Exploração da atividade do DNA localizado fora do núcleo celular para amplificar a inflamação na doença inflamatória intestinal em crianças através da via biológica GMP-AMP sintase cíclica (cGAS) - estimulador de genes de interferon (STING) (ROXANE)
14 de junho de 2023 atualizado por: Centre Hospitalier Régional d'Orléans
Papel pró-inflamatório do DNA extracelular na doença inflamatória intestinal em crianças: estudo da via cGAS-STING
A frequência de doenças inflamatórias intestinais em crianças (DII) - doença de Crohn (DC), colite ulcerativa (CU) está aumentando constantemente.
A DII de início pediátrico representa uma entidade nosológica diferente (da DII do adulto) por causa de sua maior atividade inflamatória, sua extensão anatômica significativa e seu caráter estenótico e/ou fistulizante, às vezes desde o diagnóstico.
As lesões intestinais são devidas à desregulação do sistema imunológico intestinal, mas a causa é desconhecida.
Os investigadores levantam a hipótese de que o DNA extranuclear participa da amplificação da resposta inflamatória nos níveis intestinal e sanguíneo durante a DII pediátrica por meio da via cGAS-STING.
Os investigadores analisarão amostras de sangue e fezes e biópsias colônicas de crianças doentes e participantes de controle com idades entre 6 e 17 anos.
Os investigadores pensam que este estudo irá fornecer uma melhor compreensão dos mecanismos envolvidos na IBD pediátrica, avaliar o local da via cGAS-STING, identificar potenciais biomarcadores de IBD pediátrica e novos potenciais alvos terapêuticos baseados em particular na inibição da cGAS- via STING.
Visão geral do estudo
Status
Recrutamento
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Doenças inflamatórias intestinais em crianças (DII)-doença de Crohn (DC), colite ulcerosa (CU) são patologias graves que podem afetar todo o trato digestivo. Sua incidência anual está, no entanto, aumentando constantemente.
As DII são patologias multifatoriais complexas cuja causa ainda hoje é desconhecida. A DII ocorre em um fundo genético predisponente na presença de fatores exógenos e alteração da microbiota intestinal. As lesões intestinais são devidas à desregulação do sistema imunológico intestinal com aumento da secreção de citocinas pró-inflamatórias em detrimento das citocinas anti-inflamatórias.
A DII de início pediátrico representa uma entidade nosológica diferente (da DII do adulto) por causa de sua maior atividade inflamatória, sua extensão anatômica significativa e seu caráter estenótico e/ou fistulizante, às vezes desde o diagnóstico. O seu impacto não é apenas individual (retardo do crescimento, atraso da puberdade, perturbações psicológicas), mas também familiar/parental, escolar e social. Essas particularidades justificam que a pesquisa biomédica se debruce sobre ela de forma mais específica.
DNA extracelular e extranuclear (enDNA) desempenham um papel importante na imunidade inata, estimulando respostas pró-inflamatórias e ativando a produção de interferon tipo I. A ação pró-inflamatória do endDNA é mediada pela enzima cGAS, proteína STING, toll-like receptor 9 (TLR9) e o complexo inflamassoma NLRP3.
Os investigadores levantam a hipótese de que o endDNA participa da amplificação da resposta inflamatória nos níveis intestinal e sanguíneo durante a DII pediátrica por meio da via cGAS-STING. Eles também levantam a hipótese de que existem ligações entre a via cGAS-STING e outras vias envolvidas na DII pediátrica, como NOD2 e autofagia. Os investigadores analisarão amostras de sangue e fezes e biópsias colônicas de crianças doentes e controles com idades entre 6 e 17 anos. Os investigadores pensam que este estudo irá fornecer uma melhor compreensão dos mecanismos envolvidos na IBD pediátrica, avaliar o local da via cGAS-STING, identificar potenciais biomarcadores de IBD pediátrica e novos potenciais alvos terapêuticos baseados em particular na inibição da cGAS- via STING.
Tipo de estudo
Intervencional
Inscrição (Estimado)
40
Estágio
- Não aplicável
Contactos e Locais
Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.
Contato de estudo
- Nome: Georges DIMITROV, MD
- Número de telefone: +33238613390
- E-mail: georges.dimitrov@chr-orleans.fr
Locais de estudo
-
-
-
Orléans, França
- Recrutamento
- CHR Orleans
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Contato:
- Georges DIMITROV, MD
-
Investigador principal:
- Georges DIMITROV
-
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Critérios de participação
Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
- Filho
Aceita Voluntários Saudáveis
Não
Descrição
Critério de inclusão:
- Participantes com idades compreendidas entre os 6 anos inclusive e os 17 anos inclusive
- meninos e meninas
- Apresentar uma DII ou suspeita de DII
- Exigir uma colonoscopia para diagnóstico ou acompanhamento ou outro motivo (dor abdominal, diarreia, sangramento retal, perda de peso) não confirmando o diagnóstico de doença de Crohn ou colite ulcerosa
DII ativa se:
- DC: pontuação PCDAI >5 e PCR>20mg/L e calprotectina fecal>400 µg/g
- UC: pontuação PUCAI>10 e calprotectina fecal>250 µg/g
DII em remissão se:
- DC: pontuação PCDAI <5 e PCR <20mg/L e calprotectina fecal <400 µg/g
- UC: pontuação PUCAI <10 e calprotectina fecal < 250 µg/g
- Pacientes e seus pais que consentiram em participar do estudo
Critério de exclusão:
- Recusa do participante e/ou de um de seus pais
- Peso corporal menor ou igual a 20 kg
- Nível de hemoglobina no sangue menor ou igual a 9 g/dl
- Recusa ou contraindicação à anestesia geral
- Coexistência de patologia crônica grave e/ou tratamento que possa interferir nos resultados do estudo; exemplo: trissomia 21, tratamento com hormônio de crescimento etc.
- Pessoa protegida (sob tutela ou curatela)
- Pessoa sob proteção legal
- Pessoa não filiada a um regime de segurança social
- Mulher grávida ou amamentando
Plano de estudo
Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Finalidade Principal: Pesquisa de serviços de saúde
- Alocação: N / D
- Modelo Intervencional: Atribuição de grupo único
- Mascaramento: Nenhum (rótulo aberto)
Armas e Intervenções
Grupo de Participantes / Braço |
Intervenção / Tratamento |
|---|---|
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Outro: Pacientes com amostras
Amostras de sangue e fezes e biópsias colônicas serão analisadas e comparadas entre 3 grupos de participantes: 1/ DII ativa; 2/DII inativa; 3/Controla "não DII".
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Amostras de sangue e fezes serão realizadas
biópsias colônicas serão analisadas
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Quantidade de mRNA específico para cGAS colônico
Prazo: Linha de base
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a comparação, entre os 3 grupos de pacientes, da quantidade de mRNA específico do cGAS colônico expresso como o número de "reads" durante o sequenciamento do RNA (RNAseq), por um teste U de Mann-Whitney.
Prevê-se desde o início comparar os grupos 2 a 2, independentemente do resultado de um teste global como o teste de Kruskal-Wallis.
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Linha de base
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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diferença quantitativa da quantidade de mtDNA circulante
Prazo: Linha de base
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encontrar diferenças quantitativas entre os 3 grupos quanto ao mtDNA circulante, o DNA total circulante, pela técnica de qPCR: por sequências de primers específicos para identificar a origem do DNA (mitocondrial ou nuclear).
Os resultados serão expressos pelo método -2∆∆Ct ("fold raise") em relação ao controle.
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Linha de base
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Resposta de citocina
Prazo: Linha de base
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para encontrar diferenças quantitativas entre os 3 grupos em relação à resposta de citocinas por Luminex®: em pg/ml ou em ng/ml dependendo das citocinas
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Linha de base
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resposta inflamatória/desimune de citocinas
Prazo: Linha de base
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encontrar diferenças quantitativas entre os 3 grupos em relação à resposta inflamatória / disimune de citocinas, componentes das vias cGAS-STING autofagia, NOD2, mucinas intestinais, integrinas, caderinas por análise transcriptômica do tipo RNAseq em Transcript Per Million (TPM). Este resultado será medido no nível sanguíneo e no nível colônico. |
Linha de base
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Diferença de metilação do DNA por Metil-Seq entre os 3 grupos
Prazo: Linha de base
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encontrar diferenças quantitativas entre os 3 grupos quanto ao estudo da metilação do DNA por Metil-Seq.
Resultados expressos em porcentagem de metilação.
Este resultado será medido ao nível do sangue e do cólon.
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Linha de base
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Ativação (fosforilação) dos componentes da via cGAS-STING
Prazo: Linha de base
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Ativação (fosforilação) dos componentes da via cGAS-STING (proteínas cGAS, p-CGAS, STING,p-STING,TBK1, p-TBK1,IRF-3, p-IRF-3) por Western-Blot
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Linha de base
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atividade plasmática de DNase
Prazo: linha de base
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atividade plasmática de DNase em Kunitz unitz
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linha de base
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diferenças na distribuição microbiana
Prazo: Linha de base
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procurar diferenças quantitativas na distribuição microbiana entre os 3 grupos por pirosequenciamento do RNA 16s da microbiota no nível fecal
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Linha de base
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quantidade (número de "leituras") de mRNA específico de STING do cólon
Prazo: Linha de base
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diferenças quantitativas entre os 3 grupos em relação à quantidade (número de "leituras") de mRNA específico de STING colônico no nível colônico
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Linha de base
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DNA extracelular por qPCR
Prazo: Linha de base
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Usaremos sequências de primers específicos para identificar a origem do DNA (mitocondrial ou nuclear).
Os resultados serão expressos pelo método -2∆∆Ct ("fold raise") em relação ao controle.
Este resultado será medido no nível do cólon.
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Linha de base
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Quantidade de STING no citoplasma
Prazo: Linha de base
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presença citoplasmática de STING por histologia, coloração imuno-histoquímica e análise por microscopia óptica.
Os resultados serão qualitativos (presente/ausente; localização) e quantitativos com base na densidade óptica (porcentagem de células positivas)
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Linha de base
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Quantidade de cGAS no citoplasma
Prazo: Linha de base
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presença citoplasmática de cGAS por histologia, coloração imuno-histoquímica e análise por microscopia óptica.
Os resultados serão qualitativos (presente/ausente; localização) e quantitativos com base na densidade óptica (porcentagem de células positivas)
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Linha de base
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Quantidade de DNA nuclear no citoplasma
Prazo: Linha de base
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presença citoplasmática de DNA nuclear por histologia, coloração imuno-histoquímica e análise por microscopia óptica.
Os resultados serão qualitativos (presente/ausente; localização) e quantitativos com base na densidade óptica (porcentagem de células positivas)
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Linha de base
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Quantidade de DNA mitocondrial no citoplasma
Prazo: Linha de base
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presença citoplasmática de DNA mitocondrial por histologia, coloração imuno-histoquímica e análise por microscopia óptica.
Os resultados serão qualitativos (presente/ausente; localização) e quantitativos com base na densidade óptica (porcentagem de células positivas)
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Linha de base
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Quantidade de atividade de DNase colônica
Prazo: Linha de base
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Medição da atividade de DNase colônica em Kunitz unitz
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Linha de base
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Colaboradores e Investigadores
É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: Georges DIMITROV, MD, CHR d'Orléans
Publicações e links úteis
A pessoa responsável por inserir informações sobre o estudo fornece voluntariamente essas publicações. Estes podem ser sobre qualquer coisa relacionada ao estudo.
Publicações Gerais
- Ahn J, Son S, Oliveira SC, Barber GN. STING-Dependent Signaling Underlies IL-10 Controlled Inflammatory Colitis. Cell Rep. 2017 Dec 26;21(13):3873-3884. doi: 10.1016/j.celrep.2017.11.101.
- Canesso MCC, Lemos L, Neves TC, Marim FM, Castro TBR, Veloso ES, Queiroz CP, Ahn J, Santiago HC, Martins FS, Alves-Silva J, Ferreira E, Cara DC, Vieira AT, Barber GN, Oliveira SC, Faria AMC. The cytosolic sensor STING is required for intestinal homeostasis and control of inflammation. Mucosal Immunol. 2018 May;11(3):820-834. doi: 10.1038/mi.2017.88. Epub 2017 Dec 20.
- Martin GR, Blomquist CM, Henare KL, Jirik FR. Stimulator of interferon genes (STING) activation exacerbates experimental colitis in mice. Sci Rep. 2019 Oct 3;9(1):14281. doi: 10.1038/s41598-019-50656-5.
- Boyapati RK, Dorward DA, Tamborska A, Kalla R, Ventham NT, Doherty MK, Whitfield PD, Gray M, Loane J, Rossi AG, Satsangi J, Ho GT. Mitochondrial DNA Is a Pro-Inflammatory Damage-Associated Molecular Pattern Released During Active IBD. Inflamm Bowel Dis. 2018 Sep 15;24(10):2113-2122. doi: 10.1093/ibd/izy095.
- Vrablicova Z, Tomova K, Tothova L, Babickova J, Gromova B, Konecna B, Liptak R, Hlavaty T, Gardlik R. Nuclear and Mitochondrial Circulating Cell-Free DNA Is Increased in Patients With Inflammatory Bowel Disease in Clinical Remission. Front Med (Lausanne). 2020 Dec 14;7:593316. doi: 10.3389/fmed.2020.593316. eCollection 2020.
- Khan S, Mentrup HL, Novak EA, Siow VS, Wang Q, Crawford EC, Schneider C, Comerford TE 4th, Firek B, Rogers MB, Loughran P, Morowitz MJ, Mollen KP. Cyclic GMP-AMP synthase contributes to epithelial homeostasis in intestinal inflammation via Beclin-1-mediated autophagy. FASEB J. 2022 May;36(5):e22282. doi: 10.1096/fj.202200138R.
- Zhao F, Zheng T, Gong W, Wu J, Xie H, Li W, Zhang R, Liu P, Liu J, Wu X, Zhao Y, Ren J. Extracellular vesicles package dsDNA to aggravate Crohn's disease by activating the STING pathway. Cell Death Dis. 2021 Aug 27;12(9):815. doi: 10.1038/s41419-021-04101-z. Erratum In: Cell Death Dis. 2021 Oct 29;12(11):1022.
- Chen C, Zhang Y, Tao M, Zhao X, Feng Q, Fei X, Fu Y. Atrial Natriuretic Peptide Attenuates Colitis via Inhibition of the cGAS-STING Pathway in Colonic Epithelial Cells. Int J Biol Sci. 2022 Feb 7;18(4):1737-1754. doi: 10.7150/ijbs.67356. eCollection 2022.
Datas de registro do estudo
Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
31 de maio de 2023
Conclusão Primária (Estimado)
1 de junho de 2026
Conclusão do estudo (Estimado)
1 de junho de 2026
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
5 de maio de 2023
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
14 de junho de 2023
Primeira postagem (Real)
23 de junho de 2023
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
23 de junho de 2023
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
14 de junho de 2023
Última verificação
1 de junho de 2023
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- CHRO-2023-01
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Não
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
Não
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