Conservazione del tessuto ovarico e chemio-radioterapia

Al momento, il congelamento del tessuto ovarico è considerato sperimentale e quindi lo scongelamento e l'uso futuro del tessuto per iniziare una gravidanza devono essere eseguiti come parte di un programma di ricerca. Con il permesso della paziente, una parte del suo tessuto ovarico sarà congelata per uso personale e una parte sarà donata a un pool di ricerca.

A questo studio parteciperanno venti soggetti/anno.

La partecipazione a questo studio durerà fino a quando il tessuto ovarico della paziente non sarà completamente utilizzato, o la paziente deciderà di abbandonare lo studio, o per il resto della sua vita. Il congelamento del tessuto ovarico può essere effettuato solo per la ricerca. Lo scongelamento e l'uso futuro del tessuto per iniziare una gravidanza devono essere effettuati nell'ambito di un programma di ricerca. Dopo i 18 anni, la paziente deciderà come e presso quale istituto desidera utilizzare in futuro il proprio tessuto, ai fini della gravidanza. Il numero di visite sarà deciso dalla procedura chirurgica eseguita. Gli investigatori contatteranno la paziente per telefono, e-mail o posta fino a quando non avrà compiuto 18 anni, utilizzato il suo tessuto o abbandonato lo studio (a seconda di quale evento si verifichi prima) per seguire lo stato medico e di fertilità della paziente nel tempo e per porre domande su qualsiasi uso futuro del suo tessuto congelato e i possibili risultati del trattamento. A seconda dell'età del paziente al momento dell'arruolamento, il follow-up potrebbe durare fino a 30 anni.

SCOPO Obiettivo primario: valutare la ripresa/l'inizio delle mestruazioni dopo la conservazione chirurgica dell'ovaio (espianto di tessuto ovarico seguito da congelamento e trapianto autologo).

Obiettivo secondario: valutare la produzione pre e post-trattamento di vari ormoni, vale a dire l'ormone antimulleriano (AMH), il fattore di crescita insulino-simile-1 (IGF-1), l'inibina-B, l'ormone follicolo-stimolante (FSH), ormone luteinizzante (LH) ed estradiolo, mediante misurazioni sieriche e istologiche.

Obiettivo terziario: valutare lo sviluppo sessuale a lungo termine, la competenza sulla fertilità e la durata della conservazione ovarica tramite autotrapianto chirurgico.

RAZIONALE Il trattamento chemioterapico con agenti alchilanti e/o l'irradiazione totale del corpo impedirà il normale sviluppo puberale dell'utero, delle ovaie e del seno a causa dell'insufficienza ovarica primaria (POI). L'espianto e il trapianto autologo di tessuto ovarico impediranno l'insufficienza ovarica e consentiranno il normale sviluppo sessuale attraverso la pubertà e la competenza della fertilità.

DISEGNO DELLA RICERCA Studio prospettico di coorte.

PROCEDURE DI STUDIO Reclutamento e screening dei soggetti - I soggetti saranno reclutati su segnalazione del St. Jude Children's Research Hospital (SJCRH) e dei medici Methodist-Le Bonheur alle cliniche di medicina della riproduzione tenute dalla dott.ssa Laura Detti. I pazienti saranno sottoposti a un processo di consenso informato in conformità con St. Jude Children's Research Hospital (SJCRH) e Methodist-Le Bonheur Institutional Review Boards.

Visita di screening- Storia medica completa ed esame fisico; segni vitali, altezza e peso. Consulenza psicologica sull'impatto della terapia.

Test di laboratorio - I risultati di laboratorio per estradiolo, ormone follicolo-stimolante (FSH), ormone luteinizzante (LH), ormone antimulleriano (AMH), inibina B, saranno ottenuti dalle cartelle cliniche dei pazienti. Inoltre, Elettrocardiogramma (ECG) (12 derivazioni); La scansione dell'età ossea (se pre-puberale), l'ecografia pelvica (transaddominale o transvaginale, a seconda dell'età del paziente) saranno ottenute dalle cartelle cliniche dei pazienti. Se non è stata ottenuta un'ecografia pelvica prima dell'intervento chirurgico, la procedura verrà eseguita in anestesia prima che la paziente venga sottoposta a intervento chirurgico per il prelievo di tessuto ovarico).

Procedure chirurgiche - L'ooforectomia unilaterale verrà eseguita mediante laparoscopia prima di sottoporsi al trattamento chemio-radioterapico come sopra specificato. Il successivo autotrapianto di corteccia ovarica verrà eseguito mediante laparoscopia dopo che i pazienti saranno stati dichiarati guariti dai loro medici.

Procedure laparoscopiche - Dopo l'induzione dell'anestesia generale, l'attenzione sarà rivolta all'addome del paziente dove verranno eseguite 3-4 incisioni cutanee di 0,5 cm (una nella piega ombelicale e 2 incisioni laterali; possibilmente, una 4a incisione sovrapubica). I trocar monouso a lama verranno inseriti nella cavità addominale. Le ovaie saranno identificate e verrà eseguita una ovariectomia unilaterale mediante clampaggio/dissezione retroperitoneale dei legamenti infundibulo-pelvico ed utero-ovarico.

Verrà utilizzato un elettrodo bipolare per assicurare un'emostasi accurata e l'irrigazione verrà eseguita secondo necessità. Dopo il recupero dei trocar dall'addome, le incisioni cutanee saranno riavvicinate con punti di sutura in vycril 4-0.

La seconda procedura laparoscopica sarà eseguita per eseguire il trapianto autologo di tessuto ovarico suturando i frammenti di corteccia scongelati all'ovaio ricevente utilizzando 7-0 Prolene (Ethicon, Johnson and Johnson, USA), utilizzando la tecnica descritta da Silber et al. (Silber et al., 2005; Silber e Gosden, 2007) applicato durante la laparotomia per il trapianto.

Poiché il tessuto trapiantato esaurisce la sua funzione dopo il 1° trapianto autologo, nel corso degli anni potrebbero rendersi necessarie altre procedure laparoscopiche per trapiantare il resto del tessuto crioconservato fino a quando non sarà più disponibile tessuto nella criobanca.

Procedura di congelamento - Il processo di vitrificazione verrà avviato in sala operatoria o in laboratorio entro 120 minuti dalla raccolta del campione e sarà completato nel laboratorio dell'Università del Tennessee Center for Reproductive Medicine. Il tessuto sarà suddiviso in numerose fiale per la conservazione/scongelamento individuale. Ciò consentirà lo scongelamento selettivo per l'autotrapianto su più procedure, se necessario.

Procedure di laboratorio di embriologia: il tessuto ovarico conservato per le pazienti verrà utilizzato per il trapianto autologo. Tuttavia, altre tecniche che vengono eseguite nel laboratorio di embriologia potrebbero essere disponibili per i pazienti nel prossimo futuro e potrebbero rappresentare la migliore opzione per la conservazione della fertilità nei pazienti con tumori a trasmissione ematica (es: leucemia), in cui il rischio di recidiva la semina di cellule tumorali con trapianto di tessuto è alta.

Valutazione di follow-up: il trattamento in studio includerà una visita post-operatoria e successive visite di follow-up programmate per la malattia iniziale dei pazienti durante le quali verranno condotti un esame fisico completo e una valutazione psicologica e saranno ottenuti test di laboratorio per l'ormone follicolo-stimolante (FSH), ormone luteinizzante (LH), ormone antimulleriano (AMH) e inibina B.

Le visite saranno programmate un mese dopo l'espianto e ogni 6-12 mesi fino all'autotrapianto di tessuto e successivamente.

Test di laboratorio, elettrocardiogramma (ECG) (12 derivazioni), età ossea, ecografia pelvica possono essere ripetuti annualmente, come parte dei follow-up programmati del paziente. La valutazione dell'età ossea si interrompe quando viene raggiunta un'età ossea di 18 anni.

Le pazienti che svilupperanno insufficienza ovarica prima o dopo la pubertà saranno sottoposte a terapia con estrogeni/progesterone secondo i nostri protocolli istituzionali.

Il follow-up continuerà fino a quando la paziente rimane arruolata nello studio o fino a quando non raggiunge i 40 anni di età, oppure va in menopausa e non ha, o non desidera, ulteriore tessuto per il trapianto.