Badanie CFit — punkt odniesienia

Uczestnicy i rekrutacja Niniejsze badanie będzie pilotażowym, przekrojowym badaniem obejmującym osoby z CFRD (n = 15), a także grupy kontrolne dopasowane pod względem wieku i płci bez cukrzycy (n = 15) oraz dopasowane pod względem wieku i płci zdrowych uczestników kontroli (n = 15). Uczestnicy będą rekrutowani z przychodni dla dorosłych i dzieci z mukowiscydozą w ramach sieci Southampton CF. Zdrowi uczestnicy kontroli będą rekrutowani z University of Portsmouth i okolicy. Osoby z mukowiscydozą zostaną przebadane w laboratorium znajdującym się na oddziale mukowiscydozy w Szpitalu Ogólnym w Southampton i/lub na Wydziale Nauk o Sporcie i Ćwiczeniach (Uniwersytet w Portsmouth), w zależności od wygody uczestnika. Wszyscy zdrowi uczestnicy z grupy kontrolnej będą uczestniczyć w Wydziale Nauk o Sporcie i Ćwiczeniach na Uniwersytecie w Portsmouth.

Wizyta 1 Podczas tej wizyty członek zespołu badawczego, który uzyskał ważną świadomą zgodę i został przeszkolony w zakresie GCP, w pełni objaśni arkusz informacyjny i protokół badania, a także odpowie na wszelkie pytania, aby upewnić się, że wszystkie zainteresowane strony mają jasność co do wymogów badania. Następnie uzyskana zostanie w pełni świadoma pisemna zgoda. Ponadto od osób poniżej 16 roku życia zostanie uzyskana świadoma pisemna zgoda.

Po uzyskaniu zgody uczestnicy uzyskają spoczynkową czynność płuc (natężoną pojemność życiową, natężoną objętość wydechową w ciągu 1 sekundy, średni przepływ wydechowy i szczytowy przepływ wydechowy) oraz pomiary antropometryczne (masa ciała, wzrost i procent tkanki tłuszczowej). Kolejnym celem tej wizyty jest przyzwyczajenie wszystkich uczestników do ćwiczeń na ergometrze rowerowym w ramach przygotowań do CPET na wizycie 2, w szczególności utrzymywanie określonej kadencji przy danej mocy wyjściowej. Odpowiednie ustawienia siedzenia i kierownicy ergometru zostaną wprowadzone i odnotowane podczas wizyty 2. Ponadto zostaną w pełni wyjaśnione protokoły uzyskiwania ocen odczuwanego wysiłku i duszności. Na koniec uczestnik zostanie poinstruowany, aby unikał spożywania płynu do płukania jamy ustnej przez cały okres badania ze względu na dowody sugerujące, że może to wpływać na wchłanianie azotanów z diety.

Wizyta 2 Uczestnicy przybywają do laboratorium o godzinie 19:00 ± 2 godziny. Zostaną poinstruowani, aby przybyć 2 godziny po posiłku, unikając kofeiny przez > 12 godzin, a także pokarmów bogatych w azotany, alkoholu i wyczerpujących ćwiczeń fizycznych przez > 24 godziny.

Po przybyciu CGM zostaną przymocowane do wewnętrznej powierzchni ramienia i noszone przez kolejne 14 dni. Oprócz tego, akcelerometry noszone na biodrach, a także dzienniki aktywności fizycznej i żywności o określonej godzinie będą dystrybuowane i wypełniane przez 14 dni wraz z CGM. Spoczynkowa czynność płuc uczestników zostanie oceniona za pomocą procedur spirometrycznych opisanych poniżej, a spoczynkowa próbka krwi zostanie pobrana przez nakłucie żyły do ​​analizy osocza [NO-(₂)] i ET-1. Dodatkowo ergometr rowerowy CPET z supramaksymalną (Smax) fazą weryfikacyjną zostanie wykorzystany do określenia wydolności tlenowej, a druga próbka krwi żylnej zostanie pobrana bezpośrednio po zakończeniu wysiłku w celu analizy osocza [NO-(₂)] i ET-1. Całkowita objętość krwi pobranej podczas tej 2-godzinnej wizyty wyniesie około 20 ml.

Wizyta 3 Uczestnicy będą zobowiązani do przybycia do laboratorium ≥ 3 dni po wizycie 1, o godzinie 08:00 ± 2 godziny, po całonocnym poście (> 10 godzin). Ponadto uczestnicy zostaną poinstruowani, aby unikać pokarmów bogatych w azotany, kofeiny, alkoholu i wyczerpujących ćwiczeń przez 24 godziny przed przyjazdem.

Po przyjeździe uczestnicy zostaną poddani opisanym poniżej protokołom jonoforezy acetylocholiny (ACh) i insuliny, w tym 5 pomiarom ciśnienia spoczynkowego. Bezpośrednio po tym czynność płuc uczestnika zostanie oceniona za pomocą spirometrii. Uczestnicy zostaną poproszeni o odpoczynek i zapewnią rozrywkę przez kolejne 60 minut. Procedury jontoforezy zostaną następnie powtórzone w celu oceny krótkoterminowej zmienności testu-powtórnego testu procedur jonoforezy. Następnie kaniula zostanie wprowadzona do żyły przez przeszkolonego flebotomistę przed 3-godzinnym OGTT i pobrana zostanie wyjściowa próbka krwi (mierząca wszystkie poniższe biomarkery). Próbki krwi żylnej zostaną pobrane 30, 60, 90, 120 i 180 minut po spożyciu glukozy w celu analizy glukozy, insuliny, aktywnego peptydu glukagonopodobnego-1 (GLP-1), TNF-α, rozpuszczalnej cząsteczki adhezyjnej komórek naczyniowych -1 (sVCAM-1), IL-6, [NO-(2)] i ET-1. NT, całkowity glutation (tGSH) i całkowita cysteina (tCys) będą analizowane 120 minut po spożyciu glukozy. Całkowita objętość krwi pobranej podczas tej 5-godzinnej wizyty wyniesie około 176 ml. Dodatkowo procedury jonoforezy zostaną powtórzone po 30, 90 i 150 minutach od spożycia glukozy (tj. godzinowe pomiary funkcji śródbłonka naczyń mikrokrążenia).

Kontrolne CGM, akcelerometry i dzienniki aktywności fizycznej/jedzenia zostaną uzupełnione przez 14 dni po wizycie 1. Członek zespołu badawczego odbierze je z preferowanej przez uczestnika lokalizacji.