Teste rápido de fenótipo de triagem para avaliar a atividade da enzima CYP 2C19 usando o isótopo estável [13C]Pantoprazol

O objetivo deste estudo é desenvolver um método rápido e confiável que irá diagnosticar a função hepática do CYP2C19 e pode ser usado rotineiramente na prática clínica. Especificamente, propomos testar o pantoprazol - 13C como uma sonda para determinar o fenótipo CYP2C19. Pantoprazol, 5-(difluorometoxi)-2-[[(3,4-dimetoxi-2-piridil)-metil]sulfinil]-1H-benzimidazol, é um sulfóxido de benzimidazol substituído e um inibidor seletivo e de ação prolongada da bomba de prótons. Este fármaco é amplamente utilizado clinicamente no tratamento da doença do refluxo gastroesofágico grave e no tratamento da ulceração duodenal e gástrica. O pantoprazol é extensivamente metabolizado no fígado, com quase 80% de uma dose oral ou intravenosa excretada como metabólitos na urina. O principal metabólito é formado por O-desmetilação na posição 4 do anel piridínico pelo CYP2C19, seguido de conjugação com sulfato (M2), enquanto o pantoprazol sulfona formado pelo CYP3A representa uma via metabólica menor(20). O papel crítico do CYP2C19 na depuração in vivo das drogas é ainda demonstrado pelo fato de que voluntários saudáveis ​​que são PMs dessa enzima alcançam uma exposição de pantoprazol aproximadamente 6 vezes maior do que aqueles que são metabolizadores extensos do CYP2C19(20). Esta proposta de conceito explora o uso do rótulo 13C que é incorporado no sítio O-metil do pantoprazol, que foi projetado especificamente para a O-desmetilação mediada por CYP2C19 (Figura 1). Então, durante a catálise, a reação CYP2C19-pantoprazol no fígado resulta na liberação de 13CO2 que é então eliminado do corpo através da respiração pulmonar expirada. A quantificação subsequente de 13CO2 permite a determinação indireta da enzima hepática CYP2C19 e, portanto, a farmacocinética de seus substratos. As principais características do teste de respiração 13C significam que este teste seria não invasivo, não radioativo, seguro e simples. O protocolo em geral pode ser executado rapidamente (uma hora ou menos após a administração de pantoprazol) e pode ser determinado diretamente no ponto de atendimento (por exemplo, hospitais e consultórios médicos) usando instrumentação relativamente barata (espectrômetro UBiT-IR300IR; Meretek) e os pacientes não precisam esperar horas ou dias pelos resultados do diagnóstico. Este teste pode ser particularmente importante para sondar a atividade do CYP2C19 em lactentes, crianças, mulheres grávidas e lactantes, idosos avessos ao uso de agulhas ou com problemas de saúde e indivíduos com medo de coletas de sangue.