Sammenligning af et halvautomatisk lukket forglasningssystem (Gavi®) med et manuelt åbent forglasningssystem (Cryotop®) (Gavi)

Et hundrede og firs (n=180) patienter, der præsenterer mere end 2 overskydende 2 PNoocytter til forglasning eller patienter, der har alle tilgængelige 2PN-oocytter elektivt forglasset, vil blive tilfældigt allokeret (1:1) på dagen for befrugtningskontrol (dag 1 efter ægopsamling) til enten procedure. I undersøgelsesgruppen vil 2PN oocytter blive kryokonserveret ved hjælp af den semi-automatiserede GAVI® åbne forglasning/opvarmningsteknik.

I kontrolgruppen vil 2PN oocytter blive kryokonserveret ved hjælp af den manuelle Cryotop® åben forglasning/opvarmningsteknik.

Deltagelsen i denne undersøgelse vil være begrænset til én cyklus pr. patient. Undersøgelsespopulationen består af infertile par, der gennemgår IVF- eller ICSI-behandling.

Studievarigheden vil være minimum 6 måneder pr. fag, f.eks. hovedundersøgelsen af ​​Primary Outcome 2PN-overlevelse vil blive lukket 6 måneder efter randomisering af den sidste patient.

Data fra graviditet og levende fødselsresultater vil blive rapporteret i tillæg til den primære kliniske undersøgelsesrapport, alt efter hvad der er relevant.

Før undersøgelsen påbegyndes, vil alle undersøgelsessteder have efterforskere, der er tilstrækkeligt uddannet.

Undersøgelsen vil blive udført på mindst tre steder i Tyskland. Patientrekruttering vil være konkurrencedygtig mellem studiecentre.

Antallet af patienter, der får oocytopsamling i løbet af undersøgelsens udførelse, vil bestå af den population, der er screenet for inklusion.

Generelt er patienter, der overholder inklusions- og eksklusionskriterierne, berettigede til inklusion og randomisering.

Der er ingen begrænsninger på ovariestimuleringsprotokollen og typen eller dosis af ægløsningsinduktionsmiddel (hCG eller GnRH-agonist). Opsamling af æg udføres sædvanligvis ved transvaginal ultralydsstyret follikel-aspiration 36±2 timer efter hCG-administration.

IVF- eller ICSI-proceduren udføres i henhold til investigatorstedets standardoperationsprocedure.

Befrugtningskontrol udføres på dag 1 efter ægopsamling (OPU) 17±1 time efter insemination. Antallet af regelmæssigt befrugtede oocytter, defineret som oocytter med 2 pronuclei og 2 polære legemer, vurderes.

Patienter, der præsenterer ≥ 2 overskud af regelmæssigt befrugtede oocytter til kryokonservering på dag 1, og patienter, der gennemgår elektiv kryokonservering af alle tilgængelige 2 PN-oocytter, allokeres til en af ​​de to 2 procedurer.

Randomisering vil blive udført på dagen for befrugtningskontrol (dag 1 efter OPU) af laboratoriepersonale ved at åbne nummererede, uigennemsigtige forseglede kuverter. Den tilfældige sekvens vil blive softwaregenereret, og blokke vil blive brugt. Alle randomiserede patienter vil blive logget i en papirbaseret randomiseringslog med initialer, DOB, undersøgelsesnummer, dato, undersøgelsesgruppe, navn og underskrift på personalet. Randomisering vil blive stratificeret af Center og efter indikation (overskud 2PN oocytkryokonservering vs. elektiv kryokonservering af alle tilgængelige 2PN oocytter).

Alle forglasnings- og opvarmningsprocedurer vil blive udført i henhold til producentens instruktioner.

For at undersøge forskellene i forglasningsprocedurens varighed, vil tidsrummet mellem start med forberedelser, der er nødvendige for forglasning, og overførsel af forglasningsanordning(er) til tanken med flydende nitrogen til opbevaring, blive registreret.

Afhængigt af investigatorstedets politik for overførsel af kryoembryoner vil forglasede/opvarmede embryoer blive erstattet i en efterfølgende naturlig eller programmeret cyklus. Indenfor stedet vil alle patienter gennemgå den samme kryoprotokol til forberedelse af endometriet.

Der er ingen specifikationer for den protokol, der skal bruges. Antallet af 2 PN-oocytter, der skal opvarmes, vil blive besluttet af investigator fra sag til sag. Embryokultur vil i alle tilfælde blive udført i individuelle mikrodråber dækket med kulturolie op til dagen for planlagt embryooverførsel.

Dagen for embryooverførsel og antallet af embryoner, der skal overføres, bestemmes af investigator fra sag til sag.

For at undersøge overlevelsesraten vil opvarmede 2PN-ooyter blive vurderet umiddelbart og 2 timer efter opvarmningsproceduren. Overlevelse vil blive bekræftet ved tilstedeværelsen af ​​et intakt olemma og regelmæssig cytoplasma 2 timer efter opvarmningsproceduren og/eller når embryonal spaltning observeres.

For at undersøge potentielle forskelle i udvikling og kvalitet af forglasede/opvarmede embryoner vil spaltning og morfologi blive vurderet som følger:

dag 2 (44±1 timer efter insemination): celleantal, blastomerstørrelse, fragmenteringsgrad

dag 3 (68±1 timer efter insemination): celleantal, blastomerstørrelse, fragmenteringsgrad

dag 5 (116±1 timer efter insemination): blastocyststadium (udvidelsesgrad), ICM (indre cellemasse) morfologi, TE (trophectoderm) morfologi

dag 6 (140±1 timer efter insemination): blastocyststadium (udvidelsesgrad), ICM (indre cellemasse) morfologi, TE (trophectoderm) morfologi

Patienter, der bliver gravide, vil gennemgå ultralydsundersøgelse for at bekræfte klinisk graviditet ved 6-7 ugers graviditet. Opfølgningsdata vedrørende bekræftelse af igangværende graviditet vil blive indhentet telefonisk. Levende fødsel inklusive relaterede data vil blive indhentet af et spørgeskema, som skal udfyldes af patienten og returneres til investigatorens klinik.

Analyserne vil blive udført pr. intention-to-treat (ITT) og pr. protokol (PP), alt efter hvad der er relevant. ITT-populationen er den randomiserede patientpopulation. PP-populationen er populationen af ​​patienter, der gennemgår et forsøg på optøning.

Kildedata vil være papirbaserede case report formularer (CRF).

• studie-id-nummer
• fødselsdato (kvindelig patient)
• alder kvinde (år)
• alder mand (år)
• type stimulationsprotokol (Antagonist/Agonist-protokol, kort/lang protokol)
• type anvendt gonadotropin (uFSH, rFSH, HMG, mix, Elonva)
• total dosis af gonadotropiner
• type oocytinsemination (IVF, ICSI)
• Dato og tidspunkt for udløsning
• Type og dosis af udløsende medicin
• Dato og tidspunkt for afhentning af æg
• Dato for randomisering
• studiegruppe
• dato og tidspunkt for IVF/ICSI
• dato og tidspunkt for befrugtningskontrol (2PN-vurdering)
• antal befrugtede oocytter (2PN oocytter)
• årsag til forglasning (overskud vs. valgfag)
• dato og tidspunkt for forglasning (start/slut)
• varighed af forglasningsproceduren (minutter)
• dato og tidspunkt for opvarmning (start/slut)
• varighed af opvarmningsproceduren (minutter)
• antal opvarmede 2PN-oocytter
• antal vitale 2PN-oocytter
• antal embryoner af topkvalitet på dag 2, dag 3, dag 5 og dag 6 (afhængig af dagen for embryooverførsel)
• antal overførte embryoner
• antal revitrificerede embryoner
• cyklusresultat (ingen graviditet, positiv hCG-test)
• graviditetsforløb (abort, afbrydelse, forsvindende tvilling osv.)
• Multiplikitet (singleton, tvilling, triplet)
• graviditetsresultat (klinisk graviditet, igangværende graviditet, levende fødsel)

Deskriptiv statistik vil blive udført ved at analysere median, middelværdi, n, standardafvigelse, intervaller og 95 % konfidensintervaller (CI). Forskellene mellem armene vil blive opsummeret som absolut forskel med 95 % CI. For det primære resultat vil der blive konstrueret en lineær model, der tager højde for behandlingsgruppe, undersøgelsessted og randomiseringsstratum udelukkende for per-protokol populationen.

For sekundære resultater udføres ITT- og/eller PP-analyser. Der er ikke planlagt nogen korrektion for multiplicitet. Parametriske og ikke-parametriske tests vil blive brugt til henholdsvis normalfordelte og ikke-normalfordelte variabler for at sammenligne sekundære resultater mellem grupper.

Patientdataene vil blive indtastet i en computerdatabase på en pseudonymiseret måde. Datastyring og -analyse vil blive udført af hovedefterforskeren.