Múltiplas Deficiências Nutricionais Causando Demência do Tipo Alzheimer (ALZ-vit)

A demência do tipo Alzheimer (AD) é uma doença grave que afeta 60-70.000 pessoas na Noruega, com um custo estimado de 12 bilhões de NOK (coroas norueguesas) por ano. O Departamento de Assuntos Sociais e Saúde iniciou programas de intervenção psicossocial para pacientes e cuidadores, no entanto, nenhuma pesquisa sobre etiologia, patologia ou prevenção da doença.

Em um estudo piloto anterior realizado em pacientes com DA em estágio moderado, houve diminuição significativa nas concentrações das vitaminas tiamina, piridoxal-5 fosfato, ácido ascórbico, retinol, cobalamina e aumento da homocisteína, em comparação com o grupo controle de idosos saudáveis . A análise de regressão logística mostrou que 5 modelos usando diferentes combinações de vitaminas e proteínas espinhais, todos separando completamente os pacientes com demência dos controles saudáveis.

O estudo atual é uma replicação do estudo mencionado acima e incluirá até 120 pacientes com DA com comprometimento cognitivo leve (MCI) ou demência leve (MEEM acima de 24/30) e até 60 controles idosos saudáveis. A medição de vitaminas e nutrientes no sangue e líquido espinhal é o elemento central do estudo. As amostras serão, portanto, obtidas de pacientes e controles que se abstiveram de suplementos nas últimas quatro semanas.

As medidas de resultados incluirão análises bioquímicas de nutrientes, expressões de peroxidação, expressões de danos no DNA, proteômica e metabolômica do fluido espinhal, sangue e urina, análise de microarray de diferentes subgrupos de deficiência nutricional, juntamente com as investigações diagnósticas de rotina realizadas na clínica de memória e uma avaliação nutricional.

Os pacientes e os controles saudáveis ​​receberão apenas informações sobre resultados de exames que fazem parte da investigação de rotina na clínica de memória, isso de acordo com a Lei Norueguesa de Biotecnologia e com a permissão dos Comitês Nacionais de Ética em Pesquisa da Noruega.

Além das vitaminas listadas como desfechos primários, serão realizadas as seguintes dosagens:

1. Medições de isoprostano: Os achados de aumento de F2-α-isoprostano no líquido cefalorraquidiano próximo ao órgão doente, e não no plasma, tornam importante confirmar esses achados. A medição de isoprostano no SNC pode se tornar um parâmetro importante em estudos prospectivos de tratamento, onde o tratamento real deve pelo menos normalizar o achado patológico.
2. O aumento de 8 hidroxi-2-desoxiguanosina no líquido cefalorraquidiano ou na urina revela danos no DNA, sugerindo mecanismos adicionais para o desenvolvimento da DA.

3. Líquido espinhal: Nutrientes no líquido espinhal, expressões de peroxidação aumentada como F2-α-isoprostano, proteínas tau e possivelmente com padrão metabólico de metodologia LC/MS (metabolômica) e diferentes proteínas (proteômica).

   • Proteômica; determinação de perfis proteicos. A tecnologia emergente de proteômica quantitativa baseada em espectrometria de massa (MS) fornece uma ferramenta poderosa para avaliar sistematicamente e quantitativamente diferenças quantitativas em perfis de proteínas. A proteômica baseada em descoberta compara o proteoma de uma amostra doente versus normal em escala global e tem sido amplamente aplicada para estudar várias doenças humanas com o objetivo de identificar biomarcadores e/ou revelar a patogênese de doenças. Neste estudo, amostras de proteínas de controle e doentes serão marcadas com diferentes isótopos estáveis, digeridas em peptídeos e analisadas por LCMS. Diferenças quantitativas das proteínas desses grupos serão realizadas por espectrômetro de massa híbrido de última geração, LTQ XL-Orbitrap. O instrumento Orbitrap possui poder de resolução, precisão de massa e sensibilidade extremamente altos.
   • Metabonomics: Metabonomics visa medir e modelar matematicamente as mudanças nas concentrações de metabólitos encontrados em fluidos e tecidos biológicos. A espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN) permite a detecção e quantificação de compostos em grandes misturas, como os produtos do metabolismo em fluidos biológicos e tecidos. Existem centenas desses metabólitos encontrados no líquido cefalorraquidiano, plasma, soro e urina. A espectroscopia de RMN oferece a vantagem de medir suas concentrações com sensibilidade micromolar enquanto requer convenientemente apenas uma pequena preparação da amostra. Em estudos recentes envolvendo grandes conjuntos de espectros, a variação dos resultados mostrou ser tão pequena quanto 2%, refletindo um alto grau de reprodutibilidade. Ao identificar padrões na impressão digital metabólica do organismo, pode-se estudar os efeitos da dieta, drogas e doenças usando estatísticas multivariadas, como análise de componentes principais e tentativas parciais de mínimos quadrados para interpretar espectros de NMR.

4. Análises genéticas: medição de m-RNA com perfis SNP para

   • reparo do DNA.
   • Componentes ativos no processamento de APP e Abeta.
   • Incluirá, se possível, sequenciamento do genoma e/ou GWAS.