Vergelijking van een semi-automatisch gesloten verglazingssysteem (Gavi®) met een handmatig open verglazingssysteem (Cryotop®) (Gavi)

Honderdtachtig (n=180) patiënten met meer dan 2 overtollige 2 PNoocyten voor vitrificatie of patiënten bij wie alle beschikbare 2PN-eicellen electief zijn gevitrificeerd, zullen op de dag van de bevruchtingscontrole (dag 1 na het ophalen van de eicel) willekeurig worden toegewezen (1:1) aan welke procedure dan ook. In de onderzoeksgroep zullen 2PN eicellen worden gecryopreserveerd met behulp van de semi-automatische GAVI® open vitrificatie/opwarmingstechniek.

In de controlegroep worden 2PN-oöcyten gecryopreserveerd met behulp van de handmatige Cryotop® open vitrificatie/opwarmingstechniek.

De deelname aan deze studie is beperkt tot één cyclus per patiënt. De onderzoekspopulatie bestaat uit onvruchtbare paren die een IVF- of ICSI-behandeling ondergaan.

De studieduur is minimaal 6 maanden per vak, b.v. het hoofdonderzoek naar de primaire uitkomstmaat 2PN overleving wordt 6 maanden na randomisatie van de laatste patiënt afgesloten.

Gegevens over de uitkomst van zwangerschap en levend geboren worden, indien van toepassing, vermeld in addenda bij het hoofdrapport van de klinische studie.

Voor de start van het onderzoek zullen alle onderzoekslocaties beschikken over voldoende opgeleide onderzoekers.

Het onderzoek zal worden uitgevoerd op ten minste drie locaties in Duitsland. De werving van patiënten zal concurrerend zijn tussen studiecentra.

Het aantal patiënten met eicelpickup tijdens het tijdsbestek van de studieuitvoering zal bestaan ​​uit de populatie die is gescreend voor opname.

Over het algemeen komen patiënten die voldoen aan de inclusie- en exclusiecriteria in aanmerking voor inclusie en randomisatie.

Er zijn geen beperkingen wat betreft het ovariële stimulatieprotocol en het type of de dosis ovulatie-inductiemiddel (hCG of GnRH-agonist). Ovum pick-up wordt meestal uitgevoerd door transvaginale echogeleide follikel aspiratie 36 ± 2 uur na toediening van hCG.

De IVF- of ICSI-procedure wordt uitgevoerd volgens de standaardprocedure van de onderzoekslocatie.

Bevruchtingscontrole wordt uitgevoerd op dag 1 na het ophalen van de eicel (OPU) 17 ± 1 uur na inseminatie. Het aantal regelmatig bevruchte oöcyten, gedefinieerd als oöcyt met 2 pronuclei en 2 poollichaampjes, wordt beoordeeld.

Patiënten met ≥ 2 overtollige regelmatig bevruchte eicellen voor cryoperservatie op dag 1 en patiënten die electieve cryopreservatie ondergaan van alle beschikbare 2 PN-eicellen worden toegewezen aan een van de twee 2 procedures.

Randomisatie zal worden uitgevoerd op de dag van de bevruchtingscontrole (dag 1 na OPU) door laboratoriumpersoneel door het openen van genummerde, ondoorzichtige verzegelde enveloppen. De willekeurige volgorde wordt door software gegenereerd en er worden blokken gebruikt. Alle gerandomiseerde patiënten worden gelogd in een papieren randomisatielogboek met initialen, DOB, studienummer, datum, onderzoeksgroep, naam en handtekening van het personeel. Randomisatie zal worden gestratificeerd per centrum en per indicatie (surplus 2PN oöcyt cryopreservatie vs. electieve cryopreservatie van alle beschikbare 2PN oöcyten).

Alle vitrificatie- en opwarmprocedures worden uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant.

Om de verschillen in de duur van de vitrificatieprocedure te onderzoeken, zal de tijdspanne tussen het starten met de voorbereidingen die nodig zijn voor vitrificatie en het overbrengen van de vitrificatie-inrichting(en) naar de tank met vloeibare stikstof voor opslag worden geregistreerd.

Afhankelijk van het beleid van de locatie van de onderzoeker voor de terugplaatsing van cryo-embryo's, zullen in een volgende natuurlijke of geprogrammeerde cyclus verglaasde/verwarmde embryo's worden teruggeplaatst. Binnen de locatie ondergaan alle patiënten hetzelfde cryoprotocol voor de voorbereiding van het endometrium.

Er zijn geen specificaties over het te gebruiken protocol. Het aantal op te warmen 2 PN-oöcyten wordt per geval door de onderzoeker bepaald. Embryokweek zal in alle gevallen worden uitgevoerd in individuele microdruppeltjes bedekt met kweekolie tot de dag van geplande embryotransfer.

De dag van de embryotransfer en het aantal terug te plaatsen embryo's wordt per geval door de onderzoeker bepaald.

Om het overlevingspercentage te onderzoeken, zullen opgewarmde 2PN-ooytes onmiddellijk en 2 uur na de opwarmingsprocedure worden beoordeeld. Overleving wordt bevestigd door de aanwezigheid van een intact oolemma en regulier cytoplasma 2 uur na de opwarmingsprocedure en/of wanneer embryonale splitsing wordt waargenomen.

Om mogelijke verschillen in ontwikkeling en kwaliteit van verglaasde/verwarmde embryo's te onderzoeken, zullen splitsing en morfologie als volgt worden beoordeeld:

dag 2 (44 ± 1 uur na inseminatie): celaantal, blastomeergrootte, mate van fragmentatie

dag 3 (68 ± 1 uur na inseminatie): celaantal, blastomeergrootte, mate van fragmentatie

dag 5 (116 ± 1 uur na inseminatie): blastocyststadium (graad van expansie), ICM (inner cell mass) morfologie, TE (trophectoderm) morfologie

dag 6 (140 ± 1 uur na inseminatie): blastocyststadium (graad van expansie), ICM (inner cell mass) morfologie, TE (trophectoderm) morfologie

Patiënten die zwanger worden, ondergaan echografisch onderzoek om klinische zwangerschap te bevestigen na 6-7 weken zwangerschap. Vervolggegevens met betrekking tot de bevestiging van doorgaande zwangerschap worden telefonisch verkregen. Levendgeborenen inclusief gerelateerde gegevens zullen worden verkregen door middel van een vragenlijst die door de patiënt moet worden ingevuld en teruggestuurd naar de kliniek van de onderzoeker.

De analyses zullen worden uitgevoerd per intention-to-treat (ITT) en per protocol (PP), naargelang het geval. De ITT-populatie is de gerandomiseerde patiëntenpopulatie. De PP-populatie is de populatie van patiënten die een poging tot ontdooien ondergaat.

Brongegevens zijn papieren case report-formulieren (CRF).

• studie ID-nummer
• geboortedatum (vrouwelijke patiënt)
• leeftijd vrouw (jaar)
• leeftijd man (jaar)
• type stimulatieprotocol (Antagonist/Agonist-protocol, kort/lang protocol)
• type gonadotrofine gebruikt (uFSH, rFSH, HMG, mix, Elonva)
• totale dosis gonadotropines
• soort eicelinseminatie (IVF, ICSI)
• Datum en tijd van trigger
• Type en dosis triggermedicatie
• Datum en tijd van ophalen van de eicel
• Datum van randomisatie
• studiegroep
• datum en tijd van IVF/ICSI
• datum en tijd bemestingscontrole (2PN beoordeling)
• aantal bevruchte eicellen (2PN oöcyten)
• reden voor vitrificatie (surplus vs. keuzevak)
• datum en tijd van vitrificatie (begin/einde)
• duur van de vitrificatieprocedure (minuten)
• datum en tijd van opwarmen (begin/einde)
• duur van de opwarmprocedure (minuten)
• aantal opgewarmde 2PN-oöcyten
• aantal vitale 2PN-oöcyten
• aantal topkwaliteit embryo's op dag 2, dag 3, dag 5 en dag 6 (afhankelijk van dag van embryotransfer)
• aantal teruggeplaatste embryo's
• aantal gerevitrificeerde embryo's
• cyclusresultaat (geen zwangerschap, positieve hCG-test)
• verloop van de zwangerschap (abortus, abortus, verdwijnende tweeling, etc.)
• Multipliciteit (singleton, twin, triplet)
• zwangerschapsuitkomst (klinische zwangerschap, doorgaande zwangerschap, levendgeborene)

Beschrijvende statistieken zullen worden uitgevoerd door mediaan, gemiddelde, n, standaarddeviatie, bereiken en 95% betrouwbaarheidsintervallen (BI) te analyseren. De verschillen tussen armen zullen worden samengevat als absoluut verschil met 95% BI. Voor de primaire uitkomst zal een lineair model worden geconstrueerd dat uitsluitend rekening houdt met de behandelingsgroep, de onderzoekslocatie en de randomisatielaag voor de per-protocolpopulatie.

Voor secundaire uitkomsten zullen ITT- en/of PP-analyses worden uitgevoerd. Er is geen correctie voor multipliciteit gepland. Parametrische en niet-parametrische tests zullen worden gebruikt voor respectievelijk normaal verdeelde en niet-normaal verdeelde variabelen om secundaire uitkomsten tussen groepen te vergelijken.

De patiëntgegevens worden gepseudonimiseerd ingevoerd in een computerdatabase. Het gegevensbeheer en de analyse worden uitgevoerd door de hoofdonderzoeker.