Projeto Centenário Multiétnico Israelense (IMECP)

O número de homens e mulheres que atingem a idade avançada está aumentando rapidamente nos países desenvolvidos e a expectativa de vida já dobrou desde o início do século passado. Paralelamente, torna-se cada vez mais comum a proporção dos que chegaram à velhice avançada sem grandes complicações de saúde. Esse fenômeno levou a esforços de pesquisa concentrados para entender os correlatos e os mecanismos da longevidade humana prolongada e do envelhecimento saudável. Durante décadas, a perspectiva da saúde pública enfatizou os fatores ambientais e de estilo de vida como tendo efeitos benéficos na saúde e na prevenção de doenças na população em geral. Insights biológicos importantes foram alcançados ao examinar a base genética da longevidade e do envelhecimento saudável, especialmente entre indivíduos que demonstram um fenótipo de envelhecimento saudável favorável. A epigenética, definida como alterações hereditárias na função ou fenótipos dos genes, na ausência de alterações na sequência do DNA, revolucionou o conceito de como a genética afeta o risco de doenças. Demonstrou-se que a epigenética está associada ao risco de câncer e distúrbios autoimunes. Além disso, mudanças epigenéticas em locais específicos parecem aumentar com a idade, portanto, podem servir como índices para a idade cronológica. Este pano de fundo nos levou às nossas hipóteses centrais de que: i) as mudanças epigenéticas associadas ao envelhecimento saudável podem servir como marcadores para um tempo de vida saudável, e ii) as mudanças epigenéticas podem representar um dos mecanismos centrais pelos quais o envelhecimento predispõe a muitos envelhecimentos. doenças relacionadas e, portanto, afeta o envelhecimento saudável. Propomos testar essas hipóteses dentro da coorte multiétnica de estudo de centenários de Israel (que inclui todos os cidadãos de Israel com mais de 95 anos de idade; uma estimativa de 1 em 5.000 da população). Avaliaremos sistematicamente as alterações da metilação genômica em três subgrupos principais, o que significa três pontos principais na vida humana: Idade 60±5 anos (principal idade de início de doenças associadas à idade e também considerada como o início da velhice, idade 80± 5 anos (esperança média de vida no mundo ocidental) e idade de 100±5 anos (longevidade excepcional). Nossos centenários incluem 3 subgrupos: SOBREVIVENTES: aqueles que sobrevivem e se tornam centenários, apesar do início precoce de comprometimento cognitivo, incapacidade funcional ou doenças graves associadas à idade, como diabetes, doença vascular ou câncer, no início da velhice, ou seja, idade de 60±5 anos (longa vida útil, mas curta vida saudável). RETARDADORES: aqueles que desenvolvem doenças relacionadas à idade ou deficiência cognitiva/física muito mais tarde do que a população de controle, ou seja, na idade de 80±5 anos em vez de 60 anos (portanto, têm uma vida saudável mais longa). DODGERS: aqueles que não conseguem desenvolver doenças relacionadas à idade ou deficiência cognitiva/física ao longo de sua vida. Iremos comparar estes grupos com controlos saudáveis ​​sem história familiar de longevidade em dois grupos de referência, nomeadamente 60±5 anos e 80±5 anos, comparando-os com os grupos sobreviventes e retardatários, respetivamente. Prevemos que os indivíduos exibirão diferenças na metilação em locais distintos entre si, em contraste com indivíduos saudáveis.

Assim, nossos objetivos propostos são:

1. Caracterizar a coorte de estudo de centenário multiétnico de Israel (I-MECS).
2. Para rastrear, catalogar e anotar variantes de metilação do epigenoma em cinco grupos diferentes (a. Sobreviventes, b. Retardadores, c. Dodges, d. controle saudável de 60±5 anos, e e. controles saudáveis ​​de 80±5 anos).
3. Para validar loci metilados diferenciais classificando e priorizando usando MassARRAY da Sequenom.
4. Objetivo exploratório (dependendo de tempo e disponibilidade de financiamento) - Estabelecer padrões de expressão usando um qRT-PCR (Polymerase Chain Reaction) Roche light-cycler dos loci epigenéticos candidatos identificados nos Objetivos 1, 2 e 3, bem como genes específicos (como metiltransferase do ácido desoxirribonucléico e genes supressores de tumor) em células sanguíneas da população inicialmente rastreada.

Para testar nossas hipóteses, propomos empregar um novo ensaio de metilação em todo o genoma de alto rendimento, ou seja, HELPtag. Além disso, utilizaremos uma combinação de estudos de associação epigenômica ampla (EWAS) para identificar os loci epigenéticos mais distintos que mostram maior metilação diferencial. Em seguida, realizaremos a validação multilocus para o status de metilação usando o MassARRAY.