Comparação de um Sistema de Vitrificação Fechado Semiautomático (Gavi®) com um Sistema de Vitrificação Manual Aberto (Cryotop®) (Gavi)

Cento e oitenta (n = 180) pacientes apresentando mais de 2 PNoócitos 2 excedentes para vitrificação ou pacientes com todos os oócitos 2PN disponíveis eletivamente vitrificados serão alocados aleatoriamente (1:1) no dia da verificação da fertilização (dia 1 após a coleta do óvulo) para quer procedimento. No grupo de estudo, oócitos 2PN serão criopreservados utilizando a técnica de vitrificação/aquecimento aberto semiautomática GAVI®.

No grupo controle, oócitos 2PN serão criopreservados utilizando a técnica manual de vitrificação/aquecimento aberto Cryotop®.

A participação neste estudo será limitada a um ciclo por paciente. A população do estudo consiste em casais inférteis submetidos a tratamento de fertilização in vitro ou ICSI.

A duração do estudo será de no mínimo 6 meses por sujeito, por ex. o estudo principal sobre o resultado primário 2PN sobrevivente será encerrado 6 meses após a randomização do último paciente.

Os dados da gravidez e do resultado do nado-vivo serão relatados em adendos ao relatório do estudo clínico principal, conforme apropriado.

Antes do início do estudo, todos os centros de estudo terão investigadores suficientemente treinados.

O estudo será realizado em pelo menos três locais na Alemanha. O recrutamento de pacientes será competitivo entre os centros de estudo.

O número de pacientes com coleta de oócitos durante o período de realização do estudo consistirá na população rastreada para inclusão.

Em geral, os pacientes que atendem aos critérios de inclusão e exclusão são elegíveis para inclusão e randomização.

Não há restrições quanto ao protocolo de estimulação ovariana e tipo ou dose de agente indutor de ovulação (hCG ou agonista de GnRH). A coleta do óvulo geralmente é realizada por aspiração folicular guiada por ultrassom transvaginal 36±2 horas após a administração de hCG.

O procedimento de FIV ou ICSI é realizado de acordo com o procedimento operacional padrão do centro do investigador.

A verificação da fertilização é realizada no dia 1 após a coleta do óvulo (OPU) 17±1 horas após a inseminação. O número de oócitos regularmente fertilizados, definido como oócito apresentando 2 pró-núcleos e 2 corpos polares, é avaliado.

Pacientes apresentando ≥ 2 oócitos regularmente fertilizados excedentes para criopreservação no dia 1 e pacientes submetidos à criopreservação eletiva de todos os 2 oócitos PN disponíveis são alocados para um dos dois procedimentos.

A randomização será realizada no dia da verificação da fertilização (dia 1 após a OPU) pela equipe do laboratório, abrindo envelopes numerados e opacos selados. A sequência aleatória será gerada por software e blocos serão usados. Todos os pacientes randomizados serão registrados em um registro de randomização em papel com iniciais, DOB, número do estudo, data, grupo de estudo, nome e assinatura da equipe. A randomização será estratificada por Centro e por indicação (criopreservação de oócitos 2PN excedentes vs. criopreservação eletiva de todos os oócitos 2PN disponíveis).

Todos os procedimentos de vitrificação e aquecimento serão realizados de acordo com as instruções do fabricante.

Para investigar as diferenças na duração do procedimento de vitrificação, será registrado o intervalo de tempo entre o início dos preparativos necessários para a vitrificação e a transferência do(s) dispositivo(s) de vitrificação para o tanque de nitrogênio líquido para armazenamento.

Dependendo da política de transferência de crioembriões do local do investigador, em um ciclo natural ou programado subseqüente, os embriões vitrificados/aquecidos serão substituídos. No local, todas as pacientes passarão pelo mesmo crioprotocolo para preparo do endométrio.

Não há especificações sobre o protocolo a ser utilizado. O número de 2 oócitos PN a serem aquecidos será decidido pelo investigador caso a caso. A cultura embrionária será realizada em todos os casos em microgotículas individuais cobertas com óleo de cultura até o dia da transferência embrionária programada.

O dia da transferência do embrião e o número de embriões a serem transferidos serão decididos pelo investigador caso a caso.

A fim de investigar a taxa de sobrevivência, 2PN-ooytes aquecidos serão avaliados imediatamente e 2 horas após o procedimento de aquecimento. A sobrevivência será confirmada pela presença de um oolema intacto e citoplasma regular 2 horas após o procedimento de aquecimento e/ou quando for observada clivagem embrionária.

A fim de investigar possíveis diferenças no desenvolvimento e na qualidade dos embriões vitrificados/aquecidos, a clivagem e a morfologia serão avaliadas da seguinte forma:

dia 2 (44±1 horas após a inseminação): número de células, tamanho do blastômero, grau de fragmentação

dia 3 (68±1 horas após a inseminação): número de células, tamanho do blastômero, grau de fragmentação

dia 5 (116±1 horas após a inseminação): estágio de blastocisto (grau de expansão), morfologia de ICM (massa celular interna), morfologia de TE (trofectoderme)

dia 6 (140±1 horas após a inseminação): estágio de blastocisto (grau de expansão), morfologia de ICM (massa celular interna), morfologia de TE (trofectoderme)

As pacientes que conceberem serão submetidas a exame de ultrassom para confirmar a gravidez clínica em 6-7 semanas de gestação. Os dados de acompanhamento relativos à confirmação da gravidez em curso serão obtidos por telefone. Nascidos vivos, incluindo dados relacionados, serão obtidos por meio de um questionário a ser preenchido pelo paciente e devolvido à clínica do investigador.

As análises serão feitas por intenção de tratar (ITT) e por protocolo (PP), conforme apropriado. A população ITT é a população de pacientes randomizados. A população PP é a população de pacientes submetidos a uma tentativa de descongelamento.

Os dados de origem serão formulários de relatório de caso (CRF) em papel.

• número de identificação do estudo
• data de nascimento (paciente do sexo feminino)
• idade feminino (anos)
• idade masculino (anos)
• tipo de protocolo de estimulação (protocolo Antagonista/Agonista, protocolo curto/longo)
• tipo de gonadotrofina utilizada (uFSH, rFSH, HMG, mix, Elonva)
• dose total de gonadotrofinas
• tipo de inseminação oocitária (FIV, ICSI)
• Data e hora do gatilho
• Tipo e dose do medicamento desencadeante
• Data e hora da coleta do óvulo
• Data de randomização
• grupo de Estudos
• data e hora da FIV/ICSI
• data e hora da verificação de fertilização (avaliação 2PN)
• número de oócitos fertilizados (oócitos 2PN)
• motivo da vitrificação (excedente vs. eletivo)
• data e hora da vitrificação (início/fim)
• duração do procedimento de vitrificação (minutos)
• data e hora do aquecimento (início/fim)
• duração do procedimento de aquecimento (minutos)
• número de oócitos 2PN aquecidos
• número de oócitos 2PN vitais
• número de embriões de alta qualidade no dia 2, dia 3, dia 5 e dia 6 (dependendo do dia da transferência do embrião)
• número de embriões transferidos
• número de embriões revitrificados
• resultado do ciclo (sem gravidez, teste de hCG positivo)
• curso da gravidez (aborto, interrupção, desaparecimento de gêmeos, etc.)
• Multiplicidade (singleton, twin, triplete)
• resultado da gravidez (gravidez clínica, gravidez em andamento, nascido vivo)

A estatística descritiva será realizada por meio da análise de mediana, média, n, desvio padrão, intervalos e intervalos de confiança (IC) de 95%. As diferenças entre os braços serão resumidas como diferença absoluta com IC de 95%. Para o desfecho primário, um modelo linear será construído considerando o grupo de tratamento, o local do estudo e o estrato de randomização exclusivamente para a população por protocolo.

Para resultados secundários, serão realizadas análises ITT e/ou PP. Nenhuma correção para multiplicidade está planejada. Testes paramétricos e não paramétricos serão usados ​​para variáveis ​​normalmente distribuídas e não normalmente distribuídas, respectivamente, para comparar desfechos secundários entre os grupos.

Os dados do paciente serão inseridos em um banco de dados de computador de forma pseudonimizada. O gerenciamento e a análise dos dados serão realizados pelo Pesquisador Principal.