Enterický povlak jako faktor rezistence na aspirin

V nedávné studii jsme prokázali jasný důkaz farmakokinetické rezistence na aspirin u zdravých dobrovolníků v důsledku špatné biologické dostupnosti enterosolventního aspirinu. Je však nutné potvrdit, že farmakokinetická rezistence je důležitým faktorem rezistence na aspirin i v populaci pacientů. Abychom toho dosáhli, porovnáme odpověď pacientů na enterosolventní aspirin a obyčejný aspirin v otevřené zkřížené studii u pacientů podstupujících léčbu enterosolventním aspirinem.

Populace pacientů: Pacienti se budou rekrutovat z kliniky Dr. Davida Foleyho v nemocnici Beaumont. Všichni pacienti, kterým byl předepsán enterosolventně potažený aspirin (75 mg, jakákoli značka), budou považováni za způsobilé pro zařazení za předpokladu, že jsou způsobilí dát informovaný souhlas. Za způsobilé budou považováni pacienti s jakoukoli diagnózou, v jakémkoli věku a ti, kteří užívají jiné léky. Pacienti, kteří pravděpodobně ukončí léčbu aspirinem během několika týdnů kvůli plánované operaci nebo kteří vykazují známky nežádoucích účinků aspirinu, budou vyloučeni. Pacienti, kteří již byli zařazeni do klinické studie, budou rovněž vyloučeni.

Návrh studie: Po získání informovaného souhlasu bude domluvena schůzka s pacientem, aby se vrátil k odběru krve (ideálně 1-2 týdny). Pacient bude upozorněn na důležitost compliance a bude požádán, aby si vedl deník užívání aspirinu. Při plánované návštěvě bude odebrán vzorek krve a pacientovi bude doporučeno pokračovat v užívání aspirinu a že bude informován o výsledku testu do týdne.

Po vyhodnocení funkce krevních destiček budou pacienti s adekvátní inhibicí funkce krevních destiček informováni, že jejich dávka aspirinu je v pořádku, bude jim připomenuta důležitost compliance a jejich role ve studii ukončena. Pacienti, kteří nesplňují cílovou úroveň inhibice, budou požádáni, aby se vrátili do nemocnice, kde budou převedeni na obyčejný aspirin. Budou požádáni, aby se po dvou týdnech vrátili na další návštěvu. Poté bude znovu vyhodnocena funkce krevních destiček. Pokud je dosaženo cílové inhibice, budou ze studie ukončeni a se souhlasem svého lékaře budou převedeni na prostý aspirin pro budoucí použití. Ti pacienti, kteří nedosáhnou cílové inhibice, budou převedeni na 150 mg obyčejného aspirinu denně. V případě potřeby se použije konečné zvýšení na 300 mg.

Testy funkce krevních destiček Sérový tromboxan. Zlatým standardem testu účinků aspirinu bude produkce tromboxanu v séru, jak bylo stanoveno pomocí ELISA. Do zkumavky se sérem se odebere 5ml vzorek krve a inkubuje se při 37ºC po dobu 30 minut. Zkumavka bude poté odstředěna a sérum odstraněno a zmrazeno při -20ºC až do analýzy. V předchozí studii byly výchozí hladiny tromboxanu v séru u zdravých dobrovolníků 276±99 ng/ml (±SD; n=142), takže 95% inhibice by představovala 13 ng/ml. Již dříve jsme ukázali, že hodnota tromboxanu v séru 2,2 ng/ml je účinnějším markerem funkce krevních destiček. Tento test nebude ovlivněn jinými léky kromě antikoagulancií, jako je warfarin.

Agregace vyvolaná kyselinou arachidonovou. Druhým testem pro měření účinnosti aspirinu je agregace vyvolaná kyselinou arachidonovou. Krev se odebere do citrátu sodného a odstředí, aby se vytvořila plazma bohatá na krevní destičky. Kyselina arachidonová bude

Experimentální design (pokračování)

přidán k PRP a míchán v agregometru destiček. U zdravých dobrovolníků prostý aspirin snížil agregační odpověď na 4 % agregace.

Supernatant tromboxan. Nedávno jsme vyvinuli nový test, který je extrémně citlivý na inhibici aspirinem. Toto je ve skutečnosti kombinace dvou výše popsaných testů. Supernatant z experimentu s agregací vyvolanou kyselinou arachidonovou se shromáždí a zmrazí při -20 °C. Hladiny tromboxanu v těchto vzorcích budou stanoveny pomocí ELISA.

Verify Now (aspirin): Testy v místě péče jsou velmi užitečné pro diagnostiku rezistence na aspirin. Umožňuje okamžitou zpětnou vazbu pro lékaře a umožňuje okamžité přijetí nápravných opatření. Jedním z nejúčinnějších zařízení point-of-care je zařízení Ultegra Verify Now od Accumetrics. Jedná se o systém založený na kazetách, který monitoruje agregaci v reakci na kyselinu arachidonovou v plné krvi. Malý alikvot krve bude testován na rezistenci na aspirin pomocí testu Verify Now.

Výsledek studie.

1. Tato studie poskytne odhad výskytu neúplné inhibice COX u pacientů užívajících enterosolventně potažený aspirin. Plánujeme nábor 50 pacientů s <95% inhibicí, což poskytne odchylku 15% odhadu.
2. Zjistíme, zda je za tuto neúplnou inhibici odpovědný enterosolventní povlak aspirinu.
3. Zjistíme, zda pacienti s neúplnou inhibicí COX na obyčejném aspirinu mohou mít prospěch ze zvýšené dávky aspirinu.
4. Získáme data o senzitivitě a spolehlivosti různých testů odpovědi na aspirin.

Přínosy výzkumu. Kardiovaskulární onemocnění jsou i dnes hlavní příčinou úmrtí v Irsku. Léčba nízkými dávkami aspirinu je klíčovou strategií v prevenci dalších kardiovaskulárních příhod. V poslední době se enterosolventní aspirinové přípravky staly standardem navzdory nedostatku informací o jejich bioekvivalenci s prostým aspirinem. Bylo prokázáno, že špatně definovaný fenomén rezistence na aspirin má nepříznivý dopad na přínos léčby aspirinem, což je spojeno s používáním enterosolventního aspirinu. Tato studie nám umožní kvantifikovat rozsah nereakce na aspirin u pacientů na enterosolventně potažený aspirin a potvrdit, zda použití prostého aspirinu překoná tuto rezistenci. To poskytne velmi nákladově efektivní řešení hlavního problému ve strategiích léčby kardiovaskulárních onemocnění.