Avaliação do Microbioma Intestinal em Crianças Obesas

O objetivo deste estudo é investigar e comparar a composição do microbioma intestinal em pacientes com obesidade apenas para pacientes com obesidade e doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA). Além disso, investigaremos a relação entre alterações no microbioma intestinal, ativação imune e progressão da DHGNA para Esteatohepatite Não Alcoólica (NASH). Nossa hipótese é que as alterações no microbioma intestinal estão associadas ao aumento da ativação imune e à progressão da DHGNA associada à obesidade. Com base nesta hipótese, propomos os seguintes objetivos:

Objetivo 1. Identificar e inscrever uma coorte pediátrica com obesidade ou obesidade/DHGNA para estudar o papel do microbioma intestinal no desenvolvimento da DHGNA.

1. Inscreva os participantes através do programa NEW Kids para tratamento da obesidade pediátrica no Children's Hospital of Wisconsin (CHW). Identifique e classifique os participantes por meio de avaliação clínica inicial, colete metadados clínicos e obtenha e processe amostras de sangue e fezes para análise. Demonstre a viabilidade mostrando que os participantes podem ser recrutados e participar do protocolo de estudo específico.
2. Acompanhe a população do estudo por meio de intervenção nutricional/exercício, com coleta de acompanhamento de dados clínicos, fezes e amostras de sangue.

Objetivo 2. Caracterizar o microbioma intestinal por meio de PCR quantitativo e análise de sequenciamento de alto rendimento de amostras de fezes em participantes com obesidade e obesidade/DHGNA.

1. Demonstre a viabilidade mostrando que alíquotas de amostragem de amostras fecais de pacientes podem ser analisadas com sucesso pelos métodos propostos e produzir resultados consistentes para amostras duplicadas.
2. Compare os resultados do sequenciamento e a análise metagenômica para grupos de estudo com atenção especial à composição bacteriana e capacidade metabólica associada à coleta de energia, transporte de lipídios e carboidratos, aumento da integridade da barreira epitelial e metabolismo da colina.
3. Investigar se a intervenção (nutricional/exercício) resulta em alterações longitudinais no microbioma intestinal.

Objetivo 3. Caracterizar evidências de inflamação sistêmica por proteína C-reativa (PCR), fator de necrose tumoral alfa (TNF-alfa) fator de crescimento transformador beta 1 (TGF-beta e níveis de proteína de ligação a LPS (LBP), e analisar os resultados em relação aos o microbioma intestinal e a presença de DHGNA.

1. Comparar os níveis de marcadores inflamatórios sistêmicos de participantes com obesidade versus obesidade/DHGNA
2. Investigar se a intervenção (nutricional/exercício) resulta em alterações longitudinais na inflamação sistêmica.