Genotipado de ADN libre de células sobrenadantes Ebus-tbna en Nsclc (CELTICS)

La amplia adopción de diagnósticos de "biopsia líquida" en el cuidado de pacientes con cáncer avanzado destaca el deseo de un mejor acceso al tumor que permita una genotipificación tumoral precisa (1). El genotipado de cfDNA en plasma ahora es rutinario para la detección de mutaciones conductoras de EGFR en el momento del diagnóstico de NSCLC, o para la detección de la mutación EGFR T790M después de la resistencia a TKI, y es un enfoque emergente para la detección de otros impulsores (mutaciones HER2 o BRAF, ALK o ROS1 fusiones…) (2) o la estimación de la carga de mutación tumoral (TMB) (3). Sin embargo, las plataformas de genotipado de plasma más sensibles todavía tienen una sensibilidad de solo el 70%-80%, por lo que un resultado negativo requiere la confirmación de una biopsia de tejido. Esto plantea un desafío clínico porque la genotipificación plasmática negativa se correlaciona con una diseminación metastásica más limitada y una menor carga tumoral, de modo que la biopsia de estos pacientes puede ser aún más desafiante. Debido a que la biopsia invasiva sigue siendo una parte integral de la estrategia de diagnóstico, se necesitan métodos para maximizar el rendimiento de estos procedimientos de biopsia.

Existe una paradoja actual entre la necesidad de grandes cantidades de tejido para el análisis multiplex de un número cada vez mayor de impulsores y marcadores de respuesta a la inmunoterapia (PD-L1, TMB) y el desarrollo de procedimientos de biopsia mínimamente invasivos que resultan en muestras limitadas. . Así, hasta un 25% de los pacientes son tratados sin conocer el perfil molecular de su tumor (4). En particular, el 20 % de las ecografías endobronquiales por aspiración transbronquial con aguja (EBUS-TBNA) se rechazan del genotipado debido a la falta de tejido (5) después de pasos de diagnóstico que requieren mucho tiempo y tejido y que a veces no son necesarios (configuración de resistencia). El ADN tumoral circulante es un enfoque emergente para la determinación del genotipo del cáncer, pero la sensibilidad está limitada al 70-80% (6) por la diseminación inconsistente del tumor y las bajas concentraciones de ADN, por lo que la biopsia de tejido sigue siendo rutinaria. Además, la viabilidad de la evaluación de TMB en tejido es solo del 60 % (probablemente mucho menor en muestras EBUS-TBNA) (7) y aproximadamente el 80 % en plasma (TMB en sangre, bTMB) (3).

Se ha demostrado claramente la presencia de cfDNA en varios fluidos biológicos y la viabilidad de detectar mutaciones de interés (generalmente dirigidas solo al EGFR) en estos fluidos (orina, líquido pleural, LCR) (8-12), mientras que la sangre es el más estudiado. sustrato de biopsia líquido en NSCLC avanzado.

Además, demostramos en un estudio de prueba de concepto, investigando varios especímenes FNA en un número limitado de pacientes, que el sobrenadante de las muestras de citología (generalmente descartado) es una fuente rica de ADN. Nuestros resultados sugieren que el ADN libre del sobrenadante (sfDNA) se puede utilizar para el genotipado de referencia y de resistencia (13).