Zelfbeschadigend gedrag bij de meest risicovolle adolescenten (SH-MARA)

BESCHRIJVING VAN HET ONDERZOEKSPROJECT "Invloed op en preventie van zelfbeschadigend gedrag bij de meest risicovolle adolescenten".

1. Wetenschappelijke achtergrond Gedetailleerd in het bijgevoegde onderzoeksprotocol
2. Gedetailleerde beschrijving van het werkprogramma 2.1. Inhoud en werkprogramma De studie zal een steekproef omvatten van ongeveer 200 jonge mensen die in het ziekenhuis zullen worden opgenomen wegens zelfmoordrisico (het grootste risico in Slovenië) en een ongeveer gelijk aantal gezonde adolescenten. Bij inschrijving zullen de onderzoekers de aanwezigheid van verschillende factoren beoordelen door demografische gegevens, klinische diagnose, zelfbeoordelingsvragenlijsten, sociale beoordeling, klinische psychologische tests, beoordelingsschalen en bloedmonsters voor genetische analyses te bekijken. Ze zullen auto-agressieve gebeurtenissen en hetero-agressieve gebeurtenissen bij de patiënten tijdens de ziekenhuisopname longitudinaal volgen en hiervan een doorlopend register bijhouden. De risico- en beschermende factoren van de meest risicovolle adolescenten zullen worden vergeleken met een controlegroep van gezonde adolescenten. Dezelfde factoren bij de meest risicovolle adolescenten zullen na 6 en 18 maanden behandeling opnieuw worden beoordeeld. Een gedetailleerde beschrijving van de onderzoeksopzet wordt gegeven in afbeelding 2 en tabel 2 van het onderzoeksprotocol.

2.2. Proefpersonen: Proefpersonen met in- en uitsluitingscriteria worden beschreven in Tabel 2 (Studieprotocol, WP2).

2.3. Methoden: 2.3.1. Vragenlijsten en psychodiagnostische hulpmiddelen:

1. Inschrijvingsvragenlijst, Algemene vragenlijst1, Algemene vragenlijst2, Algemene vragenlijst3: De vragenlijsten gaan over algemene en demografische gegevens, informatie over eerdere behandelingen, ontvangen medicatie, psychische stoornis bij ontslag (ICD), psychosociale situaties (ICD), lichamelijke ziekten (ICD), COVID status (gevaccineerd, hersteld, getest), gebruik van psychoactieve stoffen, geschiedenis van zelfbeschadiging, zelfmoordpogingen, schoolprestaties, ervaring met leeftijdsgenoten, seksuele geaardheid en identiteit, woonplaats, gezinssamenstelling, familiegeschiedenis van psychische stoornissen, zelfbeschadiging en zelfmoordpogingen.
2. Columbia Suicide Severity Rating Scale (CSSRS)75.
3. De korte niet-suïcidale zelfverwondingsbeoordelingstool (B-NSSI-AT)76.
4. Personality Assessment Inventory-Adolescent (PAI-A) (https://www.center-pds.si/Katalogtestov/Kliničnitesti/Vprašalnikzaocenoosebnosti-oblikazamladostnike-PAI-A.aspx).
5. Checklist voor traumasymptomen voor kinderen (TSCC) (https://www.center-pds.si/Katalogtestov/Kliničnitesti/Vprašalnikotravmatiziranostiotrokinmladostnik. aspx).
6. Ervaringen in hechte relaties-relatiestructuren (ECR-RS)77,78
7. Dynamische beoordeling van situationele agressie-jeugdversie (DASA-YV)79.
8. Adolescent Self-Harm Risk Scale (ASHRS): dit is de schaal die we hebben ontwikkeld voor de huidige studie.
9. De schaal voor het functioneren van de persoonlijkheid - kort formulier 2.0 (LPFSBF 2.0) 80.
10. Vragenlijst Levenslange incidentie van traumatische gebeurtenissen (LITE)81, 82.
11. Schaal met borderline-persoonlijkheidskenmerken (BPFSC-11)83.
12. Inventarisatie van verklaringen over zelfverwonding (ISAS)84.

2.3.2. Genetische methoden: DNA-isolatie: Het genomische DNA wordt geïsoleerd volgens het gevestigde laboratoriumprotocol met behulp van FlexGene DNA-kit (Qiagen Duitsland) en 5 ml EDTA-bloedmonster. Geïsoleerd DNA wordt bewaard bij 4°C.

Sequencing: Sequencing zal worden uitgevoerd op de beschikbare in-house long-read sequencing-technologie nanopore PromethION (Oxford Nanopore Technologies). Het vermogen om DNA-modificaties te detecteren via verschillen in de elektrische stroomintensiteit die wordt geproduceerd door een nanopore-uitlezing van een ongewijzigde base en die van een gemodificeerde base, maakt de detectie van DNA-methylatie in verschillende CpG's van menselijk natuurlijk DNA op epigenoombreed niveau mogelijk.

Bibliotheken zullen worden voorbereid met behulp van de ligatie-sequencingkit (SQK-LSK 109, Oxford Nanopore Technologies) in de volgende fasen: 1. NEBNext Ultra II End-reparatie / dA-tailing, 2. ligatie van de oorspronkelijke streepjescodes, 3. ligatie van sequencing-adapters, 4 priming van doorstroomcellen en laden van DNA-bibliotheek (Flow Cell Priming Kit, Oxford Nanopore Technologies).

De analyse zal worden uitgevoerd met behulp van het DNA van de deelnemers met streepjescode, waardoor de gelijktijdige analyse van meerdere deelnemers mogelijk wordt, door de equimolaire hoeveelheid DNA samen te voegen in een enkele pool, gebaseerd op de observatiegroepen. Het poolen van monsters zal het effect van individuele epigenoomvariabiliteit verminderen en de cohortspecifieke epigenetische signalen verrijken, mogelijk geassocieerd met het klinische fenotype.

Bioinformatica Base Calling: Van het ruwe sequencing-signaal zullen de nucleotidesequenties worden bepaald met behulp van de softwaretool Guppy85, die is gebaseerd op een voorspellend neuraal netwerkmodel. De geïdentificeerde uitlezingen en hun betrouwbaarheid worden opgeslagen in FASTQ-bestanden. Voor daaropvolgende uitlijningen van lange aflezingen zal het menselijk genoom (GRCh38) als referentie worden gebruikt.

Variant Calling: Megalodon-software (Oxford Nanopore Technologies) zal worden gebruikt voor het bepalen van nucleotidesequenties van het onbewerkte signaal, het uitlijnen van metingen op het menselijke referentiegenoom en het oproepen van varianten. De betrouwbaarheid van de bevindingen zal bovendien worden bevestigd met behulp van de softwaretool Medaka (Oxford Nanopore Technologies). De tool gebruikt een neuraal netwerkmodel om genetische varianten te identificeren, gebaseerd op geconstrueerde consensussequenties. Variantgegevens worden opgeslagen in VCF-bestanden.

Kwantificering en evaluatie van korte tandemherhalingen: Tandem-genotypes86 en STRique87 zullen worden gebruikt om veranderingen in de lengte van tandemherhalingen te detecteren, van uitgelijnde lange DNA-aflezingen. Naast de uitgelijnde leesinvoer accepteert de softwaretool STRique het onbewerkte sequencing-signaal, op basis waarvan een verborgen Markov-model de waarschijnlijkheid van een verandering kwantificeert en evalueert. De gevalideerde lengteveranderingen van tandemherhalingen worden opgeslagen in TSV-bestanden.

Detectie van methylatieplaatsen: verschillende tools voor het oproepen van methylatie zullen worden gebruikt met behulp van de METEORE-softwaretool88. De betrouwbaarheid van de gemethyleerde CpG-eilanden gevonden in de resultaten zal worden aangetoond door de voorspellingsmodellen (willekeurig bos en meervoudige lineaire regressie). Bovendien zullen de gedetecteerde gemethyleerde sites worden vergeleken met de resultaten van de Remora-software (Oxford Nanopore Technologies). De locaties van betrouwbare methylatieplaatsen zullen worden opgeslagen in BED- en TSV-bestanden.

2.4. Uitvoering van het onderzoek "Invloeden op en preventie van zelfbeschadigend gedrag bij de meest risicovolle adolescenten" Het gedetailleerde onderzoeksproces wordt beschreven in figuur 2 en tabel 2 van het onderzoeksprotocol.

Gedetailleerde definitie van de werkpakketten van het onderzoek "Invloeden op en preventie van zelfbeschadigend gedrag bij de meest risicovolle adolescenten".

2.4.1. WP 1: Opzetten van een werkonderzoeksmodule over "Invloeden op en preventie van zelfbeschadigend gedrag bij adolescenten met de meeste risico's".

Leidende organisatie: Universiteit van Ljubljana, Faculteit Geneeskunde en Centrum voor Geestelijke Gezondheid, Universitaire Psychiatrische Kliniek Ljubljana (UPKL) Deelnemende organisaties: het Klinisch Instituut voor Speciale Laboratoriumdiagnostiek van de Kinderkliniek van de UKC Ljubljana (KISLD) en de Faculteit Elektrotechniek , Computerwetenschappen en Informatica van de Universiteit van Maribor (FERI) T1: In dit stadium werden alle vragenlijsten opgesteld in sets met de bijbehorende enquêtenummers.

1. Inschrijvingskit (screeningsvragenlijst, CSSRS, B-NSSI-AT)
2. Time1-kit (algemene vragenlijst1, PAI-A, TSCC, ECR-RS, DASA-YV, ASHRS, LPFSBF 2.0, LITE, BPFSC-11, ISAS), veneuze bloedmonsterafname voor genetische analyses
3. Time2 kit (DASA-YV tracing, Incident Report (toegewijd en voorkomen), Algemene Vragenlijst2)
4. Time3-kit (Algemene vragenlijst3, CSSRS, B-NSSI-AT, PAI-A-subschalen, TSCC-subschalen, ECR-RS, DASA-YV, ASHRS, LPFSBF 2.0, LITE, BPFSC-11), veneuze bloedmonsterafname voor genetische analyses.

T2: Ontwikkeling van een protocol voor proefpersoonregistratie en data-acquisitie, opslag en analyse. Dit werk omvatte de voorbereiding van informatiemateriaal voor proefpersonen en ouders/voogden, geïnformeerde toestemmingen/instemmingen en een gedetailleerd protocol dat gedurende het hele onderzoek toegankelijk zal zijn voor de onderzoekers.

T3: Voorbereiding van het gegevensinvoer- en opslagsysteem: Het gegevensinvoer- en opslaginformatiesysteem zal zo worden voorbereid dat het gegevensinvoer via vooraf voorbereide sjablonen voor eerste en tussentijdse rapportage van metingen mogelijk maakt. Het systeem zorgt voor gegevensprivacy, aangezien de toegang beperkt is tot geanonimiseerde gegevens en alleen is toegestaan ​​voor analysedoeleinden (in overeenstemming met de Algemene Verordening Gegevensbescherming (EU) 2016/679 (AVG)). Het systeem zorgt ervoor dat gegevens veilig worden verwijderd nadat het project is voltooid (volgens de AVG). Het informatiesysteem zal fysiek in de Republiek Slovenië worden geplaatst en fysieke toegang tot de hardware zal alleen worden beperkt tot administratieve activiteiten door gekwalificeerd personeel.

T4: Opleiding en training van de werkgroep: Dit onderdeel zal bestaan ​​uit verschillende educatieve sessies voor de verschillende leden van de werkgroep: Betrokkenheid van patiënten, betrokkenheid van leerlingen en studenten van de controlegroep (beoordeling van het voldoen aan in-/uitsluitingscriteria, informatie over het onderzoek, verkrijgen van toestemming van adolescenten en familieleden), b. Verzameling van antwoorden op vragenlijsten, c. Verzameling van biologische monsters, d. Gegevensverzameling tijdens ziekenhuisopname, b.v. Opvolgen. Initiële trainingssessies zullen worden gevolgd door frequentere opvolging van de studieprocessen, mogelijke complicaties, noodzakelijke aanpassingen van het protocol volgens de initiële ervaring (projectmanager Maja Drobnič Radobuljac) en herscholing indien nodig.

2.4.2. WP 2: Werving van studie- en controlegroepen, gegevensverzameling, follow-up van patiënten.

Leidende organisatie: UPKL Deelnemende organisaties: KISLD en FERI

Doelstellingen:

In dit werkpakket zullen de onderzoekers zich richten op de betrokkenheid van patiënten en gezonde adolescenten. Het werkpakket omvat het vastleggen van alle patiëntgegevens op tijdstip 1 en het volgen van patiënten tijdens ziekenhuisopname tot ontslag (tijdstip 2) en het opnieuw vastleggen van gegevens op tijdstip 3 (figuur 2 van het onderzoeksprotocol). Aan de kant van de controlegroep worden alleen gegevens op tijdstip 1 vastgelegd (afbeelding 2 van het onderzoeksprotocol). Dit werkpakket heeft drie hoofddoelstellingen: inschrijving van gehospitaliseerde en gezonde adolescenten, gegevensverzameling en opvolging.

Taken:

T1: Inschrijving van gehospitaliseerde adolescenten. De Enrollment Kit en de Time1 Kit worden toegediend (zie afbeelding 2 van het onderzoeksprotocol) en de Time2 Kit wordt toegediend tijdens de ziekenhuisopname en bij ontslag.

T2: Inschrijving van gezonde adolescenten (controlegroep). De Enrollment Kit en de Time Kit1 worden toegediend (zie figuur 2 van het onderzoeksprotocol).

T3: Gegevensverzameling. Gegevens van gehospitaliseerde patiënten zullen worden verzameld door de kits Enrollment, Time1, Time2 toe te dienen (zie afbeelding 2 van het onderzoeksprotocol). Adolescenten in de controlegroep krijgen de Enrollment en Time1 kits toegediend onmiddellijk na inschrijving, er zullen geen andere gegevens worden verzameld van deze adolescenten (zie figuur 2 van het onderzoeksprotocol). In het geval dat een van de benaderde adolescenten hulp nodig lijkt te hebben voor zelfbeschadigend gedrag of andere openlijke psychische stoornissen, zullen ze worden doorverwezen voor een passende behandeling.

T4: volgen. Zes en 18 maanden na het einde van de ziekenhuisopname zullen de onderzoekers opnieuw contact opnemen met de patiënten en de Time3-kit toedienen (zie figuur 2 van het onderzoeksprotocol). Als een van de benaderde adolescenten hulp nodig lijkt te hebben voor zelfbeschadigend gedrag of andere openlijke psychische stoornissen, zullen ze worden doorverwezen voor een passende behandeling.

2.4.3. WP 3: Analyse van geëxtraheerde materialen, gegevensinvoer en statistische analyse Leidende organisatie: UPKL, KISLD en FERI Deelnemende organisaties: UPKL, KISLD en FERI

Doelstellingen:

Het eerste doel is het identificeren van de factoren die van invloed zijn op het optreden van de meest bedreigende vormen van zelfbeschadigend gedrag bij adolescenten.

Het tweede doel is het beoordelen van de factoren die van invloed zijn op de verandering van het risico op zelfbeschadigend gedrag bij de meest risicovolle adolescenten.

De derde doelstelling is het ontwikkelen van een instrument (schaal) voor snelle beoordeling van het risico op zelfbeschadiging op korte en middellange termijn bij adolescenten (ASHRS).

De details staan ​​in het Studieprotocol.