Rola oksygenazy hemowej w patogenezie uszkodzenia komórek wątrobowych w przebiegu przewlekłego zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu C (HCV)

Wirus zapalenia wątroby typu C (HCV) jest jednoniciowym dodatnim wirusem RNA należącym do rodziny Flaviviridae. HCV jest główną przyczyną przewlekłego zapalenia wątroby i postępującego włóknienia wątroby prowadzącego do marskości. Obecnie mechanizmy odpowiedzialne za uszkodzenie komórek wątrobowych nie są w pełni poznane. Postawiono hipotezę, że uszkodzenia oksydacyjne odgrywają rolę w chorobie wątroby wywołanej przez HCV, z reaktywnymi formami tlenu (ROS), generowanymi z hepatocytów zakażonych HCV i naciekających komórek odpornościowych. Utrzymywanie się nawracających uszkodzeń komórek wątrobowych prowadzi do procesu gojenia się ran, w którym stres oksydacyjny, odpowiedź zapalna, w której pośredniczą komórki odpornościowe i/lub cytokiny, oraz aktywacja komórek gwiaździstych wątroby (HSC) przyczyniają się do kaskady fibrogenezy. HCV może infekować jednojądrzaste komórki krwi obwodowej (PBMC) pacjentów z przewlekłym zakażeniem HCV. PBMC odgrywają kluczową rolę zarówno we wrodzonej, jak i nabytej odporności specyficznej dla antygenu i stanowią krytyczne składniki odpowiedzi immunologicznej. Oksygenaza hemowa (HO) jest enzymem ograniczającym szybkość w szlaku katabolicznym hemu. Rozszczepia prooksydacyjny hem na równomolowe ilości tlenku węgla (CO), wolnego żelaza i biliwerdyny, która jest szybko metabolizowana do bilirubiny przez reduktazę biliwerdyny. Ludzki gen HO-1 znajduje się na chromosomie 22q12 i zmiennej liczbie powtórzeń tandemowych zidentyfikowano polimorfizm (VNTR) w proksymalnym regionie promotora. Sugeruje się, że te wysoce polimorficzne powtórzenia (GT)n mogą zmieniać aktywność transkrypcyjną. W ostatnich latach doniesiono, że zwiększona aktywność enzymatyczna H O - prawdopodobnie poprzez tworzenie produktów bioaktywnych - ma działanie przeciwutleniające, cytoprotekcyjne i neuroprzekaźnikowe oraz odgrywa rolę w funkcjach przeciwzapalnych. CELE: CEL 1. Charakterystyka ekspresji HO w biopsjach wątroby u pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu C w porównaniu z ekspresją u pacjentów z innymi typami zapalenia wątroby (zwł. autoimmunologicznych) i prawidłowej tkanki wątroby. Zbadanie zależności między ekspresją HO a stężeniem wirusa zapalenia wątroby typu C, czasem trwania infekcji, stopniem zwłóknienia i stanu zapalnego, aktywnością ALT, AST, stężeniem bilirubiny, odpowiedzią na standardowe leczenie oraz poziomem apoptozy. CEL 2. Scharakteryzowanie ekspresji HO w PBMC u pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu C przed, w 12 tygodniu i po standardowym leczeniu (PEG-IFN+RBV). Korelacja ekspresji HO w PBMC ze stężeniem wirusa w surowicy i odpowiedzią na standardowe leczenie. CEL 3. Zbadanie polimorfizmów HO u pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu C. CEL 4. Zbadanie polimorfizmu UGT1A1 28 odpowiedzialnego za łagodną hiperbilirubinemię. Oczekiwane rezultaty: 1. Badanie to może wyjaśnić związek między rozwojem zwłóknienia wątroby i stanem zapalnym a ekspresją H O. 2. Ten projekt może po raz pierwszy pokazać związek między przewlekłą infekcją HCV a regulacją ekspresji HO w PBMC. 3.Projekt ten odpowie na pytanie, czy genetyczna predyspozycja, czyli polimorfizm długości promotora HO odpowiedzialny za jego niższą aktywność transkrypcyjną, może być czynnikiem ryzyka rozwoju zwłóknienia/marskości wątroby u pacjentów zakażonych wirusem zapalenia wątroby typu C. Polimorfizm UGT1A1 28 związany jest z niską częstością występowania chorób, w których występuje zwiększony stres oksydacyjny. Sugerujemy, że osoby zakażone HCV mogą mieć niską częstość występowania tego polimorfizmu lub polimorfizm ten może być związany z niską skutecznością leczenia przeciwwirusowego u tych osób.