Vliv probiotik na pH plaku. Randomizovaná dvojitě slepá intervenční studie

Před zahájením studie budou shromážděna demografická, etnická a prognostická data (fáze screeningu). Bude odebrána anamnéza s dokumentací o předchozí a souběžné léčbě a zkoušející provede klinické vyšetření dutiny ústní (stav chrupu, sliznice dutiny ústní). Pokud testovaný subjekt splní všechna zařazovací kritéria, aniž by splnil některé z vyřazovacích kritérií, bude zařazen do klinického hodnocení a bude mu přiděleno identifikační číslo testovaného subjektu.

Všechny testované osoby obdrží ve fázi screeningu deník pacienta.

Vymývací fáze I (1 týden):

Testované osoby budou pro každodenní ústní hygienu používat pouze zubní pastu s obsahem fluoru dodanou sponzorem. Rovněž bude poskytnut měkký zubní kartáček.

Testované osoby také obdrží deník pacienta, který je informuje, že během léčebné fáze nesmí používat žádné přípravky pro ústní hygienu obsahující fluor (zubní pasty, ústní vody, gely atd.) kromě studijní zubní pasty, pít jakýkoli fluorid -obsahující minerální vodu nebo černý čaj nebo jíst jakékoli rybí pokrmy.

Léčebná fáze I (6 týdnů):

Po vymývací fázi I zahájí testované osoby první fázi léčby. Měření pH plaku po 1 týdnu.

Všechny subjekty jsou poučeny o ústní hygieně a o konzumaci studovaného produktu.

Fáze léčby II (1 týden po):

Testované osoby budou pro každodenní ústní hygienu používat pouze zubní pastu s obsahem fluoru dodanou sponzorem. Rovněž bude poskytnut měkký zubní kartáček. Měření pH plaku.

1. MATERIÁLY A METODY 1.1 Klinické parametry DMFT index, gingivální index

   1.2 Vyšetřování faktorů slin Faktory slin pH a rychlost průtoku budou měřeny během fáze screeningu ve třech dnech, vždy ráno. Vypočte se průměr ze tří měření.

   Bude použita testovací souprava Dentobuff® (Vivadent, Lichtenštejnsko).

   1.3 Technika čištění zubů Testované subjekty si musí čistit zuby třikrát denně zubní pastou obsahující fluor a měkkým zubním kartáčkem. Během této doby bude do nádoby každý den vkládána čerstvá, vlhká gáza (namočená ve vodě), aby bylo zajištěno vlhké prostředí pro spotřebiče. Vzorky by se neměly nechat vyschnout.

   Samotné vzorky skloviny se rovněž pečlivě čistí měkkým zubním kartáčkem kromě posledního dne každé menstruace.

   1.4 Randomizace Pomocí počítačového programu (Excel 2003 pro Mac OsX) bude randomizace provedena individuálně.

   1.5 Aplikace studijního produktu Subjektům není dovoleno žvýkat pastilky. Mohou polykat pastilky.

   1.6 Hodnocení pH plaku Na konci každé fáze bude acidogenicita plaku hodnocena pomocí techniky MicroTouch po předchozím testu sacharózou. U každého vzorku bude provedeno hodnocení pH. pH bude měřeno v pěti opakováních v 6 různých časových bodech: na základní linii (před opláchnutím sacharózou) a 2, 5, 10, 20 a 30 minut po 1 minutovém oplachu 10 ml 10% sacharózy za použití aktivních pohybů.

   Bude použita iridiová dotyková mikroelektroda (průměr 0,1 mm; Beetrode® NMPH-1, World Precision Instruments, Sarasota, Florida, USA, s porézní skleněnou referenční elektrodou (MERE 1, World Precision Instruments). Mezi referenční elektrodou a prstem subjektu se vytvoří solný můstek v roztoku KCl (3 M). Před každým sezením hodnocení pH bude elektroda kalibrována pomocí roztoku pufru při pH 7,00 a 4,00.

2. STATISTICKÉ METODY A STANOVENÍ VELIKOSTI VZORKU 2.1 Plánovaná analýza Popisná souhrnná statistika bude vypočítána pro všechny parametry dokumentované ve formuláři případové zprávy (CRF).

Kvantitativní parametry budou popsány sedmibodovými stupnicemi s průměrem, směrodatnou odchylkou, mediánem, kvartily, minimem a maximem. U kvalitativních proměnných budou uvedeny absolutní a relativní četnosti. Všechny popisy budou provedeny samostatně pro léčebné skupiny a návštěvy.

Úplná statistická analýza včetně podrobností, jako jsou metody řešení odlehlých hodnot, chybějící hodnoty, údaje o zakázaných souběžných medikamentech, zakázané výživě nebo jiných možných nesrovnalostech, bude stanovena v podrobnějším plánu statistické analýzy, který bude aktualizován během slepého přezkoumání data před aplikací randomizačního kódu na data pro konečnou analýzu.

Aby bylo zajištěno, že databáze přesně odráží údaje uvedené v CRF, použije se postup dvojího zadávání údajů (údaje zadané různými zaměstnanci do dvou samostatných datových souborů). Kromě elektronického srovnání těchto dvou datových souborů bude validace dat kontrolovat rozsahy, konzistenci a věrohodnost. Nejasná data projdou procesem čištění dat ("dotazy"). Jakékoli změny provedené na datech v databázi během čištění dat budou zaznamenány do speciálního log souboru. Po dokončení čištění dat bude databáze zmrazena.

Vhodný ověřený software (např. SAS, SPSS) budou použity pro zpracování dat a statistické vyhodnocení.

Konfirmativní statistické testování Pro konfirmativní statistické testování bude použit model analýzy rozptylu (ANOVA) jako globální test, zahrnující léčebné sekvence jako „mezi faktory subjektu" a podmínky léčby jako „v rámci faktorů subjektu".

Úplná analýza bude podrobně popsána ve specifickém plánu statistické analýzy před odlepením dat.

Úprava chyby I. typu v důsledku vícenásobného testování není nutná z důvodu předchozího řazení hypotéz. Testování hypotéz musí být zastaveno, pokud nulová hypotéza nemůže být zamítnuta na úrovni chyby α 5 %. Tento postup udržuje konstantní globální úroveň α = 5 %.