Sammenligning av et halvautomatisk lukket vitrifikasjonssystem (Gavi®) med et manuelt åpent forglasningssystem (Cryotop®) (Gavi)

Ett hundre og åtti (n=180) pasienter som presenterer mer enn 2 overskudd av 2 PNoocytter for forglasning eller pasienter som har alle tilgjengelige 2PN oocytter elektivt forglasset, vil bli tilfeldig tildelt (1:1) på dagen for befruktningskontroll (dag 1 etter eggopphenting) til begge prosedyrene. I studiegruppen vil 2PN oocytter kryokonserveres ved bruk av den semi-automatiserte GAVI® åpen forglasning/oppvarmingsteknikk.

I kontrollgruppen vil 2PN oocytter kryokonserveres ved bruk av den manuelle Cryotop® åpen forglasning/oppvarmingsteknikk.

Deltakelsen i denne studien vil være begrenset til én syklus per pasient. Studiepopulasjonen består av infertile par som gjennomgår IVF- eller ICSI-behandling.

Studievarigheten vil være minimum 6 måneder per fag, f.eks. hovedstudien på primærutfall 2PN-overlevelse vil bli avsluttet 6 måneder etter randomisering av siste pasient.

Data fra utfall av graviditet og levendefødte vil bli rapportert i tillegg til hovedrapporten for kliniske studier, etter behov.

Før oppstart av studien vil alle studiestedene ha tilstrekkelig trent etterforskere.

Studien vil bli utført på minst tre steder i Tyskland. Pasientrekruttering vil være konkurransedyktig mellom studiesentre.

Antallet pasienter som har tatt opp oocytter i løpet av tidsrammen for studiegjennomføringen vil bestå av populasjonen screenet for inkludering.

Generelt er pasienter som oppfyller inklusjons- og eksklusjonskriteriene kvalifisert for inkludering og randomisering.

Det er ingen restriksjoner på eggstokkstimuleringsprotokollen og type eller dose av eggløsningsinduksjonsmiddel (hCG eller GnRH-agonist). Oppsamling av egg utføres vanligvis ved transvaginal ultralydveiledet follikkelaspirasjon 36±2 timer etter hCG-administrasjon.

IVF- eller ICSI-prosedyre utføres i henhold til etterforskerstedets standard operasjonsprosedyre.

Befruktningskontroll utføres på dag 1 etter ovum pick-up (OPU) 17±1 timer etter inseminering. Antall regelmessig befruktede oocytter, definert som oocytter med 2 pronuklei og 2 polare legemer, vurderes.

Pasienter som presenterer ≥ 2 overskudd av regelmessig befruktede oocytter for kryokonservering på dag 1 og pasienter som gjennomgår elektiv kryokonservering av alle tilgjengelige 2 PN-oocytter blir allokert til en av de to 2 prosedyrene.

Randomisering vil bli utført på dagen for befruktningskontroll (dag 1 etter OPU) av laboratoriepersonell ved å åpne en nummerert, ugjennomsiktig forseglet konvolutt. Den tilfeldige sekvensen vil være programvaregenerert og blokker vil bli brukt. Alle randomiserte pasienter vil bli loggført i en papirbasert randomiseringslogg med initialer, DOB, studienummer, dato, studiegruppe, navn og signatur til personalet. Randomisering vil bli stratifisert av senteret og etter indikasjon (overskudd 2PN oocytt kryokonservering vs. elektiv kryokonservering av alle tilgjengelige 2PN oocytter).

Alle forglasnings- og oppvarmingsprosedyrer vil bli utført i henhold til produsentens instruksjoner.

For å undersøke forskjellene i forglasningsprosedyrens varighet, vil tidsrommet mellom start med forberedelser som trengs for forglasning og overføring av forglasningsanordningen(e) til flytende nitrogentanken for lagring bli registrert.

Avhengig av etterforskerstedets retningslinjer for overføring av kryoembryoer, vil forglassede/oppvarmede embryoer bli erstattet i en påfølgende naturlig eller programmert syklus. Innenfor stedet vil alle pasienter gjennomgå den samme kryoprotokollen for klargjøring av endometriet.

Det er ingen spesifikasjoner på protokollen som skal brukes. Antallet 2 PN-oocytter som skal varmes opp vil avgjøres av etterforskeren fra sak til sak. Embryokultur vil bli utført i alle tilfeller i individuelle mikrodråper dekket med kulturolje frem til dagen for planlagt embryooverføring.

Dagen for embryooverføring og antall embryoer som skal overføres vil avgjøres av etterforskeren fra sak til sak.

For å undersøke overlevelsesraten vil oppvarmede 2PN-ooytter bli vurdert umiddelbart og 2 timer etter oppvarmingsprosedyre. Overlevelse vil bli bekreftet av tilstedeværelsen av et intakt olemma og vanlig cytoplasma 2 timer etter oppvarmingsprosedyren og/eller når embryonal spaltning er observert.

For å undersøke potensielle forskjeller i utvikling og kvalitet av forglassede/oppvarmede embryoer vil spaltning og morfologi bli vurdert som følger:

dag 2 (44±1 timer etter inseminering): celleantall, blastomerstørrelse, fragmenteringsgrad

dag 3 (68±1 timer etter inseminering): celleantall, blastomerstørrelse, fragmenteringsgrad

dag 5 (116±1 timer etter inseminering): blastocyststadium (ekspansjonsgrad), ICM (indre cellemasse) morfologi, TE (trophectoderm) morfologi

dag 6 (140±1 timer etter inseminering): blastocyststadium (ekspansjonsgrad), ICM (indre cellemasse) morfologi, TE (trophectoderm) morfologi

Pasienter som blir gravide vil gjennomgå ultralydundersøkelse for å bekrefte klinisk graviditet ved 6-7 ukers svangerskap. Oppfølgingsdata vedrørende bekreftelse av pågående graviditet vil bli innhentet på telefon. Levende fødsel inkludert relaterte data vil bli innhentet av et spørreskjema som skal fylles ut av pasienten og returneres til etterforskerens klinikk.

Analysene vil bli gjort per intensjon-å-behandle (ITT) og per protokoll (PP), etter behov. ITT-populasjonen er den randomiserte pasientpopulasjonen. PP-populasjonen er populasjonen av pasienter som gjennomgår et forsøk på tining.

Kildedata vil være papirbaserte saksrapportskjemaer (CRF).

• studie ID-nummer
• fødselsdato (kvinnelig pasient)
• alder kvinne (år)
• alder mann (år)
• type stimuleringsprotokoll (antagonist/agonistprotokoll, kort/lang protokoll)
• type gonadotropin som brukes (uFSH, rFSH, HMG, mix, Elonva)
• total dose gonadotropiner
• type oocyttinseminasjon (IVF, ICSI)
• Dato og klokkeslett for utløsning
• Type og dose av utløsende medisiner
• Dato og klokkeslett for ovumhenting
• Dato for randomisering
• studie gruppe
• dato og klokkeslett for IVF/ICSI
• dato og klokkeslett for befruktningskontroll (2PN-vurdering)
• antall befruktede oocytter (2PN oocytter)
• årsak til forglasning (overskudd vs. valgfag)
• dato og klokkeslett for forglasning (start/slutt)
• varighet av forglasningsprosedyre (minutter)
• dato og klokkeslett for oppvarming (start/slutt)
• varighet av oppvarmingsprosedyre (minutter)
• antall oppvarmede 2PN-oocytter
• antall vitale 2PN-oocytter
• antall embryoer av topp kvalitet på dag 2, dag 3, dag 5 og dag 6 (avhengig av dagen for embryooverføring)
• antall overførte embryoer
• antall revitrifiserte embryoer
• syklusutfall (ingen graviditet, positiv hCG-test)
• svangerskapsforløp (abort, avslutning, forsvinnende tvilling osv.)
• Multiplisitet (singleton, tvilling, triplett)
• graviditetsutfall (klinisk graviditet, pågående graviditet, levendefødte)

Beskrivende statistikk vil bli utført ved å analysere median, gjennomsnitt, n, standardavvik, områder og 95 % konfidensintervall (CI). Forskjellene mellom armene vil bli oppsummert som absolutt forskjell med 95 % KI. For det primære resultatet vil det bli konstruert en lineær modell som tar hensyn til behandlingsgruppe, studiested og randomiseringsstratum eksklusivt for per-protokollpopulasjonen.

For sekundære utfall vil det bli utført ITT- og/eller PP-analyser. Det er ikke planlagt noen korreksjon for multiplisitet. Parametriske og ikke-parametriske tester vil bli brukt for henholdsvis normalfordelte og ikke-normalfordelte variabler for å sammenligne sekundære utfall mellom grupper.

Pasientdataene vil bli lagt inn i en datamaskindatabase på en pseudonymisert måte. Databehandling og analyse vil bli utført av hovedetterforskeren.