Cytokeratine 18 Niet-invasieve biomarker voor afstoting bij levertransplantatiepatiënten

Cellulaire afstoting na levertransplantatie komt wereldwijd voor en is een belangrijke oorzaak van morbiditeit die 15 tot 20 procent van de ontvangers van een levertransplantatie treft. Een verhoging van serumaminotransferase kan verdacht zijn van afstoting en gaat doorgaans vooraf aan klinische symptomen van koorts en geelzucht. Dergelijke klinische symptomen en biochemische parameters zijn echter noch specifiek, noch gevoelig voor de detectie van afstoting of de mate van ernst ervan.

De huidige zorgstandaard blijft een leverbiopsie ter bevestiging van transplantaatafstoting. Hoewel er aanzienlijke procedurele vooruitgang is geboekt, is leverbiopsie een invasieve procedure, waarvoor sedatie nodig is, en die een klein maar zeker risico met zich meebrengt op complicaties, waaronder sterfte. Het ontwikkelen van niet-invasieve biomarkers die de noodzaak van een invasieve leverbiopsie zouden kunnen verzachten, blijft een belangrijke nationale en internationale onderzoeksfocus op het gebied van de hepatologie. Dit zou ook de basis kunnen leggen voor het vroegtijdig niet-invasief longitudinaal volgen van afstoting en helpen bij het verminderen van transplantaatfalen.

Cytokeratine 18 is een cytoskeleteiwit dat wordt aangetroffen in hepatocyten en waarvan wordt aangenomen dat het een belangrijk intermediair filamenteiwit is dat verband houdt met de morfologische veranderingen van celdood. Tijdens apoptose van hepatocyten wordt cytokeratine 18 gesplitst door caspasen. Het resulterende nieuwe neo-epitoop komt specifiek voor tijdens apoptose en vertegenwoordigt apoptotische celdood. M30, een monoklonaal antilichaam, herkent dit gesplitste epitoop (CK-18) en dient dus als een nieuwe biomarker voor apoptose. Apoptose is een bekende gebeurtenis bij afstoting. Er zijn verschillende mechanismen gepostuleerd die tijdens afstoting tot apoptose leiden, waaronder de granule-exocytoseroute, de Fas-gemedieerde route en inductie door cytokinen. Bovendien lijkt er een significante correlatie te bestaan ​​tussen de mate van afstoting en de ernst van apoptose.

Deze observaties leiden ons naar de opwindende mogelijkheid dat CK-18-metingen een zeer waardevolle niet-invasieve biomarker voor hepatische cellulaire afstoting zouden kunnen blijken te zijn en de weg zouden kunnen effenen naar voorspellende modellen die afstoting en de progressie ervan volgen. Het doel van dit onderzoek is het verzamelen van bloedmonsters die moeten worden getest op het meten van de CK-18-waarden, het beoordelen van bepaalde andere markers in het bloed en het beoordelen van de geschiedenis.

Ongeveer 105 patiënten zullen deelnemen aan deze studie aan de Saint Louis University.

Dit is een prospectieve studie die de volgende drie specifieke cohorten van proefpersonen omvat (geen randomisatie van proefpersonen):

1. Patiënten na transplantatie die een standaard leverbiopsie ondergaan (biopsie-arm).
2. Stabiele post-levertransplantatiepatiënten zonder afstoting (Stable post-levertransplantatie-arm).
3. Gezonde niet-transplantatiecontrolepatiënten zonder leverziekte (gezonde arm).

Iedere deelnemer krijgt bij inschrijving een uniek deelnemersnummer toegewezen. Alle gegevens van de deelnemers en de verzamelde monsters worden opgeslagen onder deze unieke deelnemer-ID. Alle bloedmonsters worden gelabeld met een onderzoeksnummer en verzonden voor beoordeling van de CK-18-waarden en andere markers om afstoting te begrijpen.

Een deelnemer mag minder dan een uur aan dit onderzoek besteden (de tijd die nodig is om toestemming te geven, medische informatie te bekijken en bloed te laten afnemen).

Door hun medische dossiers te bekijken, wordt informatie verzameld over de deelnemers (leeftijd, ras, geslacht) en hun gezondheid. Het onderzoeksteam zal proberen het onderzoeksbloedmonster te nemen wanneer de deelnemers al een bloedtest hebben ondergaan voor hun reguliere gezondheidscontroles, maar het kan voorkomen dat de deelnemer alleen voor het onderzoek bloed moet laten afnemen.

Het bloedmonster dat nodig is voor dit onderzoek wordt als volgt verzameld, afhankelijk van de deelnemerscategorie kan het in:

1. Als de deelnemer een gezonde patiënt is of een deelnemer die een levertransplantatie heeft ondergaan en na de transplantatie stabiel is zonder symptomen en tekenen van afstoting. In dat geval wordt het onderzoeksmonster verzameld met de standaard van zorglaboratoriumwerk dat zij zullen hebben als onderdeel van de routinematige gezondheidszorg. Indien dit niet mogelijk is, kan het zijn dat de Deelnemer een extra stick nodig heeft.
2. Als een deelnemer een leverbiopsie ondergaat. In dat geval wordt tijdens de leverbiopsie in de deelnemende centra doorgaans een intraveneuze lijn als standaardzorg geplaatst, vooral bij pediatrische patiënten. Onderzoeksbloed zou worden verzameld tijdens plaatsing aan de lijn of bij laboratoriumwerk volgens de standaardzorg.

Als dit niet kan worden verkregen, wordt het bloedmonster voor uitsluitend onderzoek verzameld. Het kan voorkomen dat het onderzoeksteam op dit moment niet in staat is om voldoende bloed te verkrijgen voor ons onderzoek. Op dat moment moeten deelnemers mogelijk extra bloed laten afnemen voor het onderzoek.

Deelnemers kunnen meerdere keren opnieuw worden ingeschreven voor het onderzoek als zij hiervoor in aanmerking komen. Elke keer wordt aan de deelnemers gevraagd of ze willen deelnemen en wordt telkens opnieuw toestemming gegeven.

• Als een deelnemer een levertransplantatie ondergaat na voltooiing van deelname aan de gezonde arm, kan de deelnemer in aanmerking komen voor herinschrijving in het onderzoek onder andere armen (stabiele post-levertransplantatiearm of biopsiearm).
• Als een deelnemer een episode van afstoting doormaakt en een leverbiopsie moet ondergaan na voltooiing van deelname aan de stabiele post-levertransplantatie-arm, komt de deelnemer mogelijk in aanmerking voor herinschrijving in het onderzoek onder de biopsie-arm, aangezien in dit onderzoek de afstotingsgebeurtenissen worden vastgelegd.
• Als een deelnemer een volgende episode van afstoting doormaakt en na voltooiing van deelname aan de biopsie-arm een ​​nieuwe leverbiopsie moet ondergaan, komt de deelnemer mogelijk in aanmerking voor herinschrijving in het onderzoek onder de leverbiopsie-arm, aangezien in dit onderzoek de afstotingsgebeurtenissen worden vastgelegd.
• Als een deelnemer volgens de onderzoeksarts stabiel wordt na voltooiing van deelname aan de biopsie-arm. De deelnemer komt mogelijk in aanmerking voor herinschrijving in het onderzoek onder de stabiele post-levertransplantatiearm.