Genotipagem de DNA livre de células do supernante Ebus-tbna em Nsclc (CELTICS)

A ampla aceitação do diagnóstico de "biópsia líquida" no tratamento de pacientes com câncer avançado destaca o desejo de melhorar o acesso ao tumor, permitindo a genotipagem precisa do tumor (1). A genotipagem do cfDNA plasmático agora é rotina para a detecção de mutações de driver EGFR no diagnóstico de NSCLC, ou para detecção da mutação EGFR T790M após resistência a TKI, e é uma abordagem emergente para a detecção de outros drivers (mutações HER2 ou BRAF, ALK ou ROS1 fusões…) (2) ou a estimativa da carga de mutação tumoral (TMB) (3). No entanto, as plataformas de genotipagem de plasma mais sensíveis ainda têm uma sensibilidade de apenas 70%-80%, de modo que um resultado negativo requer confirmação de biópsia de tecido. Isso representa um desafio clínico porque a genotipagem plasmática negativa está correlacionada com disseminação metastática mais limitada e menor carga tumoral, de modo que a biópsia desses pacientes pode ser ainda mais desafiadora. Como a biópsia invasiva continua sendo parte integrante da estratégia diagnóstica, são necessários métodos para maximizar o rendimento desses procedimentos de biópsia.

Existe um paradoxo atual entre a necessidade de grandes quantidades de tecido para análise multiplex de um número crescente de drivers e marcadores de resposta à imunoterapia (PD-L1, TMB) e o desenvolvimento de procedimentos de biópsia minimamente invasivos que resultam em amostras limitadas . Até 25% dos pacientes são assim tratados sem conhecimento do perfil molecular de seu tumor (4). Em particular, 20% da aspiração por agulha transbrônquica por ultrassonografia endobrônquica (EBUS-TBNA) são rejeitados da genotipagem devido à falta de tecido (5) após etapas de diagnóstico que consomem tempo e tecido que às vezes não são necessárias (configuração de resistência). O DNA tumoral circulante é uma abordagem emergente para a genotipagem do câncer, mas a sensibilidade é limitada a 70-80% (6) devido à secreção inconsistente do tumor e baixas concentrações de DNA, de modo que a biópsia de tecido ainda é rotineira. Além disso, a viabilidade da avaliação de TMB no tecido é de apenas 60% (provavelmente muito menos em amostras de EBUS-TBNA) (7) e aproximadamente 80% no plasma (sangue TMB, bTMB) (3).

A presença de cfDNA em vários fluidos biológicos e a viabilidade de detectar mutações de interesse (geralmente visando apenas EGFR) nesses fluidos (urina, líquido pleural, LCR) foram claramente demonstradas (8-12), enquanto o sangue é o mais amplamente estudado substrato de biópsia líquida em NSCLC avançado.

Além disso, mostramos em um estudo de prova de conceito, investigando várias amostras de PAAF em um número limitado de pacientes, que o sobrenadante das amostras de citologia (geralmente descartadas) é uma rica fonte de DNA. Nossos resultados sugerem que o DNA livre sobrenadante (sfDNA) pode ser usado para linha de base e genotipagem de resistência (13).