Efecto del Aceite Ozonizado en la Cicatrización del Área Palatal.

Diseño del estudio Se trata de un ensayo clínico longitudinal prospectivo, centrado en el paciente, doble ciego (paciente y examinador), aleatorizado por sorteo y controlado con placebo. La intención será atender a los pacientes en las clínicas odontológicas del Instituto de Salud de Nova Friburgo, sin embargo, debido a la pandemia, de forma provisional, hasta que vuelvan las llamadas, algunos pacientes serán atendidos en un consultorio odontológico privado. Los voluntarios de investigación serán atendidos cumpliendo con todos los procedimientos de bioseguridad y recibirán todos los cuidados de forma gratuita, además de la placa de acrílico que se utilizará después de la cirugía, así como todos los materiales que se utilizarán antes y después del procedimiento, así como como medicamentos para el control del dolor.

Los participantes elegibles para los criterios de inclusión serán invitados a participar en la investigación, de forma voluntaria, previa aclaración de dudas sobre el proyecto y firmarán un formulario de consentimiento informado. Todos los principios de este estudio se establecerán de acuerdo con la Declaración de Helsinki. El protocolo de estudio será analizado y deberá recibir la aprobación del comité de ética en investigación del instituto de salud de Nova Friburgo-RJ, Universidade Federal Fluminense.

Cálculo de la muestra El cálculo de la muestra se realizó considerando el desenlace primario. Considerando la prueba t para dos muestras independientes con respecto al área de cicatrización residual en milímetros cuadradosl en el grupo ozono (36,04 ± 9,66) vs control (48,21 ± 13,2) a los 14 días (80% de potencia; nivel alfa de 0,05), una muestra de Se estimó 14 pacientes por grupo. El programa utilizado para calcular el tamaño de la muestra fue BioEstat 5.3 (Mamirauá, Belém, PA, Brasil).

Grupos clínicos y procedimientos Los injertos de tejido gingival libre epitelial (EGL, por sus siglas en inglés) se extraerán del paladar para colocarlos en un alveolo posterior a la extracción a fin de lograr la preservación de la cresta. Ambos procedimientos, la extracción y la obtención del EGL, se realizarán en el mismo acto quirúrgico. En el primer paso quirúrgico, se extraerá el diente mediante instrumentos atraumáticos. En el segundo paso, el EGL será removido del paladar, de forma estandarizada, utilizando un bisturí circular de 8 mm de diámetro y 2 mm de espesor (Maximus Instrumental Odontológico®, Contagem, Brasil). El EGL se ajustará a la entrada del alvéolo y se suturará con hilo de nylon monofilamento no reabsorbible 5.0 (Ethicon ®, Johnsons & Johnsons do Brasil®, São José dos Campos, São Paulo, Brasil).

La zona donante se suturará con hilo de polipropileno 4.0 no reabsorbible, considerando que este hilo es monofilamento, para no acumular biofilm bacteriano (Ethicon ®, Johnsons & Johnsons do Brasil ®, São José dos Campos, São Paulo, Brasil ) . Luego de la sutura, el paciente recibirá una placa de acetato de 1 mm de espesor que cubre parte del área donante del paladar, brindando protección a la herida palatina contra traumas mecánicos. La sutura de la región palatina se retirará a los 7 días, mientras que la sutura de la zona receptora se retirará a los 14 días. Solo el área donante será evaluada en el presente estudio.

Los grupos se dividirán de la siguiente manera:

• Grupo EGL (control): tras la retirada del EGL, se tratará la herida palatina con aceite de girasol no ozonizado (placebo), aplicado una vez al día, durante siete días.
• Grupo EGL + Ozono (prueba): después de la eliminación de EGL, la herida del paladar se tratará con aceite de girasol ozonizado con un índice de peróxido entre 510 - 625 meq/kg (Oleozon ®, São Paulo, Brasil), aplicado una vez al día durante siete días .

Las cirugías serán realizadas por un solo operador, mientras que las evaluaciones clínicas serán realizadas por otro operador, debidamente capacitado y calibrado.

Pautas postoperatorias La medicación postoperatoria será la siguiente: Amoxicilina 500 mg (1 cápsula 3 veces al día, durante 7 días) y Dipirona sódica 500 mg (1 tableta, cada 4 horas, durante 3 días sólo en caso de dolor). La dipirona sólo se recomendará en caso de dolor y el paciente deberá anotar en un formulario especialmente preparado si hubo necesidad de consumo y la cantidad ingerida cada día.

Se indicará al paciente que se aplique el aceite provisto con la ayuda de un bastoncillo de algodón, una vez al día por la noche, después de cepillarse los dientes, poniendo la placa de acrílico inmediatamente después de dormir. Es importante enfatizar el uso de la placa para que la droga tenga el efecto deseado. Esta tarjeta se utilizará durante 7 días. Importante no utilizar ningún enjuague bucal, únicamente cepillado convencional y uso de hilo dental.

Evaluación clínica La evaluación clínica y el proceso de curación se evaluarán de la siguiente manera: a) área de cicatriz remanente, b) Epitelización (E) yc) Edema del tejido. Las evaluaciones se realizarán al inicio (después de la eliminación de EGL) ya los 3, 7 y 14 días.

1. Área de cicatriz restante (ARC): se tomarán fotografías estandarizadas (brillo, distancia y ángulo de 45º en relación al paladar), colocándose una sonda periodontal PCP-UNC de 15 milímetros (Hu-Friedy®, Chicago, Illinois, EE. UU.) a la estandarización en milímetros del área a medir en software (Imagen J-NIH, Bethesda, USA). El área de la herida se medirá en milímetros cuadrados a los 3, 7 y 14 días después de la extracción del EGL.
2. Epitelización (E): se teñirá el área de la herida con una solución evidenciadora (Replack ® Dentisply, Pensilvania, EE. UU.) y se medirá en los intervalos respectivos, y se calculará en porcentaje el área epitelizada. Puntajes de fibrina, tejido de granulación y tejido cicatricial: El puntaje utilizado fue adaptado de otro estudio, considerando: a) Puntaje de la presencia de un coágulo de fibrina en: 0- presencia de toda la extensión de la herida con coágulo de fibrina; 1- presencia de ≥ 75% de coágulo de fibrina; 2- presencia de
3. Edema tisular (TE): el edema se evaluará a los 3 y 7 días postoperatorios, considerándose dicotómicamente, como ausente (0) o presente.

Calibración La calibración se realizará en cinco pacientes, que no serán incluidos en la investigación. El evaluador (PJ) estará capacitado y calibrado para las mediciones de ARC (al inicio y 7 días después de la cirugía) y las mediciones se realizarán en dos momentos diferentes, con una semana de diferencia. La correlación intraclase será evaluada por el programa BioEstat 5.0 (Mamiraua, Pará, Brasil). La significación estadística se fijará en el 5%.

evaluación inmunológica Se realizará la medición de los niveles de VEGF (factor de crecimiento endotelial vascular; pg/ml) y TGF-beta (factor de crecimiento transformante beta; pg/ml) en la región donante. Para ello se utilizará una punta de papel absorbente, que se posicionará en la zona donante del paladar durante 30 segundos, sin presión. VEGF, originalmente conocido como factor de permeabilidad vascular, es una proteína señal producida por las células que estimula la formación de vasos sanguíneos. TGF-beta es una proteína que controla la proliferación celular, la diferenciación y otras funciones en la mayoría de las células. El malondialdehído (MDA) y el 4-hidroxinonenal (4-HNE) se evaluarán para el estrés oxidativo. Las muestras serán recolectadas y colocadas en eppendorfs estériles, que contengan solución salina tamponada con fosfato con Tween 20 al 0.05%, siendo almacenadas en un congelador a -20 o C. La evaluación inmunológica se realizará a los 3 y 7 días.

Calidad de vida

El instrumento para evaluar la Calidad de Vida Relacionada con la Salud Bucal de los individuos será el cuestionario denominado Perfil de Impacto en la Salud Bucal (OHIP-14). Este cuestionario sólo se aplicará el día 7. Las siete dimensiones del impacto oral:

• Limitación Funcional (ítems 1 y 2),
• Dolor (ítems 3 y 4),
• Malestar Psicológico (ítems 5 y 6),
• Física de incapacidad (ítems 7 y 8),
• Incapacidad Psicológica (ítems 9 y 10),
• Discapacidad Social (ítems 11 y 12)
• Desventaja (ítems 13 y 14).

Cada dimensión refleja el impacto de la condición oral general en ciertos aspectos, a saber:

1. La dimensión Limitación Funcional incluye preguntas sobre dificultades del habla y sensibilidad gustativa reducida;
2. En la dimensión Dolor se interroga sobre la sensación de dolor experimentada, así como la incomodidad en el acto de comer;
3. En cuanto a la dimensión Malestar Psicológico, se explora la preocupación y el estrés que puede ocasionar la condición bucal;
4. La dimensión Discapacidad Física se refiere a la posible pérdida de alimentos y la necesidad de interrumpir las comidas;
5. En la dimensión Discapacidad Psicológica, se cuestiona la dificultad para relajarse y el sentimiento de vergüenza relacionado con la condición bucal;
6. En cuanto a la dimensión Discapacidad Social, esta incluye preguntas sobre el impacto de la condición oral en las relaciones con los demás y en la dificultad para realizar las actividades diarias;
7. Y la dimensión Desventaja, explora la percepción de la persona sobre el impacto de la condición bucal en su vida y en la incapacidad para realizar sus actividades.

El OHIP-14 consta de 14 preguntas, que hacen referencia a los problemas de salud bucal y general que han experimentado las personas en los últimos doce meses. Para cada pregunta hay cinco opciones de respuesta (nunca = 0, casi nunca = 1, ocasionalmente = 2, muy a menudo = 3 y a menudo = 4). Luego, este valor se multiplica por el peso de cada pregunta (ítem 1: peso = .51; ítem 2: peso = .49; ítem 3: peso = .34; ítem 4: peso = .66; elemento 5: peso = . 45; ítem 6: peso = .55; ítem 7: peso = .52; ítem 8: peso = .48; ítem 9: peso = .60; ítem 10: peso = .40; ítem 11: peso = .62; ítem 12: peso = .38; ítem 13: peso = .59; ítem 14: peso = .41). Tras sumar las puntuaciones de todas las preguntas, se obtiene el resultado final, que puede variar entre 0 y 28 puntos. Cuanto mayor sea la puntuación, mayor será el impacto de los problemas en la calidad de vida.

Análisis del malestar posoperatorio Se instruyó a los pacientes para que puntuaran el malestar posoperatorio en una escala analógica visual (EVA) de 10 mm, que señala los extremos de "sin dolor" y "dolor extremo". La escala EVA debe ser completada por el paciente, diariamente, hasta completar 7 días. También se debe registrar el número de analgésicos ingeridos durante una semana.

Análisis estadístico La normalidad de los datos se comprobará inicialmente mediante la prueba de Shapiro-Wilk. Si los datos son paramétricos, se puede aplicar el Análisis de Varianza (ANOVA), pero si no son paramétricos, se puede aplicar la prueba de Kruskal - Wallis, seguida de la prueba de Dunn, para la comparación entre grupos. El nivel de significancia será fijado en 5% por el programa BioEstat 5.0® (Mamiraua, Pará, Brasil).