Wpływ unikalnej matrycy żywnościowej wołowiny na zdrowie człowieka

Zdrowi, niepalący mężczyźni zostaną poddani badaniu przesiewowemu pod kątem kwalifikowalności, a co najmniej 30 mężczyzn zostanie wybranych do badania w oparciu przede wszystkim o stężenie cholesterolu lipoprotein o małej gęstości (LDL-C) w osoczu, ale także o stężenie TAG w osoczu. Mężczyźni nie mogą stosować restrykcyjnych diet ani leków obniżających poziom cholesterolu, a także nie mogą mieć cholesterolu całkowitego powyżej 300 mg/dl lub poniżej 120 mg/dl. Uczestnicy zostaną poproszeni o niezmienianie swojego zwykłego poziomu aktywności fizycznej. TAG osocza nie powinien przekraczać 220 mg/dL. Na podstawie wcześniejszych badań przeprowadzonych w naszym laboratorium zostanie zastosowany dwuokresowy, losowy projekt krzyżowy. Każdy uczestnik przeprowadzi dwie 5-tygodniowe interwencje mielonej wołowiny w losowo przydzielonej kolejności z 4-tygodniowym okresem wymywania między okresami testowymi. Mężczyźni będą spożywać 5 kotletów z mielonej wołowiny tygodniowo przez 5 tygodni dla każdego rodzaju mielonej wołowiny (25 kotletów dla każdego rodzaju). Dwa zabiegi będą niskotłuszczowe (5% tłuszczu) i wysokotłuszczowe (25% tłuszczu) mielona wołowina. Uczestnicy zostaną przydzieleni do jednej z dwóch grup (n ≥ 15 na grupę), która zostanie zbilansowana pod względem stężeń LDL-C na wstępnym skriningu. Grupy będą blokowane ze względu na wiek i masę ciała.

Wizyta 1 dla osób wybranych do badania (bezpośrednio przed pierwszą interwencją dietetyczną) (ok. 1 godz.):

Zarejestrowany dietetyk dostarczy instrukcje dotyczące diety, przykładowe menu i instrukcje gotowania. Uczestnicy otrzymają instrukcje dotyczące wypełniania zapisów diety za pomocą oprogramowania NutriBase.

Uczestnicy otrzymają pierwszy zestaw pasztecików. Zanim zaczną jeść paszteciki, badani wypełniają 3-dniowy zapis diety w NutriBase (co robi się w domu). Podmiotom zostaną również przekazane instrukcje dotyczące harmonogramu spożycia pasztecików.

Badani uzupełnią 3-dniowy zapis diety w NutriBase w 5. tygodniu spożywania pasztecików.

Zarejestrowany dietetyk lub główny badacz będzie kontaktować się z uczestnikami badania (telefonicznie lub pocztą elektroniczną) raz w tygodniu, aby zapytać, czy uczestnicy mają jakieś pytania dotyczące badania lub systemu NutriBase, oraz upewnić się, że gotują i używają pasztecików zgodnie z instrukcją.

Po początkowej 5-tygodniowej interwencji następuje 4-tygodniowy okres wymywania, podczas którego badani nie będą mieli wizyt studyjnych i będą spożywać swoją zwykłą dietę. Badani zostaną poproszeni o kontynuowanie wypełniania 3-dniowego zapisu diety w NutriBase podczas ostatniego tygodnia okresu wypłukiwania.

Zarejestrowany dietetyk lub PI będzie kontaktować się z uczestnikami badania (telefonicznie lub pocztą elektroniczną) raz w tygodniu, aby zapytać, czy uczestnicy mają jakieś pytania dotyczące badania lub systemu NutriBase, oraz upewnić się, że uczestnicy gotują i używają pasztecików zgodnie z instrukcją.

Źródło mielonej wołowiny. Źródłem surowców do produkcji pasztecików o zawartości tłuszczu 5 i 25% będą boczki i talerze bydła karmionego paszami, przetwarzane przez Rosenthal Meat Science and Technology Center, Texas A&M University. Pierwotne zostaną wybrane spośród bydła karmionego zbożem, które zostało wykończone w typowych warunkach paszowych, karmione na Texas A&M University O.D. Butler Centrum Nauczania i Badań nad Zwierzętami. Przed rozpoczęciem każdej fazy interwencji mielonej wołowiny każdy uczestnik otrzyma nieoznakowane pudełko zawierające 25 zamrożonych, pakowanych próżniowo pasztecików.

Uczestnicy zostaną gruntownie przeszkoleni w zakresie przygotowywania i spożywania pasztecików z mielonej wołowiny. Dyplomowany Dietetyk jest indywidualnym konsultantem, który udzieli uczestnikom profesjonalnego wkładu w zakresie metod gotowania i prowadzenia dokumentacji żywieniowej. Badacze przewidują, że w warunkach, w których pobór energii pozostaje stały, procent energii z tłuszczu spożywanego przez uczestników wzrośnie, podczas gdy procent energii z węglowodanów spadnie.

Wytyczne dietetyczne i zapisy diet. Wszyscy uczestnicy otrzymają instrukcje od Dyplomowanego Dietetyka dotyczące przygotowania i spożycia mielonej wołowiny, w tym przepisy; Zarejestrowany Dietetyk skontaktuje się również z uczestnikami w sposób wskazany w powyższych wizytach studyjnych. Poza spożyciem pasztecików, badani zostaną poproszeni o spożywanie swojej zwykłej diety. Wcześniejsze badania badaczy wskazywały na silną zgodność spożywania pasztecików z mielonej wołowiny i nie wskazywały na żadne zmiany w zwyczajowej diecie uczestników poza zmniejszeniem procentu kalorii pochodzących z węglowodanów.

W przypadku wizyty przesiewowej uczestnicy będą musieli odwiedzić Departament Nauk o Zwierzętach w celu uzyskania szczegółowego przeglądu badań, w tym celów i przewidywanych wyników, oraz pobrania parametrów życiowych i krwi w celu określenia kwalifikowalności.

W przypadku wizyty 1 personel prowadzący badanie objaśni oprogramowanie Nutribase i poda szczegółowe instrukcje dotyczące zapisów diety. Zarejestrowany dietetyk udzieli instrukcji i sugestii dotyczących przepisów oraz podkreśli znaczenie spożywania podłoża testowego w określonych odstępach czasu. W trakcie dwóch, 5-tygodniowych okresów testowych Zarejestrowany Dietetyk lub PI będzie kontaktował się z uczestnikami w odstępach tygodniowych, aby odpowiedzieć na wszelkie pytania dotyczące wypełniania zapisów diety lub przygotowania wołowiny.

Uczestnicy zostaną poproszeni o wypełnienie 3-dniowego zapisu diety w tygodniu poprzedzającym interwencje dietetyczne oraz w ostatnim tygodniu każdej interwencji w celu ustalenia spożycia składników odżywczych i zachęcenia do przestrzegania zaleceń. Oprogramowanie NutriBase jest stosunkowo proste w użyciu i pozwala uzyskać dokładniejsze informacje na temat spożycia w diecie. Dzienne spożycie białka, węglowodanów i tłuszczu będzie analizowane przy użyciu komercyjnego oprogramowania NutriBase. Oprogramowanie dietetyczne zastosowane we wcześniejszych badaniach badaczy dostarczyło informacji na temat spożycia chudego, średniotłuszczowego i wysokotłuszczowego mięsa, ale nie pozwoliło badaczom określić, które źródła mięsa zostały zastąpione testowymi pasztetami z mielonej wołowiny; zastąpienie tradycyjnych źródeł mięsa (np. ryb, wieprzowiny lub drobiu) przez paszteciki testowe zostanie udokumentowane w bieżącym badaniu. Dodatkowo przeanalizowane zostaną zmiany dietetyczne (mięso, pieczywo, owoce, warzywa itp.) w celu udokumentowania przewidywanego zmniejszenia spożycia węglowodanów podczas spożywania pasztecików testowych.

Ogólne pobieranie krwi i analizy. W dniach pobierania krwi osoby badane zostaną poproszone o zgłoszenie się do laboratorium po całonocnym poście (co najmniej 10 godzin) ograniczonym wyłącznie do wody. Krew (10 ml) zostanie pobrana po 5 minutach odpoczynku w pozycji siedzącej przez nakłucie żyły z okolicy dołu łokciowego do probówek vacutainer z separatorem surowicy, stosując standardowe, sterylne procedury upuszczania krwi. Próbki krwi zostaną pobrane podczas wizyty przesiewowej oraz podczas wizyt 2, 3 i 4. Od każdego uczestnika zostanie pobrane łącznie około 40 ml krwi w ciągu około 15 tygodni.

Po pobraniu krew pozostawia się do skrzepnięcia w temperaturze pokojowej na 2 godziny lub schładza do temperatury 4°C w celu oddzielenia odpowiednio surowicy i osocza, a następnie odwirowuje w schłodzonej wirówce przez 20 minut (2000 × g). Jeden próżniowy separator surowicy zostanie przetransportowany tego samego dnia do komercyjnego laboratorium z certyfikatem Clinical Laboratory Improvement Poprawki (CLIA) do oznaczania całkowitego cholesterolu, HDL-C, LDL-C i TAG przy użyciu standardowych analiz chemii klinicznej. Porcje surowicy i osocza z dodatkowych pojemników próżniowych zostaną przeniesione do oddzielnych fiolek do zamrażania o pojemności 2 ml.

Oznaczanie liczby cząstek lipoprotein. Pole masy cząstek lipoprotein pod krzywą zostanie określone za pomocą ciągłego gradientu generowanego przez analityczne ultrawirowanie. Procedura ta pozwala na oznaczenie przy ich gęstościach właściwych całkowitej liczby cząstek lipoprotein o bardzo małej gęstości (VLDL), LDL, gęstych LDL-III, gęstych LDL-V, HDL, pływających HDL-2b i lipoprotein resztkowych (RLP ). Stężenia LDL-I plus LDL-II można obliczyć na podstawie różnicy.

Analizy statystyczne. Ponieważ wszyscy badani będą podlegać rotacji podczas obu interwencji z mieloną wołowiną, dane zostaną przeanalizowane za pomocą projektu podzielonego wykresu, z dietą jako całym wykresem i czasem (dieta zwyczajowa vs dieta testowa) jako podzielonym wykresem. Obliczenia mocy przeprowadzono w celu oszacowania wymaganej liczebności próby na podstawie danych z naszych poprzednich badań, w których poziom HDL-C wzrósł o 2,8 mg/dl po spożyciu 24% tłustej mielonej wołowiny w porównaniu ze zwykłą dietą. W analizach przyjęto następujące założenia: moc przyjęto na poziomie 0,8, a a na poziomie 0,05. Oszacowano, że wielkość próby 16 osób była wystarczająca do sprawdzenia hipotezy, że wysokotłuszczowa mielona wołowina zwiększy stężenie HDL-C.