Jämförelse av ett halvautomatiskt slutet vitrifikationssystem (Gavi®) med ett manuellt öppet vitrifikationssystem (Cryotop®) (Gavi)

Etthundraåttio (n=180) patienter som presenterar mer än 2 överskott av 2 PNoocyter för förglasning eller patienter som har alla tillgängliga 2PN-oocyter elektivt förglasade kommer att slumpmässigt fördelas (1:1) på dagen för befruktningskontroll (dag 1 efter äggupptagning) till båda förfarandena. I studiegruppen kommer 2PN-oocyter att kryokonserveras med den halvautomatiska GAVI®-öppna förglasnings-/uppvärmningstekniken.

I kontrollgruppen kommer 2PN-oocyter att kryokonserveras med den manuella Cryotop®-öppna förglasnings-/uppvärmningstekniken.

Deltagandet i denna studie kommer att begränsas till en cykel per patient. Studiepopulationen består av infertila par som genomgår IVF- eller ICSI-behandling.

Studietiden kommer att vara minst 6 månader per ämne, t.ex. huvudstudien om överlevnad med primärt utfall 2PN kommer att avslutas 6 månader efter randomisering av den sista patienten.

Data från graviditet och levande födsel kommer att rapporteras i tillägg till den huvudsakliga kliniska studierapporten, när så är lämpligt.

Innan studien påbörjas kommer alla studieplatser att ha tillräckligt utbildade utredare.

Studien kommer att utföras på minst tre platser i Tyskland. Patientrekryteringen kommer att vara konkurrenskraftig mellan studiecentra.

Antalet patienter som har tagit upp oocyter under studiens genomförande kommer att bestå av den population som screenats för inkludering.

I allmänhet är patienter som uppfyller kriterierna för inkludering och uteslutning berättigade till inkludering och randomisering.

Det finns inga restriktioner för äggstocksstimuleringsprotokollet och typ eller dos av ägglossningsinduktionsmedel (hCG eller GnRH-agonist). Upptagning av ägg utförs vanligtvis genom transvaginal ultraljudsstyrd follikelaspiration 36±2 timmar efter administrering av hCG.

IVF- eller ICSI-proceduren utförs enligt utredarplatsens standardprocedur.

Befruktningskontroll utförs dag 1 efter äggupptagning (OPU) 17±1 timmar efter insemination. Antalet regelbundet befruktade oocyter, definierat som oocyter med 2 pronuclei och 2 polära kroppar, bedöms.

Patienter som presenterar ≥ 2 överskott av regelbundet befruktade oocyter för kryokonservering dag 1 och patienter som genomgår elektiv kryokonservering av alla tillgängliga 2 PN-oocyter allokeras till en av de två två procedurerna.

Randomisering kommer att utföras på dagen för befruktningskontrollen (dag 1 efter OPU) av labbpersonal genom att öppna ett numrerat, ogenomskinligt förseglat kuvert. Den slumpmässiga sekvensen kommer att genereras av mjukvara och block kommer att användas. Alla randomiserade patienter kommer att loggas i en pappersbaserad randomiseringslogg med initialer, DOB, studienummer, datum, studiegrupp, personalens namn och underskrift. Randomisering kommer att stratifieras av centrum och efter indikation (överskott av 2PN oocyt kryokonservering kontra elektiv kryokonservering av alla tillgängliga 2PN oocyter).

Alla förglasnings- och uppvärmningsprocedurer kommer att utföras enligt tillverkarens instruktioner.

För att undersöka skillnaderna i förglasningsförfarandets varaktighet, kommer tidsspannet mellan att börja med förberedelser som behövs för förglasning och överföra förglasningsanordningen till tanken med flytande kväve för lagring att registreras.

Beroende på utredarplatsens policy för överföring av kryoembryon kommer förglasade/uppvärmda embryon att ersättas i en efterföljande naturlig eller programmerad cykel. Inom platsen kommer alla patienter att genomgå samma kryoprotokoll för beredning av endometriet.

Det finns inga specifikationer på protokollet som ska användas. Antalet 2 PN-oocyter som ska värmas kommer att bestämmas av utredaren från fall till fall. Embryoodling kommer att utföras i alla fall i individuella mikrodroppar täckta med kulturolja fram till dagen för planerad embryoöverföring.

Dagen för embryoöverföring och antalet embryon som ska överföras kommer att bestämmas av utredaren från fall till fall.

För att undersöka överlevnadsgraden kommer uppvärmda 2PN-ooyter att bedömas omedelbart och 2 timmar efter uppvärmningsproceduren. Överlevnad kommer att bekräftas av närvaron av ett intakt olemma och vanlig cytoplasma 2 timmar efter uppvärmningsproceduren och/eller när embryonal klyvning observeras.

För att undersöka potentiella skillnader i utveckling och kvalitet av förglasade/uppvärmda embryon kommer klyvning och morfologi att bedömas enligt följande:

dag 2 (44±1 timmar efter insemination): cellantal, blastomerstorlek, fragmenteringsgrad

dag 3 (68±1 timmar efter insemination): cellantal, blastomerstorlek, fragmenteringsgrad

dag 5 (116±1 timmar efter insemination): blastocyststadium (expansionsgrad), ICM (inre cellmassa) morfologi, TE (trophectoderm) morfologi

dag 6 (140±1 timmar efter insemination): blastocyststadium (expansionsgrad), ICM (inre cellmassa) morfologi, TE (trophectoderm) morfologi

Patienter som blir gravida kommer att genomgå ultraljudsundersökning för att bekräfta klinisk graviditet vid 6-7 veckors graviditet. Uppföljningsdata avseende bekräftelse av pågående graviditet inhämtas per telefon. Levande födsel inklusive relaterade data kommer att erhållas av en frågeformulär som ska fyllas i av patienten och returneras till utredarens klinik.

Analyserna kommer att göras per intention-to-treat (ITT) och per protokoll (PP), beroende på vad som är lämpligt. ITT-populationen är den randomiserade patientpopulationen. PP-populationen är populationen av patienter som genomgår ett försök till upptining.

Källdata kommer att vara pappersbaserade fallrapportformulär (CRF).

• studie-ID-nummer
• födelsedatum (kvinnlig patient)
• ålder kvinna (år)
• ålder man (år)
• typ av stimuleringsprotokoll (antagonist/agonistprotokoll, kort/långt protokoll)
• typ av gonadotropin som används (uFSH, rFSH, HMG, mix, Elonva)
• total dos av gonadotropiner
• typ av oocytinsemination (IVF, ICSI)
• Datum och tid för utlösning
• Typ och dos av utlösande medicin
• Datum och tid för äggupptagning
• Datum för randomisering
• studiegrupp
• datum och tid för IVF/ICSI
• datum och tid för befruktningskontroll (2PN-bedömning)
• antal befruktade oocyter (2PN oocyter)
• orsak till förglasning (överskott vs. valfritt)
• datum och tid för förglasning (start/slut)
• längd på vitrifikationsproceduren (minuter)
• datum och tid för uppvärmningen (start/slut)
• uppvärmningsprocedurens varaktighet (minuter)
• antal uppvärmda 2PN-oocyter
• antal vitala 2PN-oocyter
• antal embryon av högsta kvalitet på dag 2, dag 3, dag 5 och dag 6 (beroende på dagen för embryoöverföring)
• antal överförda embryon
• antal återvitrifierade embryon
• cykelresultat (ingen graviditet, positivt hCG-test)
• graviditetsförlopp (abort, avbrytande, försvinnande tvilling, etc.)
• Multipel (singleton, tvilling, triplett)
• graviditetsresultat (klinisk graviditet, pågående graviditet, levande födsel)

Beskrivande statistik kommer att utföras genom att analysera median, medelvärde, n, standardavvikelse, intervall och 95 % konfidensintervall (CI). Skillnaderna mellan armarna kommer att sammanfattas som en absolut skillnad med 95 % CI. För det primära resultatet kommer en linjär modell att konstrueras som tar hänsyn till behandlingsgrupp, studieplats och randomiseringsskikt exklusivt för populationen per protokoll.

För sekundära utfall kommer ITT- och/eller PP-analyser att utföras. Ingen korrigering för multiplicitet är planerad. Parametriska och icke-parametriska test kommer att användas för normalfördelade respektive icke-normalfördelade variabler för att jämföra sekundära utfall mellan grupper.

Patientuppgifterna kommer att föras in i en databas på ett pseudonymiserat sätt. Datahantering och analys kommer att utföras av huvudutredaren.