Effetto dell'olio ozonizzato sulla guarigione dell'area palatale.

Disegno dello studio Si tratta di uno studio clinico prospettico longitudinale, centrato sul paziente, in doppio cieco (paziente ed esaminatore), randomizzato tramite lotteria, studio controllato con placebo. L'intenzione sarà quella di servire i pazienti presso le cliniche odontoiatriche dell'Istituto Superiore di Sanità di Nova Friburgo, tuttavia, a causa della pandemia, provvisoriamente, fino al ritorno delle chiamate, alcuni pazienti saranno curati in uno studio dentistico privato. I volontari della ricerca saranno assistiti, rispettando tutte le procedure di biosicurezza e riceveranno gratuitamente tutte le cure, oltre alla piastra in acrilico da utilizzare dopo l'intervento chirurgico, nonché tutti i materiali da utilizzare prima e dopo la procedura, nonché come i farmaci antidolorifici.

I partecipanti idonei ai criteri di inclusione saranno invitati a partecipare alla ricerca, volontariamente, dopo aver chiarito i dubbi sul progetto e firmeranno un modulo di consenso informato. Tutti i principi di questo studio saranno stabiliti in conformità con la Dichiarazione di Helsinki. Il protocollo di studio sarà analizzato e dovrà ricevere l'approvazione del comitato etico della ricerca dell'istituto sanitario di Nova Friburgo-RJ, Universidade Federal Fluminense.

Calcolo del campione Il calcolo del campione è stato eseguito considerando l'outcome primario. Considerando il test t per due campioni indipendenti relativi all'area di guarigione residua in millimetri quadratil nel gruppo dell'ozono (36,04 ± 9,66) rispetto al controllo (48,21 ± 13,2) a 14 giorni (80% di potenza; livello alfa di 0,05), un campione di Sono stati stimati 14 pazienti per gruppo. Il programma utilizzato per calcolare la dimensione del campione era BioEstat 5.3 (Mamirauá, Belém, PA, Brasile).

Gruppi clinici e procedure Gli innesti di tessuto gengivale libero epiteliale (EGL) verranno rimossi dal palato per essere collocati in un alveolo post-estrattivo al fine di ottenere la conservazione della cresta. Entrambe le procedure, l'estrazione e l'ottenimento dell'EGL, saranno eseguite nella stessa procedura chirurgica. Nella prima fase chirurgica, il dente verrà estratto utilizzando strumenti atraumatici. Nella seconda fase, l'EGL verrà rimosso dal palato, in modo standardizzato, utilizzando un bisturi circolare di 8 mm di diametro e 2 mm di spessore (Maximus Instrumental Odontológico®, Contagem, Brasile). L'EGL sarà regolato all'ingresso dell'alveolo e suturato con filo di nylon monofilamento non riassorbibile 5.0 (Ethicon ®, Johnsons & Johnsons do Brasil®, São José dos Campos, São Paulo, Brasile).

L'area donatrice sarà suturata con filo di polipropilene 4.0 non riassorbibile, considerando che questo filo è un filo monofilamento, per non accumulare biofilm batterico (Ethicon ®, Johnsons & Johnsons do Brasil ®, São José dos Campos, São Paulo, Brasile ). Dopo la sutura, il paziente riceverà una lastra di acetato di 1 mm di spessore che copre parte dell'area donatrice del palato, fornendo protezione alla ferita palatale contro i traumi meccanici. La sutura dalla regione palatale verrà rimossa a 7 giorni, mentre la sutura dall'area ricevente verrà rimossa a 14 giorni. Nel presente studio verrà valutata solo l'area donatrice.

I gruppi saranno così suddivisi:

• Gruppo EGL (controllo): dopo la rimozione dell'EGL, la ferita palatale verrà trattata con olio di girasole non ozonizzato (placebo), applicato una volta al giorno, per sette giorni.
• Gruppo EGL + ozono (test): dopo la rimozione dell'EGL, la ferita palatale verrà trattata con olio di girasole ozonizzato con un indice di perossido compreso tra 510 e 625 meq /kg (Oleozon ®, San Paolo, Brasile), applicato una volta al giorno per sette giorni .

Gli interventi chirurgici saranno eseguiti da un unico operatore, mentre le valutazioni cliniche saranno eseguite da un altro operatore, debitamente formato e calibrato.

Linee guida postoperatorie I farmaci postoperatori saranno i seguenti: Amoxicillina 500 mg (1 capsula 3 volte al giorno, per 7 giorni) e Dipirone sodico 500 mg (1 compressa, ogni 4 ore, per 3 giorni solo in caso di dolore). Dipyrone sarà consigliato solo in caso di dolore e il paziente dovrà annotare su un apposito modulo se vi fosse necessità di consumo e la quantità ingerita ogni giorno.

Il paziente verrà istruito ad applicare l'olio fornito con l'ausilio di un batuffolo di cotone, una volta al giorno di notte, dopo essersi lavati i denti, mettendo subito a dormire la lastra in acrilico. È importante sottolineare l'uso della piastra in modo che il farmaco abbia l'effetto desiderato. Questa carta verrà utilizzata per 7 giorni. Importante non usare alcun collutorio, solo spazzolino e filo interdentale convenzionali.

Valutazione clinica La valutazione clinica e il processo di guarigione saranno valutati come segue: a) area cicatriziale residua, b) epitelizzazione (E) ec) edema tissutale. Le valutazioni verranno eseguite al basale (dopo la rimozione dell'EGL) ea 3, 7 e 14 giorni.

1. Area cicatriziale rimanente (ARC): verranno scattate fotografie standardizzate (luminosità, distanza e angolo di 45º rispetto al palato), con una sonda parodontale PCP-UNC da 15 millimetri (Hu-Friedy®, Chicago, Illinois, USA) posizionata alla standardizzazione in millimetri dell'area da misurare nel software (Immagine J-NIH, Bethesda, USA). L'area della ferita sarà misurata in millimetri quadrati a 3, 7 e 14 giorni dopo la rimozione dell'EGL.
2. Epitelizzazione (E): l'area della ferita verrà colorata con una soluzione di evidenziazione (Replack® Dentisply, Pennsylvania, USA) e misurata ai rispettivi intervalli, e l'area epitelizzata verrà calcolata in percentuale. Punteggi di fibrina, tessuto di granulazione e tessuto cicatriziale: il punteggio utilizzato è stato adattato da altri studi, considerando: a) Punteggio della presenza di un coagulo di fibrina in: 0- presenza dell'intera estensione della ferita con coagulo di fibrina; 1- presenza di ≥ 75% di coagulo di fibrina; 2- presenza di
3. Edema tissutale (TE): l'edema sarà valutato a 3 e 7 giorni postoperatori, essendo considerato dicotomicamente, come assente (0) o presente.

Calibrazione La calibrazione verrà eseguita su cinque pazienti, che non saranno inclusi nella ricerca. Il valutatore (PJ) sarà addestrato e calibrato per misurazioni ARC (al basale e 7 giorni dopo l'intervento chirurgico) e le misurazioni verranno eseguite in due momenti diversi, a distanza di una settimana. La correlazione intraclasse sarà valutata dal programma BioEstat 5.0 (Mamiraua, Pará, Brasile). La significatività statistica sarà fissata al 5%.

valutazione immunologica Verrà eseguita la misurazione dei livelli di VEGF (fattore di crescita endoteliale vascolare; pg/ml) e TGF-beta (fattore di crescita trasformante beta; pg/ml) nella regione donatrice. Per questo verrà utilizzata una punta di carta assorbente, che verrà posizionata nella zona donatrice del palato per 30 secondi, senza pressione. Il VEGF, originariamente noto come fattore di permeabilità vascolare, è una proteina segnale prodotta dalle cellule che stimola la formazione dei vasi sanguigni. TGF-beta è una proteina che controlla la proliferazione cellulare, la differenziazione e altre funzioni nella maggior parte delle cellule. La malondialdeide (MDA) e il 4-idrossinonenale (4-HNE) saranno valutati per lo stress ossidativo. I campioni saranno raccolti e posti in eppendorf sterili, contenenti soluzione salina tamponata con fosfato con Tween 20 allo 0,05%, conservati in un congelatore a -20°C. La valutazione immunologica sarà eseguita a 3 e 7 giorni.

Qualità della vita

Lo strumento per valutare la qualità della vita correlata alla salute orale degli individui sarà il questionario denominato Oral Health Impact Profile (OHIP-14). Questo questionario verrà applicato solo il 7° giorno. Le sette dimensioni dell'impatto orale:

• Limitazione funzionale (voci 1 e 2),
• Dolore (item 3 e 4),
• Disagio psicologico (articoli 5 e 6),
• Fisica dell'incapacità (articoli 7 e 8),
• Inabilità psicologica (articoli 9 e 10),
• Disabilità sociale (articoli 11 e 12)
• Svantaggio (articoli 13 e 14).

Ogni dimensione riflette l'impatto della condizione orale generale su alcuni aspetti, vale a dire:

1. La dimensione Limitazione funzionale include domande riguardanti difficoltà di linguaggio e ridotta sensibilità gustativa;
2. Nella dimensione Dolore vengono poste domande sulla sensazione di dolore vissuta, così come sul disagio nell'atto di mangiare;
3. Per quanto riguarda la dimensione del disagio psicologico, vengono esplorate la preoccupazione e lo stress che la condizione orale può causare;
4. La dimensione Disabilità Fisica fa riferimento alla possibile perdita di cibo e alla necessità di interrompere i pasti;
5. Nella dimensione Disabilità Psicologica vengono poste domande sulla difficoltà a rilassarsi e sul sentimento di imbarazzo legato alla condizione orale;
6. Per quanto riguarda la dimensione della Disabilità Sociale, questa include domande sull'impatto della condizione orale sulle relazioni con gli altri e sulla difficoltà nello svolgimento delle attività quotidiane;
7. E la dimensione Svantaggio, esplora la percezione della persona dell'impatto della condizione orale sulla propria vita e sull'incapacità di svolgere le proprie attività.

L'OHIP-14 è composto da 14 domande, che si riferiscono a problemi di salute orale e generale che le persone hanno sperimentato negli ultimi dodici mesi. Per ogni domanda sono disponibili cinque opzioni di risposta (mai=0, quasi mai=1, occasionalmente=2, abbastanza spesso=3 e spesso=4). Questo valore viene quindi moltiplicato per il peso di ogni domanda (item 1: peso = .51; punto 2: peso = .49; punto 3: peso = .34; punto 4: peso = .66; punto 5: peso = . 45; punto 6: peso = .55; punto 7: peso = .52; punto 8: peso = .48; punto 9: peso = .60; articolo 10: peso = .40; punto 11: peso = .62; articolo 12: peso = .38; articolo 13: peso = .59; punto 14: peso = .41). Dopo aver sommato i punteggi di tutte le domande si ottiene il risultato finale, che può variare da 0 a 28 punti. Più alto è il punteggio, maggiore è l'impatto dei problemi sulla qualità della vita.

Analisi del disagio postoperatorio I pazienti sono stati istruiti a valutare il disagio postoperatorio su una scala analogica visiva (VAS) di 10 mm, che segnala gli estremi di "nessun dolore" e "dolore estremo". La scala VAS deve essere completata dal paziente, giornalmente, fino al completamento di 7 giorni. Dovrebbe essere registrato anche il numero di analgesici ingeriti durante una settimana.

Analisi statistica I dati saranno inizialmente testati per la normalità mediante il test di Shapiro-Wilk. Se i dati sono parametrici, è possibile applicare l'Analisi della varianza (ANOVA), ma se non sono parametrici, è possibile applicare il test di Kruskal - Wallis, seguito dal test di Dunn , per il confronto tra i gruppi. Il livello di significatività sarà fissato al 5% dal programma BioEstat 5.0® (Mamiraua, Pará, Brasile).