Powłoka jelitowa jako czynnik oporności na aspirynę

W niedawnym badaniu wykazaliśmy wyraźne dowody na farmakokinetyczną oporność na aspirynę u zdrowych ochotników z powodu słabej biodostępności aspiryny powlekanej dojelitowo. Konieczne jest jednak potwierdzenie, że oporność farmakokinetyczna jest ważnym czynnikiem oporności na aspirynę również w populacji pacjentów. Aby to osiągnąć, porównamy odpowiedź pacjentów na aspirynę powlekaną dojelitowo i zwykłą aspirynę w otwartym badaniu krzyżowym u pacjentów poddawanych leczeniu aspiryną powlekaną dojelitowo.

Populacja pacjentów: Pacjenci będą rekrutowani z kliniki dr Davida Foleya w szpitalu Beaumont. Wszyscy pacjenci, którym przepisano aspirynę dojelitową (75 mg, dowolnej marki), zostaną uznani za kwalifikujących się do rejestracji, pod warunkiem, że są kompetentni do wyrażenia świadomej zgody. Pacjenci z jakąkolwiek diagnozą, w każdym wieku i ci przyjmujący inne leki zostaną uznani za kwalifikujących się. Pacjenci, którzy prawdopodobnie zakończą leczenie aspiryną w ciągu kilku tygodni z powodu planowanej operacji lub wykazują oznaki działań niepożądanych aspiryny, zostaną wykluczeni. Pacjenci już włączeni do badania klinicznego również zostaną wykluczeni.

Projekt badania: Po uzyskaniu świadomej zgody pacjentka zostanie umówiona na wizytę w celu pobrania próbki krwi (najlepiej 1-2 tygodnie). Pacjent zostanie przypomniany o znaczeniu przestrzegania zaleceń i poproszony o prowadzenie dziennika stosowania aspiryny. Na umówionej wizycie zostanie pobrana próbka krwi, a pacjent zostanie poinformowany o dalszym przyjmowaniu aspiryny oraz o wyniku badania zostanie poinformowany w ciągu tygodnia.

Po ocenie czynności płytek pacjenci z odpowiednim zahamowaniem czynności płytek krwi zostaną poinformowani, że dawka aspiryny jest odpowiednia, przypomni się o znaczeniu przestrzegania zaleceń lekarskich i zakończeniu ich roli w badaniu. Pacjenci, którzy nie osiągną docelowego poziomu hamowania, zostaną poproszeni o powrót do szpitala, gdzie zostaną przestawieni na zwykłą aspirynę. Zostaną poproszeni o powrót po dwóch tygodniach na kolejną wizytę. Czynność płytek krwi zostanie następnie ponownie oceniona. Jeśli docelowe hamowanie zostanie osiągnięte, zostaną przerwani z badania i za zgodą lekarza zostaną przestawieni na zwykłą aspirynę do przyszłego stosowania. Pacjenci, u których nie osiągnięto docelowego hamowania, zostaną przestawieni na 150 mg zwykłej aspiryny dziennie. W razie potrzeby zostanie zastosowane ostateczne zwiększenie dawki do 300 mg.

Testy czynnościowe płytek krwi Tromboksan w surowicy. Złotym standardem testu działania aspiryny będzie produkcja tromboksanu w surowicy, co oznacza test ELISA. Próbka krwi o objętości 5 ml zostanie pobrana do probówki z surowicą i inkubowana w temperaturze 37ºC przez 30 minut. Następnie probówka zostanie odwirowana, a surowica usunięta i zamrożona w temperaturze -20ºC do czasu analizy. W poprzednim badaniu wyjściowy poziom tromboksanu w surowicy zdrowych ochotników wynosił 276±99 ng/ml (±SD; n=142), a zatem 95% zahamowanie odpowiadałoby 13 ng/ml. Wcześniej wykazaliśmy, że wartość tromboksanu w surowicy wynosząca 2,2 ng/ml jest bardziej skutecznym wskaźnikiem funkcji płytek krwi. Na ten test nie będą miały wpływu inne leki, z wyjątkiem antykoagulantów, takich jak warfaryna.

Agregacja indukowana kwasem arachidonowym. Drugim testem mierzącym skuteczność aspiryny jest agregacja indukowana kwasem arachidonowym. Krew zostanie pobrana do cytrynianu sodu i odwirowana w celu wytworzenia osocza bogatopłytkowego. Będzie kwas arachidonowy

Projekt eksperymentalny (ciąg dalszy)

dodano do PRP i mieszano w agregometrze płytek krwi. U zdrowych ochotników zwykła aspiryna zmniejszała reakcję agregacji do 4%.

Supernatant tromboksan. Niedawno opracowaliśmy nowy test, który jest niezwykle wrażliwy na hamowanie przez aspirynę. W rzeczywistości jest to połączenie dwóch testów opisanych powyżej. Supernatant z eksperymentu agregacji indukowanej kwasem arachidonowym zostanie zebrany i zamrożony w temperaturze -20ºC. Poziomy tromboksanu w tych próbkach zostaną określone metodą ELISA.

Zweryfikuj teraz (aspiryna): testy przyłóżkowe są bardzo przydatne do diagnozowania oporności na aspirynę. Pozwala na natychmiastową informację zwrotną dla lekarza i natychmiastowe podjęcie działań naprawczych. Jednym z bardziej efektywnych urządzeń point-of-care jest urządzenie Ultegra Verify Now firmy Accumetrics. Jest to system oparty na wkładach, który monitoruje agregację w odpowiedzi na kwas arachidonowy we krwi pełnej. Niewielka porcja krwi zostanie zbadana pod kątem oporności na aspirynę przy użyciu testu Verify Now.

Wynik badania.

1. To badanie dostarczy oszacowania częstości niecałkowitego hamowania COX u pacjentów przyjmujących aspirynę z powłoką dojelitową. Planujemy rekrutację 50 pacjentów z zahamowaniem <95%, co zapewni margines błędu 15% w stosunku do oszacowania.
2. Ustalimy, czy otoczka jelitowa aspiryny jest odpowiedzialna za to niecałkowite zahamowanie.
3. Ustalimy, czy pacjenci z niepełnym zahamowaniem COX na zwykłej aspirynie mogą odnieść korzyść ze zwiększonej dawki aspiryny.
4. Uzyskamy dane dotyczące czułości i wiarygodności różnych testów odpowiedzi na aspirynę.

Korzyści z badania. Choroby sercowo-naczyniowe są nadal główną przyczyną zgonów w Irlandii. Leczenie małymi dawkami aspiryny jest kluczową strategią zapobiegania dalszym zdarzeniom sercowo-naczyniowym. Ostatnio preparaty aspiryny powlekane dojelitowo stały się standardem pomimo niedostatku informacji na temat ich biorównoważności ze zwykłą aspiryną. Wykazano, że słabo zdefiniowane zjawisko oporności na aspirynę ma niekorzystny wpływ na korzyści z leczenia aspiryną, co jest związane ze stosowaniem aspiryny powlekanej dojelitowo. To badanie pozwoli nam określić ilościowo zakres braku odpowiedzi na aspirynę u pacjentów przyjmujących aspirynę powlekaną dojelitowo i potwierdzić, czy użycie zwykłej aspiryny pokona tę oporność. Zapewni to bardzo opłacalne rozwiązanie głównego problemu w strategiach leczenia chorób sercowo-naczyniowych.