Puoliautomaattisen suljetun lasitusjärjestelmän (Gavi®) vertailu manuaaliseen avoimeen lasitusjärjestelmään (Cryotop®) (Gavi)

Satakahdeksankymmentä (n=180) potilasta, joilla on yli 2 ylimääräistä 2 PNoosyyttiä lasitettavaksi, tai potilaat, joilla on kaikki käytettävissä olevat 2PN-oosyytit valikoivasti lasitettuina, jaetaan satunnaisesti (1:1) hedelmöitystarkistuspäivänä (päivä 1 munasolun keräämisen jälkeen) kumpaakaan menettelyä. Tutkimusryhmässä 2PN munasoluja kylmäsäilytetään käyttämällä puoliautomaattista GAVI® avointa lasitus/lämmitystekniikkaa.

Kontrolliryhmässä 2PN-oosyytit kylmäsäilytetään käyttämällä manuaalista Cryotop® avointa lasitus/lämmitystekniikkaa.

Osallistuminen tähän tutkimukseen rajoitetaan yhteen sykliin potilasta kohti. Tutkimuspopulaatio koostuu hedelmättömistä pareista, jotka saavat IVF- tai ICSI-hoitoa.

Opintojen kesto on vähintään 6 kuukautta per oppiaine, esim. päätutkimus primaarisen tuloksen 2PN-eloonjäämisestä päätetään 6 kuukautta viimeisen potilaan satunnaistamisen jälkeen.

Tiedot raskaudesta ja elävänä syntymän tuloksista raportoidaan tarvittaessa kliinisen pääraportin liitteinä.

Ennen tutkimuksen aloittamista kaikilla tutkimuspaikoilla on riittävästi koulutettuja tutkijoita.

Tutkimus tehdään vähintään kolmella paikkakunnalla Saksassa. Potilaiden rekrytointi on kilpailullista opintokeskusten välillä.

Niiden potilaiden lukumäärä, joilla on munasolujen kerääntyminen tutkimuksen suorittamisen aikana, koostuu populaatiosta, joka on seulottu sisällyttämisen varalta.

Yleisesti ottaen potilaat, jotka täyttävät sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit, ovat kelvollisia sisällyttämiseen ja satunnaistukseen.

Munasarjojen stimulaatioprotokollalle ja ovulaation induktioaineen tyypille tai annokselle (hCG tai GnRH-agonisti) ei ole rajoituksia. Munasolun poiminta suoritetaan yleensä transvaginaalisella ultraääniohjatulla follikkeliimulla 36±2 tuntia hCG:n annon jälkeen.

IVF- tai ICSI-menettely suoritetaan tutkijapaikan normaalin toimintatavan mukaisesti.

Hedelmöitystarkistus suoritetaan päivänä 1 munasolun poiminnan (OPU) jälkeen 17±1 tuntia keinosiemennyksen jälkeen. Säännöllisesti hedelmöittyneiden oosyyttien lukumäärä, joka määritellään munasoluiksi, joissa on 2 pronukleusta ja 2 polaarista kappaletta, arvioidaan.

Potilaat, joilla on ≥ 2 ylimääräistä säännöllisesti hedelmöitettyä munasolua kylmäsäilytystä varten päivänä 1, ja potilaat, joille tehdään elektiivinen kylmäsäilytys kaikista saatavilla olevista 2 PN-oosyytistä, määrätään jompaankumpaan kahdesta kahdesta menettelystä.

Laboratorion henkilökunta suorittaa satunnaistuksen hedelmöitystarkistuspäivänä (päivä 1 OPU:n jälkeen) avaamalla numeroidut, läpinäkymättömät suljetut kirjekuoret. Satunnainen sekvenssi luodaan ohjelmiston avulla ja lohkoja käytetään. Kaikki satunnaistetut potilaat kirjataan paperipohjaiseen satunnaistuslokiin, joissa on nimikirjaimet, DOB, tutkimuksen numero, päivämäärä, tutkimusryhmä, henkilökunnan nimi ja allekirjoitus. Satunnaistaminen ositetaan keskuksen ja indikaatioiden mukaan (ylimääräinen 2PN-oosyyttien kylmäsäilytys vs. kaikkien saatavilla olevien 2PN-oosyyttien elektiivinen kylmäsäilytys).

Kaikki lasitus- ja lämmitystoimenpiteet suoritetaan valmistajan ohjeiden mukaisesti.

Lasitusprosessin keston erojen selvittämiseksi kirjataan aikajakso, joka kuluu lasitukseen tarvittavilla valmisteilla aloittamisen ja lasituslaitteen (-laitteiden) siirtämisen välillä nestemäisen typen säiliöön varastointia varten.

Riippuen tutkijapaikan kryoalkionsiirtokäytännöstä, myöhemmässä luonnollisessa tai ohjelmoidussa syklissä lasitetut/lämmitetyt alkiot korvataan. Paikan sisällä kaikille potilaille tehdään sama kryoprotokolla kohdun limakalvon valmistelua varten.

Käytettävälle protokollalle ei ole määritelty mitään. Lämmitettävän 2 PN-oosyytin lukumäärän päättää tutkija tapauskohtaisesti. Alkioviljely suoritetaan kaikissa tapauksissa yksittäisissä mikropisaroissa, jotka on peitetty viljelyöljyllä suunniteltuun alkionsiirtopäivään asti.

Alkionsiirtopäivän ja siirrettävien alkioiden lukumäärän päättää tutkija tapauskohtaisesti.

Eloonjäämisasteen tutkimiseksi lämmitetyt 2PN-ooytes arvioidaan välittömästi ja 2 tuntia lämmitystoimenpiteen jälkeen. Eloonjääminen vahvistetaan koskemattoman oolemman ja säännöllisen sytoplasman läsnäololla 2 tuntia lämmitystoimenpiteen jälkeen ja/tai kun alkion pilkkoutuminen havaitaan.

Jotta voitaisiin tutkia mahdollisia eroja lasitettujen/lämmitettyjen alkioiden kehityksessä ja laadussa, pilkkoutuminen ja morfologia arvioidaan seuraavasti:

päivä 2 (44±1 tuntia inseminoinnin jälkeen): solujen lukumäärä, blastomeerin koko, fragmentoitumisaste

päivä 3 (68±1 tuntia inseminoinnin jälkeen): solujen lukumäärä, blastomeerien koko, fragmentoitumisaste

päivä 5 (116±1 tuntia inseminoinnin jälkeen): blastokystivaihe (laajenemisaste), ICM (sisäinen solumassa) morfologia, TE (trofektodermi) morfologia

päivä 6 (140±1 tuntia inseminoinnin jälkeen): blastokystivaihe (laajenemisaste), ICM (sisäinen solumassa) morfologia, TE (trofektodermi) morfologia

Potilaille, jotka tulevat raskaaksi, tehdään ultraäänitutkimus kliinisen raskauden varmistamiseksi 6-7 raskausviikolla. Jatkuvan raskauden vahvistusta koskevat seurantatiedot saadaan puhelimitse. Elävä syntymä ja siihen liittyvät tiedot saadaan kyselylomakkeella, jonka potilas täyttää ja palauttaa tutkijan klinikalle.

Analyysit tehdään hoitoaikeittain (ITT) ja protokollakohtaisesti (PP) tapauksen mukaan. ITT-populaatio on satunnaistettu potilaspopulaatio. PP-populaatio on niiden potilaiden populaatio, joille suoritetaan sulatusyritys.

Lähdetiedot ovat paperipohjaisia ​​tapausraporttilomakkeita (CRF).

• tutkimuksen tunnusnumero
• syntymäaika (naispotilas)
• ikä nainen (vuotta)
• ikä mies (vuotta)
• stimulaatioprotokollan tyyppi (antagonisti/agonistiprotokolla, lyhyt/pitkä protokolla)
• käytetyn gonadotropiinin tyyppi (uFSH, rFSH, HMG, mix, Elonva)
• gonadotropiinien kokonaisannos
• munasolusiemennystyyppi (IVF, ICSI)
• Laukaisun päivämäärä ja kellonaika
• Laukaisevan lääkkeen tyyppi ja annos
• Munasolun poiminnan päivämäärä ja kellonaika
• Satunnaistamisen päivämäärä
• opiskeluryhmä
• IVF/ICSI:n päivämäärä ja kellonaika
• lannoitustarkastuksen päivämäärä ja kellonaika (2PN-arviointi)
• hedelmöittyneiden munasolujen määrä (2PN munasoluja)
• syy lasittamiseen (ylijäämä vs. valinnainen)
• lasituksen päivämäärä ja kellonaika (alku/loppu)
• lasitustoimenpiteen kesto (minuuttia)
• lämpenemisen päivämäärä ja kellonaika (alku/loppu)
• lämmitystoimenpiteen kesto (minuuttia)
• lämmitettyjen 2PN-oosyyttien lukumäärä
• elintärkeiden 2PN-oosyyttien lukumäärä
• huippulaatuisten alkioiden määrä päivänä 2, päivänä 3, päivänä 5 ja päivänä 6 (riippuen alkionsiirtopäivästä)
• siirrettyjen alkioiden määrä
• uudelleen lasitettujen alkioiden määrä
• syklin lopputulos (ei raskautta, positiivinen hCG-testi)
• raskauden kulku (abortti, keskeytys, katoava kaksoset jne.)
• Moninkertaisuus (singleton, twin, tripletti)
• raskauden lopputulos (kliininen raskaus, meneillään oleva raskaus, elävänä syntymä)

Kuvaavat tilastot tehdään analysoimalla mediaani, keskiarvo, n, keskihajonna, vaihteluvälit ja 95 %:n luottamusvälit (CI). Haarojen väliset erot lasketaan yhteen absoluuttisena erona 95 % CI:llä. Ensisijaista tulosta varten rakennetaan lineaarinen malli, jossa otetaan huomioon hoitoryhmä, tutkimuspaikka ja satunnaistuskerros yksinomaan protokollakohtaiselle populaatiolle.

Toissijaisten tulosten osalta suoritetaan ITT- ja/tai PP-analyysit. Moninkertaisuuden korjausta ei ole suunniteltu. Parametrisia ja ei-parametrisia testejä käytetään normaalijakauman ja ei-normaalijakauman muuttujille, vastaavasti, vertaillakseen toissijaisia ​​tuloksia ryhmien välillä.

Potilastiedot syötetään tietokonetietokantaan pseudonyymisillä tavalla. Tietojen hallinnasta ja analysoinnista vastaa päätutkija.