半自动封闭式玻璃化冷冻系统 (Gavi®) 与手动开放式玻璃化冷冻冷冻系统 (Cryotop®) 的比较 (Gavi)

将在受精检查当天（取卵后第 1 天）随机分配 (1:1) 一百八十 (n = 180) 名患者有超过 2 个多余的 2 PNoocytes 进行玻璃化冷冻或所有可用的 2PN 卵母细胞选择性玻璃化任一程序。 在研究组中，2PN 卵母细胞将使用半自动 GAVI® 开放式玻璃化/加热技术进行冷冻保存。

在对照组中，将使用手动 Cryotop® 开放式玻璃化/加热技术冷冻保存 2PN 卵母细胞。

每位患者参与本研究仅限于一个周期。 研究人群由接受 IVF 或 ICSI 治疗的不育夫妇组成。

每个受试者的研究持续时间至少为 6 个月，例如关于主要结果 2PN 生存的主要研究将在最后一名患者随机分组后 6 个月结束。

来自妊娠和活产结果的数据将酌情在主要临床研究报告的附录中报告。

在研究开始之前，所有研究地点都将对调查人员进行充分培训。

该研究将在德国境内至少三个地点进行。 研究中心之间的患者招募将具有竞争力。

在研究进行的时间范围内进行卵母细胞提取的患者数量将包括筛选纳入的人群。

一般来说，符合纳入和排除标准的患者有资格纳入和随机化。

对卵巢刺激方案和排卵诱导剂（hCG 或 GnRH 激动剂）的类型或剂量没有限制。 取卵通常在 hCG 给药后 36±2 小时通过经阴道超声引导的卵泡抽吸术进行。

IVF 或 ICSI 程序是根据研究机构的标准操作程序执行的。

授精后 17±1 小时取卵 (OPU) 后第 1 天进行受精检查。 评估定期受精卵母细胞的数量，定义为呈现 2 个原核和 2 个极体的卵母细胞。

在第 1 天提供 ≥ 2 个多余的定期受精卵母细胞进行冷冻保存的患者和接受所有可用 2 个 PN 卵母细胞的选择性冷冻保存的患者被分配到两个 2 程序之一。

实验室工作人员将在受精检查当天（OPU 后第 1 天）通过打开编号的不透明密封信封进行随机化。 随机序列将由软件生成并使用块。 所有随机分组的患者都将记录在纸质随机分组日志中，其中包含姓名首字母、出生日期、研究编号、日期、研究组、姓名和工作人员签名。 随机化将按中心和适应症分层（多余的 2PN 卵母细胞冷冻保存与所有可用 2PN 卵母细胞的选择性冷冻保存）。

所有玻璃化和加热程序都将根据制造商的说明进行。

为了研究玻璃化过程持续时间的差异，将记录从玻璃化所需的准备工作开始到将玻璃化装置转移到液氮罐中进行储存之间的时间跨度。

根据研究机构的冷冻胚胎移植政策，在随后的自然或程序循环中，将更换玻璃化/加热的胚胎。 在现场，所有患者都将接受相同的冷冻方案来准备子宫内膜。

没有关于要使用的协议的规范。 要加热的 2 个 PN 卵母细胞的数量将由研究人员根据具体情况决定。 胚胎培养将在所有情况下在覆盖有培养油的单个微滴中进行，直至预定的胚胎移植之日。

胚胎移植的日期和要移植的胚胎数量将由研究者根据具体情况决定。

为了研究存活率，将立即评估加热的 2PN-ooytes，并在加热程序后 2 小时进行评估。 加热程序后 2 小时和/或当观察到胚胎卵裂时，将通过完整卵膜和规则细胞质的存在来确认存活。

为了研究玻璃化/加热胚胎发育和质量的潜在差异，将按以下方式评估卵裂和形态：

第 2 天（授精后 44±1 小时）：细胞数量、卵裂球大小、破碎等级

第 3 天（授精后 68±1 小时）：细胞数量、卵裂球大小、破碎等级

第 5 天（授精后 116±1 小时）：胚泡期（扩张等级）、ICM（内细胞团）形态、TE（滋养外胚层）形态

第 6 天（授精后 140±1 小时）：囊胚期（扩张等级）、ICM（内细胞团）形态、TE（滋养外胚层）形态

怀孕的患者将在妊娠 6-7 周进行超声检查以确认临床妊娠。 将通过电话获得有关确认持续怀孕的后续数据。 包括相关数据在内的活产将通过问卷获得，由患者完成并返回给研究者的诊所。

分析将根据意向治疗 (ITT) 和方案 (PP) 酌情进行。 ITT 群体是随机化的患者群体。 PP 群体是正在尝试解冻的患者群体。

源数据将是纸质病例报告表 (CRF)。

• 学习编号
• 出生日期（女患者）
• 年龄女性（岁）
• 年龄男性（岁）
• 刺激方案的类型（拮抗剂/激动剂方案，短/长方案）
• 使用的促性腺激素类型（uFSH、rFSH、HMG、mix、Elonva）
• 促性腺激素的总剂量
• 卵母细胞授精类型（IVF、ICSI）
• 触发日期和时间
• 触发药物的类型和剂量
• 取卵日期和时间
• 随机化日期
• 学习小组
• IVF/ICSI 的日期和时间
• 受精检查的日期和时间（2PN 评估）
• 受精卵母细胞数（2PN 卵母细胞）
• 玻璃化的原因（盈余与选修）
• 玻璃化的日期和时间（开始/结束）
• 玻璃化过程的持续时间（分钟）
• 加温的日期和时间（开始/结束）
• 加热程序的持续时间（分钟）
• 加热的 2PN 卵母细胞数
• 重要的 2PN 卵母细胞数
• 第 2 天、第 3 天、第 5 天和第 6 天的优质胚胎数量（取决于胚胎移植的日期）
• 移植胚胎数
• 再玻璃化胚胎数
• 周期结果（未怀孕，hCG 检测呈阳性）
• 怀孕过程（流产、终止妊娠、消失的双胞胎等）
• 多重性（单胞胎、双胞胎、三胞胎）
• 妊娠结局（临床妊娠、持续妊娠、活产）

将通过分析中位数、均值、n、标准差、范围和 95% 置信区间 (CI) 来执行描述性统计。 手臂之间的差异将总结为具有 95% CI 的绝对差异。 对于主要结果，将构建一个线性模型，专门用于符合方案人群的治疗组、研究地点和随机化层。

对于次要结果，将进行 ITT 和/或 PP 分析。 没有计划对多重性进行校正。 参数和非参数检验将分别用于正态分布和非正态分布变量，以比较组间的次要结果。

患者数据将以化名方式输入计算机数据库。 数据管理和分析将由首席研究员进行。