Identyfikacja i leczenie mikroangiopatii zakrzepowych w allogenicznych przeszczepach komórek macierzystych

Badacze planują zarejestrować 120 dorosłych pacjentów poddawanych allogenicznemu przeszczepowi hematopoetycznych komórek macierzystych i obserwować ich seryjnie przez rok. Badacze będą zbierać i przechowywać osocze i PBMC w temperaturze -80oC oraz pobierać próbki biopsji rdzeniowej szpiku kostnego od wszystkich osób na początku badania, 28, 100, 190, 365 dni po przeszczepie oraz w czasie nawrotu pierwotnego nawrotu choroby lub rozwoju TMA. Te punkty czasowe, procedury szpiku kostnego i pobieranie krwi są częścią zwykłej i zwyczajowej obserwacji każdego pacjenta allogenicznego HSCT w naszej instytucji. Dzięki tym próbkom pacjentów badacze:

1. Określić częstość występowania wszystkich TMA spełniających kryteria niedokrwistości hemolitycznej z ujemnym wynikiem testu Coombsa, trombocytopenii (spadek o 25% w stosunku do wartości początkowej) i podwyższonej (2x w stosunku do wartości wyjściowej) LDH, z zajęciem schistocytów i narządów (zwykle zwiększone stężenie kreatyniny lub nowy mikroskopowy krwiomocz lub białkomocz)
2. Określić częstość występowania TMA podobnego do aHUS, tj. TMA charakteryzującego się aktywnością ADAMTS13 w osoczu >5% z objawami klinicznymi i laboratoryjnymi, która utrzymuje się po odstawieniu kalcyneuryny lub inhibitora mTOR przez okres półtrwania (3-7 dni, w zależności od leku) oraz wykluczenie lub leczenie podstawowej infekcji ogólnoustrojowej lub GvHD.
3. Określenie aktywacji składnika dopełniacza, profilu cytokin prozapalnych i wyjściowych mutacji dopełniacza. Obejmie to oparte na teście ELISA pomiary C5a, C5b-9, MASP-1-3 w osoczu, czynnika martwicy nowotworów (TNF)-α i interferonu-γ oraz analizę mutacji dopełniacza przed przeszczepem.
4. Oceń osocze uczestników pod kątem zdolności do indukowania uszkodzenia pierwotnych ludzkich komórek śródbłonka mikronaczyniowego (MVEC) oraz zdolności przeciwciała monoklonalnego anty-C5 (mAb) (Alexion, ekulizumab (Soliris)) i anty-MASP2 (Omeros, OMS721) mAb , aby zablokować te zmiany w ustalonym przez badaczy modelu.
5. Określić stopień odkładania się C5b-9 w sinusoidalnych komórkach śródbłonka CD34+ za pomocą immunohistochemii (IHC) badając biopsje rdzenia szpiku kostnego pobrane podczas każdej wizyty pacjenta oraz w czasie rozwoju TMA.
6. Skoreluj zmiany w biomarkerach osocza, sinusoidalne odkładanie C5b-9 w szpiku kostnym i model uszkodzenia osocza-MVEC in vitro z interwencjami terapeutycznymi i wynikami leczenia, wybranymi przez rekordowego uczestnika przeszczepu w tej kohorcie obserwacyjnej.