröity ravitsemusterapeutti ottaa myös yhteyttä osallistujiin yllä olevilla opintokäynneillä osoitetulla tavalla. Pihvinkulutuksen lisäksi koehenkilöitä kehotetaan syömään säännöllistä ruokavaliotaan. Aiemmat tutkijoiden tutkimukset osoittivat, että jauhelihapihvien kulutusta noudatetaan voimakkaasti, eivätkä ne osoittaneet, että osallistujien tavanomaisessa ruokavaliossa ei tapahtunut muita muutoksia kuin hiilihydraateista saatavien kalorien prosenttiosuus.

Seulontavierailua varten osallistujien on vierailtava eläintieteen laitoksella saadakseen yksityiskohtaisen yleiskatsauksen tutkimuksesta, mukaan lukien tavoitteet ja odotetut tulokset, sekä kerättävä elintärkeät mittaukset ja verta kelpoisuuden määrittämiseksi.

Vierailulla 1 Tutkimushenkilöstö selittää Nutribase-ohjelmiston ja antaa yksityiskohtaiset ohjeet ruokavalion kirjaamiseen. Rekisteröity ravitsemusterapeutti antaa ohjeita ja ehdotuksia resepteistä ja korostaa, että on tärkeää syödä koekenttä määrätyin väliajoin. Kahden, 5 viikon mittaisen testijakson aikana Rekisteröity ravitsemusterapeutti tai PI ottaa yhteyttä osallistujiin viikoittain vastatakseen kaikkiin ruokavaliotietojen täyttämiseen tai naudanlihan valmistukseen liittyviin kysymyksiin.

Osallistujia pyydetään täyttämään 3 päivän ruokavaliopöytäkirja ruokavaliotoimenpiteitä edeltävän viikon aikana ja kunkin intervention viimeisen viikon aikana ravintoaineiden saannin määrittämiseksi ja noudattamisen edistämiseksi. NutriBase-ohjelmisto on suhteellisen helppokäyttöinen ja mahdollistaa tarkemman tiedon ruokavalion saannista. Päivittäinen proteiinin, hiilihydraattien ja rasvan saanti analysoidaan kaupallisella NutriBase-ohjelmistolla. Tutkijoiden aikaisemmissa tutkimuksissa käytetty ruokavalio-ohjelmisto antoi tietoa vähärasvaisesta, keskirasvaisesta ja runsasrasvaisesta lihan kulutuksesta, mutta ei antanut tutkijoille mahdollisuutta määrittää, mitkä lihalähteet korvattiin testijauhetulla naudanpihvillä; tavanomaisten lihalähteiden (esim. kala, sianliha tai siipikarja) korvaaminen testipihvillä dokumentoidaan tässä tutkimuksessa. Lisäksi ruokavalion vaihdot (lihat, leivät, hedelmät, vihannekset jne.) analysoidaan, jotta voidaan dokumentoida ennustettu hiilihydraattien saannin väheneminen testipihvien kulutuksen aikana.

Yleiset verinäytteet ja -analyysit. Verinäytteenottopäivinä koehenkilöitä pyydetään ilmoittautumaan laboratorioon yön yli (vähintään 10 tunnin) paaston jälkeen, joka on rajoitettu vain vedellä. Veri (10 ml) kerätään 5 minuutin istumalevon jälkeen laskimopunktion kautta antecubitaalisesta kuoppa-alueesta seerumierotinvacutainer-putkiin käyttäen tavallisia, steriilejä flebotomiamenetelmiä. Verinäytteet otetaan seulontakäynnin aikana sekä käynneillä 2, 3 ja 4. Jokaiselta osallistujalta otetaan yhteensä noin 40 ml verta noin 15 viikon aikana.

Keräyksen jälkeen veren annetaan hyytyä huoneenlämmössä 2 tuntia tai jäähdytetään 4 °C:seen seerumin ja plasman erottamista varten, ennen kuin se sentrifugoidaan jäähdytetyssä sentrifugissa 20 minuuttia (2 000 × g). Yksi seerumierotinvacutainer kuljetetaan samana päivänä kaupalliseen CLIA-sertifioituun laboratorioon kokonaiskolesterolin, HDL-C:n, LDL-C:n ja TAG:n määrittämiseksi käyttämällä tavallisia kliinisen kemian analyysejä. Seerumin ja plasman alikvootit lisävacutainersista siirretään erillisiin 2 ml:n pakastinpulloihin.

Lipoproteiinipartikkelien lukumäärän määritys. Lipoproteiinihiukkasten massa-ala käyrän alla määritetään jatkuvalla gradientilla, joka on muodostettu analyyttisellä ultrasentrifugoinnilla. Tämä menetelmä mahdollistaa erittäin matalatiheyksisen lipoproteiinin (VLDL), LDL:n, tiheän LDL-III:n, tiheän LDL-V:n, HDL:n, kelluvan HDL-2b:n ja jäännöslipoproteiinin (RLP) hiukkasten kokonaismäärän määrittämisen niiden erityisissä tiheyksissä. ). LDL-I:n ja LDL-II:n pitoisuudet voidaan laskea erotuksen perusteella.

Tilastolliset analyysit. Koska kaikkia koehenkilöitä kierretään molemmilla jauhelihainterventioilla, tiedot analysoidaan jaetun koealan suunnittelulla, jossa ruokavalio on koko koealana ja aika (tavallinen ruokavalio vs. testiruokavalio) jaettuna koealana. Teholaskelmat tehtiin tarvittavan näytteen koon arvioimiseksi aiempien tutkimustemme tietojen perusteella, joissa HDL-kolesteroli nousi 2,8 mg/dl 24 % rasvaisen naudan jauhelihan nauttimisen myötä verrattuna tavanomaiseen ruokavalioon. Analyyseissa käytettiin seuraavia oletuksia: tehoksi asetettiin 0,8 ja a:ksi 0,05. Arvioiden mukaan 16 näytekoko oli riittävä testaamaan hypoteesia, jonka mukaan runsasrasvainen jauheliha lisää HDL-kolesterolipitoisuuksia.