Pochodzące z oleju rybiego wielonienasycone kwasy tłuszczowe N-3 i pęcherzyki zewnątrzkomórkowe (HI-FIVE)
4 listopada 2022 zaktualizowane przez: Professor Parveen Yaqoob, MA, DPhil, RNutr, FAfN, University of Reading
Wpływ wielonienasyconych kwasów tłuszczowych N-3 pochodzących z oleju rybiego na wytwarzanie i czynności funkcjonalne pęcherzyków zewnątrzkomórkowych
Sugeruje się, że wielonienasycone kwasy tłuszczowe N-3 (n-3 PUFA), które występują obficie w tłustych rybach i olejach rybnych, odgrywają rolę w zmniejszaniu ryzyka chorób sercowo-naczyniowych (CVD) poprzez modyfikację szerokiego zakresu czynników ryzyka, takich jak jak tłuszcze we krwi, krzepnięcie krwi, czynność naczyń krwionośnych i stany zapalne.
Pęcherzyki zewnątrzkomórkowe (EV) to małe cząsteczki uwalniane z różnych komórek, gdy są aktywowane lub uszkodzone.
Duża liczba EV we krwi wiąże się z wyższym ryzykiem CVD i uważa się, że dzieje się tak dlatego, że zawierają one „bioaktywne” składniki, które mogą wpływać na wiele procesów związanych z CVD.
Jednak bardzo niewiele badań klinicznych dotyczyło zależności między spożywaniem PUFA n-3 a krążącymi pojazdami elektrycznymi.
To badanie ma na celu zbadanie wpływu dietetycznych PUFA n-3 na wytwarzanie i czynności funkcjonalne pojazdów elektrycznych, co zapewniłoby nowy wgląd w korzyści płynące z n-3 PUFA dla zdrowia układu sercowo-naczyniowego.
Przegląd badań
Status
Status
Zakończony
Warunki
Warunki
Interwencja / Leczenie
Interwencja / Leczenie
Szczegółowy opis
Proponowane badanie będzie randomizowaną, podwójnie ślepą, kontrolowaną placebo interwencją naprzemienną.
Osoby (40-70 lat) z umiarkowanym ryzykiem CVD będą otrzymywać suplementację albo olejem rybim (1,8 g/d n-3 PUFA) albo placebo (wysokooleinowy olej szafranowy) przez 12 tygodni.
Po 12-tygodniowym wypłukaniu, a następnie przejściu do innej interwencji na kolejne 12 tygodni.
Próbki krwi będą pobierane przed i po każdej interwencji.
Zostanie przeprowadzony kwestionariusz dotyczący częstotliwości spożywania pokarmów w celu oceny zwyczajowego spożycia n-3 PUFA przez osobnika.
Oczekuje się również, że osoby badane utrzymają niskie spożycie kwasów tłuszczowych n-3, powstrzymają się od stosowania wszelkich suplementów i utrzymają swoją masę ciała podczas badania.
Dawka jest oparta na naszej wcześniejszej pracy, która wykazała zmniejszenie liczby EV pochodzenia śródbłonkowego (EEV) i tendencję do zmniejszania się liczby EV pochodzenia płytkowego (PEV) oraz dawkę, przy której korzystne działanie n-3 PUFA na stabilność blaszki miażdżycowej.
Prace eksperymentalne będą przebiegać w dwóch głównych kierunkach.
W pierwszym nurcie zostanie zbadany wpływ suplementacji n-3 PUFA na charakterystykę i czynności funkcjonalne wszystkich pojazdów elektrycznych z osocza.
W ramach drugiego nurtu zostanie zbadany wpływ n-3 PUFA na wytwarzanie PEV z płytek krwi pobranych od osób badanych i stymulowanych in vitro; wygenerowane PEV zostaną następnie ocenione pod kątem ich składu i aktywności funkcjonalnej.
Ten eksperymentalny projekt pozwoli na jednoczesne badanie zarówno składu, jak i aktywności wszystkich EV pobranych bezpośrednio z krwi oraz wytwarzania i aktywności PEV.
W oparciu o naszą poprzednią pracę, 27 osób jest wymaganych do wykrycia 10% redukcji liczby EV po suplementacji oleju z ryb z dwustronnym poziomem istotności 5% i mocą 90%, a 34 osoby są wymagane do uzyskania mocy 95%.
Również w oparciu o wcześniejsze dane, 22 badanych dałoby 95% mocy do wykrycia 10% różnic w tworzeniu się skrzepliny, a 30 badanych jest wymaganych do wykrycia znaczącego wpływu n-3 PUFA na agregację płytek krwi i ekspozycję na fosfatydyloserynę (PS).
Biorąc pod uwagę 15% wskaźnik rezygnacji i dążąc do 95% mocy w oparciu o 10% redukcję liczby pojazdów elektrycznych, zrekrutujemy łącznie 40 osób.
Typ studiów
Typ studiów
Interwencyjne
Zapisy (Rzeczywisty)
Zapisy
42
Faza
Faza
- Nie dotyczy
Kontakty i lokalizacje
Ta sekcja zawiera dane kontaktowe osób prowadzących badanie oraz informacje o tym, gdzie badanie jest przeprowadzane.
Lokalizacje studiów
-
-
-
Reading, Zjednoczone Królestwo, RG6 6AP
- University of Reading
-
-
Kryteria uczestnictwa
Badacze szukają osób, które pasują do określonego opisu, zwanego kryteriami kwalifikacyjnymi. Niektóre przykłady tych kryteriów to ogólny stan zdrowia danej osoby lub wcześniejsze leczenie.
Kryteria kwalifikacji
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
40 lat do 70 lat (DOROSŁY, STARSZY_DOROŚLI)
Akceptuje zdrowych ochotników
Tak
Płeć kwalifikująca się do nauki
Wszystko
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Wiek 40-70 lat
- Niepalący
Przy umiarkowanym ryzyku chorób sercowo-naczyniowych
- Ryzyko zostanie ocenione przez internetowy kalkulator o nazwie „QRISK2”. Ten kalkulator online (https://qrisk.org/2016/), które wykorzystują tradycyjne czynniki ryzyka (wiek, skurczowe ciśnienie krwi, palenie tytoniu i stosunek całkowitego cholesterolu w surowicy do cholesterolu lipoprotein o dużej gęstości) wraz z indeksem masy ciała, pochodzeniem etnicznym, miarami deprywacji, wywiadem rodzinnym, zapewnią procent ryzyka wystąpienia zawału serca lub udaru mózgu w ciągu najbliższych 10 lat.
- Osoby z 10%-20% będą uważane za osoby z umiarkowanym ryzykiem
Kryteria wyłączenia:
- BMI: <18,5kg/m2
- Niedokrwistość (stężenie hemoglobiny <12,5 g/l u mężczyzn i <11,5 g/l u kobiet)
- Hiperlipidemia (stężenie cholesterolu całkowitego >8 mmol/l)
- Cukrzyca (rozpoznane lub stężenie glukozy na czczo >7 mmol/l) lub inne zaburzenia endokrynologiczne
- Angina, udar lub jakakolwiek choroba naczyniowa w ciągu ostatnich 12 miesięcy
- Choroby nerek, przewodu pokarmowego, układu oddechowego, wątroby lub jelit
- Choroba zapalna
- Przyjmuj leki na nadciśnienie, hiperlipidemię, stany zapalne, depresję lub tyreopatię.
- Przyjmuj aspirynę, ibuprofen lub inne niesteroidowe leki przeciwzapalne (NLPZ) > 4 razy w miesiącu lub raz w tygodniu poprzedzającym badanie
- Weź inne leki przeciwpłytkowe lub przeciwzakrzepowe, takie jak triflusal, klopidogrel i warfaryna.
- Mieć alergie
- Palenie (w tym e-papierosów i wyrobów nikotynowych)
- Nadużywanie lub spożycie alkoholu >21 jednostek/tydzień dla mężczyzn i >15 jednostek/tydzień dla kobiet lub nadużywanie alkoholu w wywiadzie
- Regularnie spożywaj tłuste ryby i/lub suplementy diety
- Planuje rozpocząć lub stosować dietę redukującą wagę
- Intensywne ćwiczenia aerobowe (>20 min, trzy razy w tygodniu)
- Kobiety w ciąży, karmiące piersią lub w wieku rozrodczym, które nie stosują skutecznej metody antykoncepcji (w tym abstynencji)
- Brali udział w innym badaniu klinicznym w ciągu ostatnich trzech miesięcy
Plan studiów
Ta sekcja zawiera szczegółowe informacje na temat planu badania, w tym sposób zaprojektowania badania i jego pomiary.
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Główny cel: ZAPOBIEGANIE
- Przydział: LOSOWO
- Model interwencyjny: KRZYŻOWANIE
- Maskowanie: POTROIĆ
Liczba ramion
2
Broń i interwencje
Grupa uczestników / ArmGrupa uczestników / Arm |
Interwencja / LeczenieInterwencja / Leczenie |
|---|---|
|
ACTIVE_COMPARATOR: Interwencja
Kapsułki z olejem rybim
|
Każda porcja zawiera 360 mg kwasu eikozapentaenowego (EPA), 270 mg kwasu dokozaheksaenowego (DHA), a całkowita suplementacja wynosi 1,8 g dziennie n-3 PUFA przez 12 tygodni
|
|
PLACEBO_COMPARATOR: Placebo
Kapsułki z wysokooleinowym olejem szafranowym
|
Kapsułki z wysokooleinowym olejem z krokosza barwierskiego przez 12 tygodni
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Liczba krążących całkowitych EV w osoczu bezpłytkowym (PFP) wykrytych za pomocą analizy śledzenia nanocząsteczek (NTA)
Ramy czasowe: Zmiana całkowitej liczby krążących EV w PFP wykryta przez NTA po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Krążące EV zostały najpierw wyizolowane w celu uzyskania frakcji 7~9 metodą chromatografii wykluczania (SEC) przy użyciu kolumn Izon qEV (Izon Science Ltd, Oxford, Wielka Brytania).
Frakcje następnie rozcieńczono PBS w celu utrzymania zalecanego zakresu stężeń cząstek (1~10*10^8 pęcherzyków/ml) przed analizą na NanoSight 300 (Malvern, Amesbury, Wielka Brytania).
Do każdej analizy zarejestrowano pięć filmów, każdy o czasie trwania 60 sekund, z kamerą na poziomie 13. Dane analizowano za pomocą oprogramowania instrumentu NTA 3.20, które może identyfikować poszczególne cząstki i szacować ich rozmiary na podstawie równania Stokesa-Einsteina.
Na koniec ustalono próg 70 nm dla NTA, aby zapewnić minimalną interferencję ze strony małych lipoprotein.
|
Zmiana całkowitej liczby krążących EV w PFP wykryta przez NTA po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
|
Liczba całkowitych fosfatydyloserynododatnich EV (PS+EV) w osoczu bezpłytkowym (PFP) wykrytych metodą cytometrii przepływowej (FCM)
Ramy czasowe: Zmiana całkowitej liczby PS+EV w PFP wykryta przez FCM po 12-tygodniowym okresie przyjmowania
|
5 μl PFP dodano do nieklejących się probówek do mikrowirówki (Alpha Laboratories Ltd, Hampshire, Wielka Brytania), które zawierały 5 μl odczynnika blokującego FcR (Miltenyi Biotec Ltd, Surrey, Wielka Brytania) i bufor aneksyny V i inkubowano przez 15 minut w ciemności w temp. temperatura pokojowa.
Następnie dodano przeciwciała i dopasowane izotypowo kontrole i próbki inkubowano przez kolejne 15 minut w ciemności w temperaturze pokojowej.
Po inkubacji próbki rozcieńczono 200 μl buforu aneksyny V i przeniesiono do probówek przepływowych FACS (BD Biosciences, Wokingham, Wielka Brytania), gotowych do analizy za pomocą FCM.
PS+EV zostały zidentyfikowane jako aneksyna V+EV podczas wyzwalania na fluorescencji APC.
|
Zmiana całkowitej liczby PS+EV w PFP wykryta przez FCM po 12-tygodniowym okresie przyjmowania
|
|
Charakterystyka subpopulacji krążących EV w PFP wykrytej za pomocą fluorescencji FCM
Ramy czasowe: Zmiana liczby krążących subpopulacji EV w PFP za pomocą fluorescencji FCM po okresie pobierania 12 tygodni
|
5 μl PFP dodano do nieklejących się probówek do mikrowirówki (Alpha Laboratories Ltd, Hampshire, Wielka Brytania), które zawierały 5 μl odczynnika blokującego FcR (Miltenyi Biotec Ltd, Surrey, Wielka Brytania) i bufor aneksyny V i inkubowano przez 15 minut w ciemności w temp. temperatura pokojowa.
Następnie dodano przeciwciała i dopasowane izotypowo kontrole i próbki inkubowano przez kolejne 15 minut w ciemności w temperaturze pokojowej.
Po inkubacji próbki rozcieńczono 200 μl buforu aneksyny V i przeniesiono do probówek przepływowych FACS (BD Biosciences, Wokingham, Wielka Brytania), gotowych do analizy za pomocą FCM.
EV pochodzące z płytek krwi (PDEV) zidentyfikowano jako aneksyna V+EV, które również zabarwiły się pozytywnie na CD41-PE na wykresie kwadrantowym APC vs PE, a EV pochodzące ze śródbłonka (EDEV) zidentyfikowano jako aneksyna V+EV, które również zabarwiły się pozytywnie na CD105 - eFluor450 na wykresie kwadrantowym APC vs PB.
|
Zmiana liczby krążących subpopulacji EV w PFP za pomocą fluorescencji FCM po okresie pobierania 12 tygodni
|
Miary wyników drugorzędnych
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Aktywność prozakrzepowa krążących EV w PFP (czas opóźnienia wytwarzania trombiny)
Ramy czasowe: Zmiana aktywności prozakrzepowej (czas opóźnienia wytwarzania trombiny) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
Dostępny w handlu, oparty na płytkach test wytwarzania trombiny zastosowano do pomiaru wytwarzania trombiny w standardowym, zbiorczym osoczu pęcherzykowym i bezpłytkowym (określanym jako osocze bez pęcherzyków lub VFP) lub w tym samym VFP, ale z dodanymi krążącymi EV od pacjentów w badanie interwencyjne.
Umożliwiło to ocenę generacji trombiny zależnej od TF, przypisywanej w szczególności krążącym EV w próbkach z badania interwencyjnego.
Wyniki przedstawiono jako pięć zmiennych: (i) faza opóźnienia inicjacji wytwarzania trombiny po dodaniu wyzwalacza (czas do 1/6 wysokości piku) (min); (ii) szczytowe stężenie trombiny (nM); (iii) czas do osiągnięcia piku (min); (iv) wskaźnik prędkości, zdefiniowany jako = [wysokość piku/(czas do szczytu - czas opóźnienia)] oraz (v) pole pod krzywą, określone jako endogenny potencjał trombiny (ETP) (wyrażone jako nM trombina × min)
|
Zmiana aktywności prozakrzepowej (czas opóźnienia wytwarzania trombiny) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
|
Aktywność prozakrzepowa krążących EV w PFP (szczytowe stężenie trombiny)
Ramy czasowe: Zmiana aktywności prozakrzepowej (szczytowe stężenie trombiny) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
Dostępny w handlu, oparty na płytkach test wytwarzania trombiny zastosowano do pomiaru wytwarzania trombiny w standardowym, zbiorczym osoczu pęcherzykowym i bezpłytkowym (określanym jako osocze bez pęcherzyków lub VFP) lub w tym samym VFP, ale z dodanymi krążącymi EV od pacjentów w badanie interwencyjne.
Umożliwiło to ocenę generacji trombiny zależnej od TF, przypisywanej w szczególności krążącym EV w próbkach z badania interwencyjnego.
Wyniki przedstawiono jako pięć zmiennych: (i) faza opóźnienia inicjacji wytwarzania trombiny po dodaniu wyzwalacza (czas do 1/6 wysokości piku) (min); (ii) szczytowe stężenie trombiny (nM); (iii) czas do osiągnięcia piku (min); (iv) wskaźnik prędkości, zdefiniowany jako = [wysokość piku/(czas do szczytu - czas opóźnienia)] oraz (v) pole pod krzywą, określone jako endogenny potencjał trombiny (ETP) (wyrażone jako nM trombina × min)
|
Zmiana aktywności prozakrzepowej (szczytowe stężenie trombiny) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
|
Aktywność prozakrzepowa krążących EV w PFP (Time to Peak Thrombin Concentration)
Ramy czasowe: Zmiana aktywności prozakrzepowej (czas do osiągnięcia szczytowego stężenia trombiny) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
Dostępny w handlu, oparty na płytkach test wytwarzania trombiny zastosowano do pomiaru wytwarzania trombiny w standardowym, zbiorczym osoczu pęcherzykowym i bezpłytkowym (określanym jako osocze bez pęcherzyków lub VFP) lub w tym samym VFP, ale z dodanymi krążącymi EV od pacjentów w badanie interwencyjne.
Umożliwiło to ocenę generacji trombiny zależnej od TF, przypisywanej w szczególności krążącym EV w próbkach z badania interwencyjnego.
Wyniki przedstawiono jako pięć zmiennych: (i) faza opóźnienia inicjacji wytwarzania trombiny po dodaniu wyzwalacza (czas do 1/6 wysokości piku) (min); (ii) szczytowe stężenie trombiny (nM); (iii) czas do osiągnięcia piku (min); (iv) wskaźnik prędkości, zdefiniowany jako = [wysokość piku/(czas do szczytu - czas opóźnienia)] oraz (v) pole pod krzywą, określone jako endogenny potencjał trombiny (ETP) (wyrażone jako nM trombina × min)
|
Zmiana aktywności prozakrzepowej (czas do osiągnięcia szczytowego stężenia trombiny) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
|
Aktywność prozakrzepowa krążących EV w PFP (wskaźnik prędkości)
Ramy czasowe: Zmiana aktywności prozakrzepowej (wskaźnik prędkości) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
Dostępny w handlu, oparty na płytkach test wytwarzania trombiny zastosowano do pomiaru wytwarzania trombiny w standardowym, zbiorczym osoczu pęcherzykowym i bezpłytkowym (określanym jako osocze bez pęcherzyków lub VFP) lub w tym samym VFP, ale z dodanymi krążącymi EV od pacjentów w badanie interwencyjne.
Umożliwiło to ocenę generacji trombiny zależnej od TF, przypisywanej w szczególności krążącym EV w próbkach z badania interwencyjnego.
Wyniki przedstawiono jako pięć zmiennych: (i) faza opóźnienia inicjacji wytwarzania trombiny po dodaniu wyzwalacza (czas do 1/6 wysokości piku) (min); (ii) szczytowe stężenie trombiny (nM); (iii) czas do osiągnięcia piku (min); (iv) wskaźnik prędkości, zdefiniowany jako = [wysokość piku/(czas do szczytu - czas opóźnienia)] oraz (v) pole pod krzywą, określone jako endogenny potencjał trombiny (ETP) (wyrażone jako nM trombina × min)
|
Zmiana aktywności prozakrzepowej (wskaźnik prędkości) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
|
Aktywność prozakrzepowa krążących EV w PFP (potencjał endogennej trombiny)
Ramy czasowe: Zmiana aktywności prozakrzepowej (potencjał endogennej trombiny) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
Dostępny w handlu, oparty na płytkach test wytwarzania trombiny zastosowano do pomiaru wytwarzania trombiny w standardowym, zbiorczym osoczu pęcherzykowym i bezpłytkowym (określanym jako osocze bez pęcherzyków lub VFP) lub w tym samym VFP, ale z dodanymi krążącymi EV od pacjentów w badanie interwencyjne.
Umożliwiło to ocenę generacji trombiny zależnej od TF, przypisywanej w szczególności krążącym EV w próbkach z badania interwencyjnego.
Wyniki przedstawiono jako pięć zmiennych: (i) faza opóźnienia inicjacji wytwarzania trombiny po dodaniu wyzwalacza (czas do 1/6 wysokości piku) (min); (ii) szczytowe stężenie trombiny (nM); (iii) czas do osiągnięcia piku (min); (iv) wskaźnik prędkości, zdefiniowany jako = [wysokość piku/(czas do szczytu - czas opóźnienia)] oraz (v) pole pod krzywą, określone jako endogenny potencjał trombiny (ETP) (wyrażone jako nM trombina × min)
|
Zmiana aktywności prozakrzepowej (potencjał endogennej trombiny) krążących EV w PFP po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
|
Stymulowana agonistą ex vivo aktywacja płytek wykrywana w teście agregacji płytek na płytce
Ramy czasowe: Zmiana aktywacji płytek ex vivo po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Do zbadania wpływu suplementacji n-3 PUFA na czynność płytek krwi wykorzystano technikę 96-studzienkowej agregometrii wysokowydajnej, pozwalającą na badanie szerokiego zakresu stężeń różnych agonistów.
Osocze bogatopłytkowe (PRP) i osocze ubogie w płytki krwi (PPP) z każdej wizyty badawczej stosowano w teście agregacji płytek przy użyciu wstępnie przygotowanych 96-dołkowych mikropłytek zawierających agonistów (ADP, EPI, TRAP-6 i U46619).
Otrzymano krzywe dawka-odpowiedź w odpowiedzi na każdego agonisty, a wyniki przedstawiono jako LogEC50 (logarytm stężenia agonisty, M, dający odpowiedź w połowie między maksymalną a minimalną agregacją).
|
Zmiana aktywacji płytek ex vivo po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
|
Stymulowana agonistą ex vivo aktywacja płytek wykrywana w teście agregacji płytek na płytce (CRP-XL Log EC50)
Ramy czasowe: Zmiana aktywacji płytek ex vivo po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Do zbadania wpływu suplementacji n-3 PUFA na czynność płytek krwi wykorzystano technikę 96-studzienkowej agregometrii wysokowydajnej, pozwalającą na badanie szerokiego zakresu stężeń różnych agonistów.
Osocze bogatopłytkowe (PRP) i osocze ubogie w płytki krwi (PPP) z każdej wizyty badawczej stosowano w teście agregacji płytek przy użyciu wstępnie przygotowanych 96-dołkowych mikropłytek zawierających agonistów (CRP-XL).
Otrzymano krzywe dawka-odpowiedź w odpowiedzi na każdego agonisty, a wyniki przedstawiono jako LogEC50 (logarytm stężenia agonisty, mg/ml, dający odpowiedź w połowie między maksymalną a minimalną agregacją).
|
Zmiana aktywacji płytek ex vivo po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
|
Aktywność prozakrzepowa pęcherzyków zewnątrzkomórkowych pochodzenia płytkowego (PDEV) przygotowanych z supernatantów stymulowanych płytek krwi (punkt końcowy i maksimum tworzenia skrzepliny)
Ramy czasowe: Zmiana aktywności prozakrzepowej (punkt końcowy i maksimum tworzenia skrzepliny) PEV przygotowanych z supernatantów stymulowanych płytek krwi po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Tworzenie skrzepliny ex vivo mierzono przez dodanie PDEV generowanych in vitro ze stymulowanych płytek krwi do krwi pełnej w warunkach przepływu.
Wyniki przedstawiono jako trzy zmienne: (i) punkt końcowy tworzenia skrzepliny ex vivo (FU); (ii) punkt końcowy dla tworzenia skrzepliny ex vivo (FU); (iii) pole pod krzywą.
|
Zmiana aktywności prozakrzepowej (punkt końcowy i maksimum tworzenia skrzepliny) PEV przygotowanych z supernatantów stymulowanych płytek krwi po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
|
Aktywność prozakrzepowa pęcherzyków zewnątrzkomórkowych pochodzenia płytkowego (PDEV) przygotowanych z supernatantów stymulowanych płytek krwi (pole pod krzywą)
Ramy czasowe: Zmiana aktywności prozakrzepowej (pole pod krzywą) PEV przygotowanych z supernatantów stymulowanych płytek krwi po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
Tworzenie skrzepliny ex vivo mierzono przez dodanie PDEV generowanych in vitro ze stymulowanych płytek krwi do krwi pełnej w warunkach przepływu.
Wyniki przedstawiono jako trzy zmienne: (i) punkt końcowy tworzenia skrzepliny ex vivo (FU); (ii) punkt końcowy dla tworzenia skrzepliny ex vivo (FU); (iii) pole pod krzywą.
|
Zmiana aktywności prozakrzepowej (pole pod krzywą) PEV przygotowanych z supernatantów stymulowanych płytek krwi po okresie przyjmowania 12 tygodni
|
|
Analiza lipidów całkowitych w krążeniu EV
Ramy czasowe: Zmiana całkowitych lipidów EV po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Porcję 500 μl zamrożonego PFP rozmrożono w temperaturze pokojowej za pomocą mieszadła rolkowego i poddano SEC w celu izolacji i oczyszczenia pojazdów elektrycznych.
Frakcje 7-9 połączono razem i przygotowano 800 μl połączonych frakcji do całkowitej ekstrakcji lipidów i estryfikacji metylu.
Całkowite estry metylowe lipidów EV analizowano następnie za pomocą chromatografii gazowej na Hewlett-Packard serii 6890 GC (Hewlett-Packard, Kalifornia, Stany Zjednoczone), z następującym protokołem: stosunek podziału ustalono na 30:1 dla analizy osocza i EV.
Objętość wstrzyknięcia wynosiła odpowiednio 1 μl dla osocza i 5 μl dla EV.
Temperaturę zarówno wtryskiwacza, jak i detektora utrzymywano na poziomie 300°C, a program temperaturowy zakładał temperaturę początkową 115°C przez 2 minuty, zwiększano z szybkością 10°C/min do 200°C i utrzymywano w tej temperaturze przez 16 minut, a na końcu zwiększano przy 60°C/min do 240°C przez 2 minuty (całkowity czas pracy: 29,2 minuty).
Próbki analizowano przy użyciu oprogramowania ChemStation i Microsoft Excel.
|
Zmiana całkowitych lipidów EV po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
|
Analiza całkowitych fosfolipidów w osoczu
Ramy czasowe: Zmiana całkowitych fosfolipidów w osoczu po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Porcję 400 μl zamrożonego PFP rozmrożono i odwirowano w celu usunięcia zdenaturowanego białka.
Do próbki PFP dodano 400 μl 0,9% NaCl, aby uzyskać łącznie 800 μl, a następnie dodano 30 μg fosfatydylocholiny (PC) i 15 μg wewnętrznych wzorców fosfatydyloetanoloaminy (PE) do analizy ilościowej.
Po ekstrakcji lipidów, oddzieleniu PC i PE oraz estryfikacji metylowej ekstraktów fosfolipidów osocza, próbki analizowano metodą GC.
|
Zmiana całkowitych fosfolipidów w osoczu po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
|
Stężenia profilu lipidowego w osoczu
Ramy czasowe: Zmiana stężenia profilu lipidowego w osoczu po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Porcję 250 μl zamrożonego PFP rozmrażano w temperaturze pokojowej za pomocą mieszadła rolkowego i wirowano przy 500 x g przez 5 minut w temperaturze pokojowej (Eppendorf Centrifuge 5415 R, DJBlabcare, Wielka Brytania).
Następnie próbkę poddano analizie analizatorem klinicznym RANDOX (RANDOX Daytona+ Analyser, Randox Laboratories Ltd, Wielka Brytania) pod kątem stężenia TC, TAG, HDL-C, LDL-C oraz stosunku TC/HDL-C.
|
Zmiana stężenia profilu lipidowego w osoczu po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
|
Stężenia stosunku TC/HDL-C w osoczu
Ramy czasowe: Zmiana stężenia stosunku TC/HDL-C w osoczu po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Porcję 250 μl zamrożonego PFP rozmrażano w temperaturze pokojowej za pomocą mieszadła rolkowego i wirowano przy 500 x g przez 5 minut w temperaturze pokojowej (Eppendorf Centrifuge 5415 R, DJBlabcare, Wielka Brytania).
Następnie próbkę analizowano za pomocą analizatora klinicznego RANDOX (RANDOX Daytona+ Analyser, Randox Laboratories Ltd, Wielka Brytania) pod kątem stosunku TC/HDL-C.
|
Zmiana stężenia stosunku TC/HDL-C w osoczu po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
|
Ciśnienie krwi
Ramy czasowe: Zmiana ciśnienia krwi po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Badanych poproszono o odpoczynek przez 10 minut przed wykryciem ciśnienia krwi, a następnie mankiet do pomiaru ciśnienia krwi został mocno umieszczony na ich lewym górnym ramieniu, około 2 cm powyżej łokcia ze wskaźnikiem na mankiecie nad tętnicą ramienną, aby rozpocząć pomiar.
Osoby badane powinny ułożyć ręce na wysokości serca, nie mówić i nie krzyżować nóg podczas pomiaru.
Pomiar wykonano trzy razy i odczekano 2 minuty pomiędzy każdym odczytem ((monitor ciśnienia krwi na ramieniu Omron M2, OMRON Healthcare Europe BV, Wielka Brytania).
Do uzyskania ostatecznego wyniku przyjęto średnią z trzech odczytów.
|
Zmiana ciśnienia krwi po okresie przyjmowania wynoszącym 12 tygodni
|
Współpracownicy i badacze
Tutaj znajdziesz osoby i organizacje zaangażowane w to badanie.
Sponsor
Sponsor
Współpracownicy
Współpracownicy
Śledczy
Śledczy
- Główny śledczy: Parveen Yaqoob, MA, DPhil, RNutr, University of Reading
Publikacje i pomocne linki
Osoba odpowiedzialna za wprowadzenie informacji o badaniu dobrowolnie udostępnia te publikacje. Mogą one dotyczyć wszystkiego, co jest związane z badaniem.
Przydatne linki
Daty zapisu na studia
Daty te śledzą postęp w przesyłaniu rekordów badań i podsumowań wyników do ClinicalTrials.gov. Zapisy badań i zgłoszone wyniki są przeglądane przez National Library of Medicine (NLM), aby upewnić się, że spełniają określone standardy kontroli jakości, zanim zostaną opublikowane na publicznej stronie internetowej.
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (RZECZYWISTY)
Rozpoczęcie studiów
16 lutego 2018
Zakończenie podstawowe (RZECZYWISTY)
Zakończenie podstawowe
30 listopada 2019
Ukończenie studiów (RZECZYWISTY)
Ukończenie studiów
30 marca 2021
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany
23 czerwca 2017
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
27 czerwca 2017
Pierwszy wysłany (RZECZYWISTY)
Pierwszy wysłany
29 czerwca 2017
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (RZECZYWISTY)
Ostatnia wysłana aktualizacja
7 listopada 2022
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
4 listopada 2022
Ostatnia weryfikacja
Ostatnia weryfikacja
1 listopada 2022
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
Inne numery identyfikacyjne badania
- UREC 17/18
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Nie
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Nie
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .
Badania kliniczne na Kapsułki z olejem rybim
-
NCT07019194Zakończony
-
NCT07258394Rekrutacyjny
-
NCT03719183Zakończony
-
NCT07066059Jeszcze nie rekrutacja
-
NCT06966245Rekrutacyjny
-
NCT01887808Zakończony
-
NCT04699760ZakończonyJakość życia | Wyniszczenie nowotworowe | Skutki uboczne
-
NCT02773784Zakończony
-
NCT04920825ZakończonyEndokrynologiczne i metaboliczne wtórne nadciśnienie