卵巣組織の保存と化学放射線療法

現時点では、卵巣組織の凍結は実験的であると考えられているため、妊娠を開始するための組織の解凍と将来の使用は、研究プログラムの一環として実行される必要があります。 患者の許可を得て、彼女の卵巣組織の一部は彼女自身の使用のために凍結され、一部は研究プールに寄付されます。

この研究には毎年 20 名の被験者が参加します。

この研究への参加は、患者の卵巣組織がすべて使用されるまで、または患者が研究からの脱退を決定するまで、あるいは生涯続く。 卵巣組織の凍結は研究目的でのみ行うことができます。 妊娠を開始するための組織の解凍と将来の使用は、研究プログラムの一環として行う必要があります。 18歳以降、患者は妊娠を目的として、将来自分の組織をどのように、どの施設で使用したいかを決定します。 来院回数は手術内容によって決まります。 研究者は、患者が 18 歳になるまで、組織を使用するか、研究から脱落するか（いずれか早い方）まで、電話、電子メール、郵便で患者に連絡し、患者の医学的および生殖能力の状態を長期にわたって追跡し、以下について質問します。彼女の凍結組織の将来の使用と治療の結果の可能性について。 登録時の患者の年齢に応じて、追跡調査は最長30年間続く場合があります。

目的 主な目的: 外科的卵巣保存 (卵巣組織外植後の凍結および自家移植) 後の月経の再開/開始を評価すること。

二次目的: さまざまなホルモンの治療前後の産生を評価すること。すなわち、抗ミュラー管ホルモン (AMH)、インスリン様成長因子-1 (IGF-1)、インヒビン B、卵胞刺激ホルモン (FSH)、血清および組織学的測定による黄体形成ホルモン (LH) およびエストラジオール。

第 3 の目的: 長期的な性的発達、生殖能力、および外科的自家移植による卵巣保存の寿命を評価すること。

理論的根拠 アルキル化剤による化学療法および/または全身放射線照射は、原発性卵巣機能不全 (POI) のため、子宮、卵巣、乳房の正常な思春期発育を妨げます。 卵巣組織の外植片および自家移植は、卵巣機能不全を予防し、思春期および生殖能力を通じて正常な性的発達を可能にします。

研究デザイン 前向きコホート研究。

研究手順 被験者の募集とスクリーニング - 被験者は、セント・ジュード小児研究病院 (SJCRH) およびメソジスト・ル・ボヌールの医師から、ローラ・デッティ博士が主催する生殖医療クリニックへの紹介によって募集されます。 患者はセント・ジュード小児研究病院（SJCRH）およびメソジスト・ル・ボヌール治験審査委員会に従ってインフォームド・コンセントのプロセスを受けることになります。

スクリーニング訪問 - 完全な病歴と身体検査。バイタルサイン、身長、体重。 心理療法の影響について相談します。

臨床検査 - エストラジオール、卵胞刺激ホルモン (FSH)、黄体形成ホルモン (LH)、抗ミュラー管ホルモン (AMH)、インヒビン B の検査結果は、患者の臨床カルテから取得されます。 さらに、心電図 (ECG) (12 誘導)。骨年齢スキャン（思春期前の場合）、骨盤超音波検査（患者の年齢に応じて経腹腔または経膣）が患者の臨床カルテから取得されます。 手術前に骨盤超音波検査を受けていない場合は、患者が卵巣組織採取の手術を受ける前に、麻酔下で手術が行われます。

外科的処置 - 片側卵巣摘出術は、上記の化学放射線治療を受ける前に腹腔鏡検査によって行われます。 その後の卵巣皮質の自家移植は、患者が医師によって治癒したと宣言された後、腹腔鏡検査によって行われます。

腹腔鏡手術 - 全身麻酔が導入されると、患者の腹部に 3 ～ 4 の 0.5 cm の皮膚切開が行われます (臍帯に 1 か所、側面切開が 2 か所、場合によっては 4 か所の恥骨上切開)。 使い捨てのブレード付きトロカールが腹腔に挿入されます。 卵巣が特定され、漏斗骨盤靱帯および子宮卵巣靱帯の後腹膜クランプ/切開によって片側卵巣切除術が実行されます。

正確な止血を保証するために双極電極が使用され、必要に応じて洗浄が行われます。 腹部からトロカールを回収したら、皮膚切開部を 4-0 ビクリル縫合糸で再縫合します。

2番目の腹腔鏡手術は、Silberらによって記載された技術を使用して、7-0 Prolene（Ethicon、ジョンソン・エンド・ジョンソン、米国）を使用して解凍した皮質断片をレシピエント卵巣に縫合することにより、自家卵巣組織移植を実行するために行われます。 (Silber et al., 2005; Silber and Gosden, 2007) 移植のための開腹術中に適用されます。

1 回目の自家移植後に移植組織の機能が使い果たされると、クライオバンク保管庫に利用可能な組織がなくなるまで、残りの凍結保存組織を移植するために他の腹腔鏡手術が長年にわたって必要になる可能性があります。

凍結手順 - ガラス化のプロセスは、サンプルの収集から 120 分以内に手術室または研究室で開始され、テネシー大学生殖医療センターの研究室で完了します。 組織は、個別に保存/解凍するために多数のバイアルに小分けされます。 これにより、必要に応じて、複数の手順にわたる自家移植のための選択的な解凍が可能になります。

発生学の実験室手順 - 患者のために保管されている卵巣組織は、自家移植に使用されます。 しかし、発生学研究室で行われている他の技術も近い将来患者に利用可能になる可能性があり、再感染のリスクが高い血液由来のがん（白血病など）患者の妊孕性温存のための最良の選択肢となる可能性がある。組織移植による癌細胞の播種率は高い。

フォローアップ評価 - 研究治療には、術後の訪問と、患者の初期疾患に対する計画的なフォローアップ訪問が含まれ、その間に完全な身体検査と心理的評価が実施され、卵胞刺激ホルモンの臨床検査が行われます。 (FSH)、黄体形成ホルモン (LH)、抗ミュラー管ホルモン (AMH)、およびインヒビン B。

訪問は、外植から1か月後、組織の自家移植までおよびその後は6～12か月ごとに計画されます。

患者の計画された追跡調査の一環として、臨床検査、心電図 (ECG) (12 誘導)、骨年齢、骨盤超音波検査が毎年繰り返される場合があります。 骨年齢の評価は、骨年齢が 18 歳に達すると終了します。

思春期前後に卵巣機能不全を発症する予定の患者は、当院のプロトコールに従ってエストロゲン/プロゲステロン療法を受けます。

追跡調査は、患者が研究に登録され続けるか、40歳に達するか、閉経してさらなる移植用の組織がなくなるか、あるいは希望しないまで継続される。