미생물 성분과 풀 꽃가루를 이용한 인간 비강 챌린지 모델 개발

연구 설계 및 방법론

이 연구는 피험자에게 투여되는 다양한 비강 스프레이 문제가 있는 3개 부분을 포함합니다.

1. 특정 환자에서 다음 중 하나를 포함하는 박테리아 또는 바이러스 성분;

   1. MPLA(모노포스포릴 지질 A)는 세균성 지질다당류와 유사합니다.
   2. PolyIC(폴리이노신산 및 시티딜산): 바이러스 성분
   3. PolyICLC(polyLlysine으로 안정화된 polyIC): 바이러스 성분
   4. Resiquimod: 바이러스 모방체
2. 투베르쿨린: 결핵을 일으키는 박테리아인 Mycobacterium bovis의 부분적으로 정제된 단백질 유도체(PPD).
3. 알레르겐: 비강 스프레이 챌린지 에이전트는 Timothy 잔디 꽃가루입니다.

신병 모집

목표는 총 174 과목을 모집하는 것입니다. 대상자는 신문 광고, 캠퍼스 포스터, GP 서비스, St. Mary's 병원의 TB 클리닉을 포함한 St. Mary's 병원의 외래 진료소를 통해 식별됩니다. 충분한 정보에 입각한 동의를 얻을 것입니다. 모든 데이터는 GCP 및 현지 정보 거버넌스 가이드라인에 따라 관리됩니다.

피험자 수 및 용량

파트 1: MPLA, polyIC, polyICLC 및 resiquimod를 사용하여 미생물 성분을 사용한 비강 상승 용량 도전. A파트와 B파트로 나누어져 있습니다.

파트 1A(n=32): 내약성 및 SAM에 기반한 증분 상승 용량 연구. 8명의 건강한 지원자로 구성된 4개의 코호트(잔디 꽃가루, 집 먼지 진드기 또는 꽃가루 알레르기 병력이 있는 8명 중 4명). 각 미생물 성분에 대한 하나의 코호트. 각 코호트에는 비강 식염수 제어 챌린지와 비강 미생물 성분 챌린지의 3가지 상승 용량이 제공됩니다.

• 식염수 100μl에 미생물 성분 10μg 함유
• 식염수 100μl에 미생물 성분 100μg 함유
• 식염수 100μl에 미생물 성분 500μg 함유

파트 1B(n=64): 추가 특수 샘플링 탐침(SSP) 및 소파술, 최대 16명의 건강한 지원자의 단일 코호트(풀 꽃가루, 집먼지 진드기, 꽃가루 알레르기에 대한 16개 알레르기 중 8개)가 포함된 단일 최고 용량. 내약성 및 SAM 반응을 확립한 후 각 피험자에게 식염수 조절 및 단일 최고 용량을 제공했습니다.

레시퀴모드:

파트 B는 36명의 지원자에게 제공되는 콧구멍당 10μg을 볼 것입니다.

12명의 알레르기성 천식 환자 12명의 아토피 지원자 12명의 비아토피 지원자

파트 2: 투베르쿨린으로 비강 상승 용량 도전. A파트와 B파트로 나누어져 있습니다.

파트 2A(n=16): 총 16명의 잠복성 결핵(LTB) 피험자로 구성됩니다.

• 100μl에서 0.1TU, n = 4
• 100μl에서 1.0TU, n = 4
• 100μl에서 2.0TU, n = 4
• 100μl에서 5.0 TU, n = 4 각 코호트에는 1개의 챌린지만 있습니다. 시작 용량은 0.1TU로 매우 낮습니다. 내약성이 좋으면 대상자는 다음으로 더 높은 용량인 1.0 TU로 진행할 것입니다. 이것이 또한 잘 견디는 경우, 피험자는 항상 피험자의 안전을 보장하는 이 그룹에서 다음으로 더 높은 용량인 2.0 TU로 진행한 다음 가장 높은 용량인 5.0 TU로 진행할 것입니다.

파트 2B(N=16): 추가 샘플링이 포함된 최고 용량. 이것은 두 그룹의 16명으로 구성됩니다(8명의 건강한 지원자와 8명의 잠복성 결핵 대상자).

그룹 1: 잠복결핵 환자, no. of people = 8 이 그룹은 최고 복용량(5-10.0 TU) 투베르쿨린 챌린지. 각 그룹의 8명의 피험자 중 2명은 위약(식염수 더미 스프레이)을 받고 나머지 6명은 투베르쿨린 스프레이 챌린지를 받게 됩니다.

그룹 2: 건강한 지원자, 아니요. of people = 8 이 그룹도 최고 복용량(5-10.0 TU) 투베르쿨린 챌린지, 내약성 대상. 8명의 피험자 중 2명은 플라시보(식염수 더미 스프레이)를 받고 나머지 6명은 투베르쿨린 스프레이 챌린지를 받게 됩니다.

파트 3(n=46): Timothy Grass Pollen을 사용한 비강 알레르겐 챌린지

처음에는 30명을 연구해야 합니다. 한 그룹에는 꽃가루 알레르기가 있는 12명, 잔디 꽃가루 알레르기가 있는 천식이 있는 그룹 12명, 알레르기가 없고 천식이 없는 6명 그룹이 있습니다. 추가 그룹에서는 비강 스프레이 챌린지 후 특수 샘플링 프로브(SSP)를 사용하여 비강 표면 유체의 연속 샘플을 채취하여 건초열이 있는 16명의 사람들을 연구해야 합니다.

1. 그룹 1: 꽃가루 알레르기가 있는 사람, n = 12
2. 그룹 2: 알레르기성 천식이 있는 사람, n = 12
3. 그룹 3: 건강한 비아토피 환자, n = 6
4. 추가 그룹 4: 건초열 환자, n=16

연구에서 비강 절차

1. 비강 세척(비강 세척): 하루를 시작할 때 소량의 소금물(식염수)을 코에 통과시켜 코의 비강 세척을 수행합니다. 이 절차는 코를 청소하기 위해 다른 절차 전에 수행됩니다. 비강 세척액에서 얻은 유체는 폐기되고 분석되지 않습니다.
2. 비강 내벽 유체 흡수(비흡수 또는 SAM): 부드러운 티슈 페이퍼처럼 보이고 느껴지는 작은 흡수성 재료 스트립을 사용하여 콧구멍 안쪽 표면에서 수분을 흡수합니다. 특수 흡수지를 콧구멍 안에 넣고 2분 동안 비강 내막액을 흡수하도록 방치한 후 제거하면서 압지처럼 액체를 부드럽게 빨아들입니다. 종이를 코에 넣으면 간지러울 수 있고 눈에 약간의 눈물이 흘릴 수 있습니다. 그러나 코흡수는 아프지 않으며 우리의 방법은 아기, 어린이 및 성인에게 잘 견디는 것으로 입증되었습니다. 종이는 비강액을 흡수하고 비강 세포에서 생성된 많은 물질을 종이에서 추출하여 실험실에서 측정할 수 있습니다.
3. 비강 긁기(비강 소파술 또는 Rhinoprobe): 작고 멸균된 일회용 플라스틱 프로브를 코에 삽입하고 콧구멍의 안쪽 표면 라이닝에 대해 부드럽게 누릅니다. 3인치 길이의 프로브 끝에는 거의 볼 수 없는 작은 국자가 있습니다. 각 콧구멍에서 24개의 작은 샘플(조직의 핀 머리, 2mm)은 불편함을 최소화하기 위해 신경 공급이 감소된 코 부분에서 채취됩니다. 이 샘플을 채취해도 출혈이 발생하지는 않지만 약간의 불편함을 유발할 수 있으며 눈에 약간의 눈물이 흘릴 수 있습니다. 프로브는 콧구멍 표면에서 비강 세포를 수집하여 분석을 위해 보냅니다. 이 방법은 많은 성인, 어린이 및 아기에게 시행되었으며 내약성이 매우 우수합니다.
4. SSP(Special Sampling Probe): 비강 표면 라이닝 유체는 전기 분무를 사용하여 비강 내벽 유체에서 물방울을 튕겨내는 특수 샘플링 프로브 또는 SSP를 사용하여 수집할 수도 있습니다. 이것은 단일 콧 구멍에서 몇 시간 동안 지속적으로 샘플링하여 수행됩니다. 사람의 코에 이 특수 샘플링 프로브(SSP)를 사용할 때 샘플을 채취하는 동안 약간의 간지러움이 있습니다. 이것은 거의 눈에 띄지 않습니다.

통계 분석

데이터 분포는 데이터가 정규(모수) 분포인지 또는 비정규(비모수) 분포인지를 결정하는 ShapiroWilks 테스트에 의해 평가됩니다.

일반 데이터는 다음과 같이 그래픽으로 표시됩니다.

• 산술 평균 및 표준 오차(SEM)
• 또는 SD가 있는 수단
• 또는 신뢰 구간(CI)이 있는 수단

비정규 데이터는 다음과 같이 그래픽으로 표시됩니다.

상자 위스커: 중앙값, 사분위수, 범위

비정규 데이터의 경우 기준선과의 차이는 각 시점에서 활성 시험감염제(서로 다른 용량) 및 위약에 대해 측정되고 AUC가 계산됩니다. 위약(활성 위약)과의 AUC 차이를 계산하고 비모수 Wilcoxon 부호 순위 테스트(단일 모집단)로 유의성을 테스트했습니다. AUC(Area Under the Curve)는 비강 챌린지 제제에 따라 다른 정의된 시간에 걸쳐 계산됩니다.