Epigenetický dopad psychoterapeutického programu u dospívajících se závažnými nežádoucími zkušenostmi

Vyšetřovatel navrhuje randomizovanou kontrolovanou klinickou studii, které by se měli zúčastnit dospívající, kteří jsou v procesu obnovení svých práv s Kolumbijským institutem sociální péče o rodinu. Studijní tým bude porovnávat stavy metylace genomu vzorků slin od skupiny 21 dospívajících (děti ve věku 13 až 16 let), [oba] před a po 8denní rezidenční intervenci (psychoterapeutický program IP-Columbia). Bude zahrnuta randomizovaná kontrolní skupina (čekací listina) (n=21), ze které budou odebrány základní vzorky a vzorky po 8 dnech v jejich obvyklých životních podmínkách. Pro randomizaci bude hodnocení expozice stresu v dětství měřeno pomocí dotazníku o nepříznivých zkušenostech.

Program IP-Columbia je vícesložková intervence prováděná v rámci terapeutického tábora, založená na terapiích Desenzibilizace a přepracování pohybu očí (EMDR) a intervencích založených na všímavosti. Vedle intervencí jsou prováděny aktivity na podporu zdravého životního stylu, empatie, [a] rozpoznávání a vyjadřování emocí prostřednictvím cvičení, výtvarných dílen, hudební tvorby, tance a divadla. Předchozí studie provedené nadací Colombia Innocence in Danger Foundation prokázaly významné účinky protokolu IP-Columbia při léčbě dětí s posttraumatickou stresovou poruchou spojenou s těžkým mezilidským násilím. Za tuto intervenci bude odpovědný tým Kolumbijské nadace Innocence in Danger Foundation, který má 10 let zkušeností s touto intervencí, která využila přibližně 380 chlapců, dívek a teenagerů.

Molekulární analýzu bude koordinovat Dr. Perla Kaliman, spolupracující výzkumná pracovnice Centra pro zdravé mysli na University of Wisconsin-Madison pod vedením Dr. Richarda Davidsona. Dr. Kaliman ve spolupráci s Dr. Davidsonem provedl první studie ukazující epigenetické účinky intervencí na snížení stresu. Zpracování DNA a analýza methylomu bude provedena na University of Wisconsin-Madison v laboratoři Dr. Reida Alische [] týmem uznávaným po celém světě pro své zkušenosti s epigenetikou nežádoucích zkušeností u mladých lidí.

Vzorky slin budou odebrány v duplikátech za použití souprav Oragene pro analýzu methylace DNA (DNA Genotek, Kanada). Vzorky budou odeslány ihned po odběru při pokojové teplotě do Centra pro zdravé mysli (Madison, Wisconsin).

DNA bude extrahována pomocí soupravy Qiagen pro vzorky lidských slin podle protokolu výrobce. Vzorky genomové DNA budou analyzovány v 1% agarózovém gelu, aby se ověřilo, že DNA má vysokou molekulovou hmotnost, a budou kvantifikovány pomocí Qubit (Qiagen, USA). Úrovně methylace DNA budou stanoveny pomocí HumanMethylation450 (Illumina) a hodnoty beta budou získány pomocí balíčku R min. Methylační data, která odpovídají methylaci v jednonukleotidovém polymorfismu (SNP), budou z analýzy vyřazena, pokud obsahují SNP v sondě, pokud je známo, že zkříženě reagují, nebo pokud má vzorek detekční P-hodnotu > 0,01.