eSET eller eDET associerad med PGT i IVF (SetDetPgt)

Infertilitet är ett viktigt folkhälsoproblem, som drabbar mellan 8 och 12 % av par i reproduktiv ålder och leder till en hög förekomst av barnlösa par (Bergstrom, 1992; Ombelet och Campo, 2007). Efterfrågan på infertilitetsbehandling ökar på grund av sociokulturella faktorer som försenad graviditet, högre förekomst av sexuellt överförbara sjukdomar, överviktsfrekvens och större acceptans för de tillgängliga behandlingarna. Nya uppskattningar har visat att mer än 1,8 miljoner behandlingar för assisterad befruktning (ART) utfördes 2010 och att mer än 6 miljoner födda barn föddes med hjälp av ART (Dyer et al., 2016).

In vitro fertiliseringstekniker (IVF) har förbättrat prestanda och ger för närvarande en överföringshastighet för levande embryon som är cirka 25 %. Framgången för IVF-tekniker beror dock på maximal effektivitet i varje behandlingssteg, från kontrollerad äggstocksstimulering till att erhålla tillräckligt antal mogna ägg av god kvalitet, optimala embryoodlingsförhållanden, tillgång till embryon av god kvalitet för överföring och ett adekvat endometrium för implantation. Förändringar i klinisk praxis och laboratoriepraxis såsom överföring av embryon i blastocyststadiet, förbättring av kryokonserveringstekniker, överföring av tinade embryon efter endometriepreparering och single embryo transfer (SET), har i allt högre grad indikerats för patienter med god prognos. Samtidigt är användningen av SET och frysning av alla embryon för senare överföring av tinade embryon de viktigaste paradigmen för ART de senaste åren (Chambers et al., 2016).

Trots en variation mellan länder som påverkas av täckning av hälsoplaner, lagstiftning, guider till medicinska samhällen, befolkning och kultur, i Europa är i genomsnitt 20 % av överföringarna enstaka, med upp till 69 % av cyklerna i Sverige. I USA är den elektiva SET fortfarande låg, cirka 10 % bland kvinnor upp till 35 år (Maheshwari et al., 2011; Practice Committee of the Society for Assisted Reproductive and Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine, 2012 ). Trots rekommendationer och ökad SET-praxis är frekvensen av flera graviditeter i IVF-tekniker fortfarande höga i det totala genomsnittet, runt 20-25 %, som ett resultat av motståndet att använda SET och upprätthålla överföringen av flera embryon i syfte att erhålla högre graviditetsfrekvens (Naasan et al., 2012, Kupka et al., 2014, Ishihara et al., 2015). Detta motstånd beror på tanken att överföring av mer än ett embryo kan öka risken för graviditet. Denna praxis tar dock inte hänsyn till ökningen av maternala och perinatala komplikationer på grund av multipelgraviditeter (Min et al., 2010; Practice Committee of American Society for Reproductive, 2012). Dessutom har studier visat att kumulativa födelsetal efter överföring av två SET-cykler är jämförbara med en enda överföring av två embryon (Pandian et al., 2009; Chambers och Ledger, 2014).

Historiskt sett är det känt att bland det totala antalet hämtade oocyter är det bara en begränsad mängd av dem som har potentialen att generera en fullgångsdräktighet. Således är embryoselektion ett avgörande steg för framgången med IVF-tekniker och effektiviteten av denna process är relaterad till minskningen av antalet embryon som ska överföras, eftersom när det väl är möjligt att välja embryon med större implantationspotential, överföring av färre embryon blir mer genomförbara och effektiva. I rutinen baseras det embryonala urvalet på morfologiska kriterier och egenskaper hos embryonutveckling för att härleda dess implantationspotential (Ebner et al., 2003).

Efter kontrollerad ovariestimulering uppvisar cirka 50 % av embryona kromosomförändringar (Munne et al., 1995). Sedan blir den embryonala genetiska utvärderingen alltmer använd för urvalet av euploida embryon för överföring. Blastocystbiopsi associerad med kromosomal screening har visat sig vara mycket förutsägande för blastocystutvecklingspotential (Scott et al., 2012), vilket ökar chanserna för implantation genom val av euploida blastocyster för överföring i färska (Scott et al., 2013) och frysta -upptinade cykler (Schoolcraft och Katz-Jaffe, 2013).

Dessutom är preimplantationsgenetisk screening (PGS) indikation för hög moderns ålder (Schoolcraft et al., 2009), upprepad implantationssvikt (Blockeel et al., 2008; Rubio et al. 2013), upprepade missfall (Shahine och Lathi, 2014) ) och allvarlig manlig faktor (Harper och Sengupta, 2012). På senare tid har användning av PGS i fall av god prognos för embryoselektion i SET-cykler föreslagits för både unga och goda prognospatienter (Yang et al., 2012), såväl som för de i hög ålder (Schoolcraft och Katz - Jaffe, 2013), med en viktig ökning av embryoöverföringshastigheten förknippad med en minskning av antalet flerfaldig graviditet (Ubaldi et al., 2015).

PGD ​​utfördes initialt med fluorescerande in situ hybridiseringsteknik (FISH) från embryobiopsi på den tredje dagen av utvecklingen och analysen av en eller två blastomerer genom att utvärdera ett begränsat antal kromosomer. Utvecklingen av denna teknologi ledde till fullständig analys av de 24 kromosomerna genom den jämförande genomhybridiseringsplattformen (CGH) associerad med embryobiopsi i blastocyststadiet och utvärdering av ett större antal celler extraherade från trophectoderm. Detta tillvägagångssätt är förknippat med högre grad av klinisk graviditet, förbättrat embryoselektion i SET-cykler och minskad multipelgestation hos patienter med god prognos (Dahdouh et al., 2015). På senare tid har nästa generations sekvenseringsplattform (NGS) använts och validerats för embryonal genetisk analys i IVF, som används för helgenomamplifiering (WGA), med fördelen att vara en teknologi med potential att förbättra den embryonala kromosomdiagnosen när det gäller robusthet, automatisering och förmåga att upptäcka aneuploidier (Fiorentino et al., 2014; Wells et al., 2014).

En nyligen genomförd studie som utvecklats av forskargruppen tyder på att patienter med god prognos som utför SET i en ny cykel och inte blev gravida inte drar nytta av att få en andra överföring av två embryon, eftersom graviditetsfrekvensen är liknande den hos patienter som fick ett embryo vid den andra överföringen, med nackdelen att ha en hög förekomst av flerbördsgraviditeter. Dessa resultat som erhållits i en retrospektiv studie indikerar redan fördelarna med att utföra SET på ett sekventiellt sätt, vilket främjar tillfredsställande dräktighetshastigheter och säkerhet för mamman och barnet med avseende på flerfaldig graviditet för patienter med god prognos (Monteleone et al., 2016).

Baserat på dessa principer anser forskarna att elektiv enstaka embryoöverföring (SET) associerad med preimplantationsgenetisk diagnos av NGS (NGS + SET) för patienter med god prognos kan resultera i högre framgångsfrekvenser för IVF-cykler och samtidigt minska flerbördsgraviditeter , samt risker för mödra-foster och neonatal som ärvs av detta tillstånd. Dessa protokoll antas resultera i höga frekvenser av klinisk graviditet med mindre förekomst av aborter och större övergripande framgång för behandlingen. För att bevisa denna hypotes föreslår utredarna en studie som jämför resultaten av IVF-behandlingar hos patienter som får den elektiva överföringen av enstaka embryo genetiskt utvärderade av NGS (NGS + SET) och elektiv överföring av två embryon genetiskt utvärderade av NGS (NGS + DET). Som en kontroll kommer denna studie att inkludera embryoöverföringsgrupper utan preimplantationsgenetisk diagnos av NGS, det vill säga de som väljs ut för överföring endast från morfologiska kriterier som rutin, som också är förknippade med den elektiva överföringen av ett (SET) eller två embryon (DET) ). I händelse av icke-graviditet i den första cykeln av IVF, kommer det att ske efterföljande överföringar av ett eller två embryon för varje grupp tills de återstående embryona är uttömda eller tills patienten når dräktigheten. Det primära resultatet kommer att vara den kumulativa graviditetsfrekvensen per behandlingscykel. Detta tillvägagångssätt kommer att tillåta att bekräfta eller inte hypotesen att genetisk analys är effektiv för att förbättra embryoselektionsprocessen och associerad med SET kommer att öka frekvensen av klinisk graviditet och minska frekvensen av multipla graviditeter och missfall.